báo cáo thực hành hóa dược

báo cáo thực hành hóa dược full 4 bàibài 1 kiểm nghiệm glucosebài 2 kiểm nghiệm procain hydroclorid, định tính lidocain hydroclorid, định tính lidocain hydrocloridbài 3 kiểm nghiệm isoniazid, định tính chloramphenicolbài 4 kiểm nghiệm ampicillin, định tính sulfonamide

Nhóm: - Tổ 1 Lê Thị Cẩm Tiên Nguyễn Đức Minh Nguyễn Văn Đức BÁO CÁO THỰC HÀNH HÓA DƯỢC Bài 1:KIỂM NGHIỆM GLUCOSE Mục tiêu: -Trình bày ngun tắc phép thử định tính glucose,các phép thử tinh khiết glucose,các phương pháp định lượng glucose - Thực hành tốt kiểm nghiệm glucose dược dụng( tiến hành định lượng glucose phương pháp đo iod) Cơng thức: Ptl: glucose khan C6H12O6 có ptl :180,2 Glucose ngậm phân tử nước C6H12O6.H2O có ptl : 198,2 Ι: Tính chất - Vật lý: bột kết tinh trắng ,vị - Độ tan: dễ tan nước tan ethanol II: Định tính  Thí nghiệm 1: glucose tác dụng với đồng sulfat Nguyên tắc: glucose polyalcol,lại có chứa nhóm chức aldehyl nên có tính khử cho phản ứng sau: ml cp giọt HNO3 10% giọt AgNO3 5% trắng lổn nhổn Tiến hành Hòa tan 0,2g glucose vào 2ml nước, thêm 0,5ml dung dịch CuSO4 10% 1ml dung dịch NaOH 10% Đun nóng - Hiện tượng - Sau đun nóng, tạo thành tủa đỏ nâu Kết luận giải thích -Glucose có nhóm chức CHO nên khử Cu2+ thành Cu2O -Kết tủa nâu đỏ Cu2O Thí nghiệm 2: glucose tác dụng với AgNO3 NH3 Nguyên tắc: tính khử glucose Tiến hành Hiện tượng -Sau đun nóng , dd Hịa tan 0,2g glucose vào chuyển sang màu đen có 2ml nước , thêm 0,5ml dung lớp kim loại bám vào thành dịch AgNO3 10% 1ml ống nghiệm dung dịch NH4OH 10% Đun nóng Kết luận giải thích -Trong glucose có nhóm CHO tham gia phản ứng tráng gương ,khử Ag+ thành Ag -Kết tủa đen Ag III:Thử tinh khiết: Thử kim loại nặng glucose: Nguyên tắc: thử kim loại nặng(Pb), cho phản ứng với ion S2- cho kết tủa dd màu đen(PbS) Thuốc thử dùng Thioacetamid So màu với dd chì mẫu với điều kiện phản ứng Tiến hành Hiện tượng Kết luận giải thích  Ống chuẩn:10ml H2O, 2ml glucose, 2ml đệm acetat pH=3,5; 1,2ml Thioacetamid  Ống mẫu: 10ml dd chì mẫu 1ppm, 2ml glucose, 2ml đệm acetat pH=3,5; 1,2ml Thioacetamid  Ống thử: 12ml glucose, 2ml đệm acetat pH=3,5; 1,2ml Thioacetamid -Ống thử có màu khơng đậm ống mẫu -Ống chuẩn có màu nhạt so với ống trắng (theo thứ tự từ trái qua phải: ống chuẩn, ống mẫu, ống thử) (theo thứ tự từ lên: ống chuẩn, mẫu, thử) IV: Định lượng glucose Nguyên tắc: Glucose bị oxh chậm phản ứng iod môi trường kiềm tạo thành muối acid gluconic Phản ứng ổn định môi trường kiềm nhẹ Na 2CO3 Cho vào dd cần chuẩn độ lượng xác iod dư Sau phải ứng oxh kết thúc , acid hóa mơi trường để giải phóng I từ NaIO phản ứng I 2và Na2S2O3 cần môi trường acid Cuối chuẩn độ iod dư dung dịch Na2S2O3 0,1N thị hồ tinh bột I2 + Na2CO3 + CHO + H2O → NaIO +NaI +2NaHCO3 NaIO → R-COONa + NaI Trong R CH2OH-(CHOH)4 Tiến hành Cân 0,1g glucose hòa tan với 50ml nước bình định mức dung tích 250ml có nút mài -thêm xác 25ml dung dịch iod 0,1N buret -thêm 10ml dung dịch Na2CO3 5% lắc,trộn Đậy nút bình để vào chỗ tối khoảng 20p - Lấy bình ra, thêm từ từ 15ml H2SO4 10% vừa lắc nhẹ - Chuẩn đô iod dư Na2S2O3 với thị hồ tinh bột Chuẩn bị mẫu trắng :tiến hành song song tương tự mẫu thử khơng có chế phẩm Hiện tượng -trước chuẩn độ Kết luận Áp dụng CT: (V.N)I2 = (V.N)Na2S2O3 chuẩn độ I2 dư Na2S2O3 ta có: VI2 dư = VNa2S2O3 Trong mẫu trắng VI2 dư = VNa2S2O3 =V1 (ml) Trong mẫu thử Mẫu trắng Mẫu thử VI2dư = VNa2S2O3 = V2 (ml) +nI2 pứ = n(Glu) = ((V2 - V1)/1000)*N/2 =N*(V2 - V1)/2000 > mglucose = n*M =N(V2 V1)*M/2000 (g) > hàm lượng Glu mẫu C% 100% Kết thực nghiệm Với mcân=0,1017g; Vtrắng=18,5ml; Vthử=8,9ml C%==97,03% Với mcân= 0,1007g; Vtrắng=18,9ml; Vthử=9,1ml C%== 100,04% -sau chuẩn độ Kết luận ( hàm lượng): hàm lượng glucose với tiêu chuẩn BÁO CÁO THỰC HÀNH HÓA DƯỢC Bài 2: Kiểm nghiệm Procain hydroclorid, Định tính lidocain hydroclorid Mục tiêu:  Trình bày nguyên tắc thực phản ứng định tính Procain hydroclorid lidocain hydrocorid  Trình bày nguyên tắc chung PP chuẩn độ Nitrit ứng dụng để định lượng Procain hydroclorid đạt kết Ι Kiểm Nghiệm Procain Hydroclorid Công thức: CTPT: C13H20N2O2 HCl Ptl: 272,8 Tính chất - Vật lý: Tinh thể khơng màu hay tinh bột biến tính, không mùi - Độ tan: Rất dễ tan nước, tan ethanol 96o , thực tế không tan ether Định tính  Thí nghiệm 1: Tính khử Procain hydroclorid Nguyên tắc: Do phân tử procain có tính khử nên phản ứng với KMnO làm màu dung dịch Tiến hành Lấy 60mg dd chất thử 5% pha vào ống nghiệm, thêm 2ml nước 0,5ml acid sulfuric loãng, lắc thêm 1ml dd KMnO4 0,1% theo dõi màu tím Hiện tượng - Dung dịch trước màu Kết luận giải thích Sau phản ứng thuốc tím màu Giải thích: Do Procain amin thơm có tính khử mạnh, mà KMnO4 chất OXH nên xảy phản ứng OXH-Khử làm màu dung dịch thuốc tím -DD sau màu  Thí nghiệm 2: phản ứng tạo phẩm màu Nito Nguyên tắc: tính chất đặc trưng amin thơm bậc PTPU: ArNH2+ NaNO2+ 2HCl (Ar-NN)Cl-+ NaCl+2H2O (Ar-NN)Cl-+ ꞵ-naphtol  Phẩm màu Nito Tiến hành Hiện tượng Kết luận giải thích - Ống nghiệm 1: Hòa tan -Màu đỏ tủa đỏ phẩm màu 60mg chất thử vào 3ml dd Nito HCl 10% thêm 1,2 giọt dd NaNO2 0,1M - Ống nghiệm 2: Hòa tan 10mg ꞵ-naphtol vào 2ml dd NaOH 10% Đổ từ từ dd ống nghiệm vào ống nghiệm 2: xuất màu đỏ kết tủa đỏ KL: Procain Hydroclorid tạo phẩm màu nito với phản ứng ngưng tụ phenol cho màu đỏ tủa đỏ 3, Định lượng Procain Hydroclorid Nguyên tắc: Sử dụng PP chuẩn độ Nitrit PP dùng để định lượng chế phẩm có chứa nhóm amin thơm bậc Nhiệt độ phản ứng 5-20oC Thêm KBr làm chất xúc tác để tăng tốc độ phản ml cp ứng giọt HNO3 10% giọt AgNO3 5% trắng lổn nhổn Tiến hành Lấy xác 0,18g chế phẩm cho vào bình nón dung tích 100ml Thêm 10ml dd HCl 1N để hòa tan Thêm 10ml nước, 1g KBr chuẩn độ dung dịch NaNO2, với thị Treopeolin OO Hiện tượng -DD bình nón trước chuẩn độ Kết luận Công thức: H.100% 100%  Với VNaNO2=6,7ml m(lí thuyết)=0,18g H1 100% =101,54%  Với VNaNO2=6,65ml m(lí thuyết)=0,18g -DD sau chuẩn độ: H2=.100% =100,78% Kết luận (về hàm lượng): hàm lượng chế phẩm tiêu chuẩn cho phép ΙΙ, Định tính Lidocain Hydroclorid Cơng thức: CTPT: C14H22N2O.HCl.H2O PTL: 288,82 1, Tính chất - Vật lý: Bột kết tinh trắng khơng màu, vị đắng nhẹ Nóng chảy 74-79oC - Độ tan: Rất dễ tan nước, tan ethanol 96o , thực tế không tan ether 2, Định tính  Thí nghiệm 1: Td với cobalt(ΙΙ) nitrat tạo phức Nguyên tắc: mt kiềm, Lidocain hydroclorid tạo kết tủa màu trắng lidocain Khi hòa tan tủa ethanol 96o tác dụng với cobalt(ΙΙ) nitrat tạo phức màu xanh PTPỨ: C14H22N2O.HCl.H2O + NaOH  C14H22N2O+ NaCl+ H2O C14H22N2O + Co(NO3)2  2HNO3+ Co(C14H22N2O)2 Tiến hành Hiện tượng Kết luận giải thích Hòa tan 0,25g chế -Tạo tủa trắng dd kiềm phẩm 5ml nước kiềm hóa dd NaOH 2M đến kết tủa hoàn toàn Lọc rửa tủa nước (khoảng 1520ml) đến hết kiềm Hòa tan tủa 1ml ethanol 96o , thêm 0,5ml dd cobalt(ΙΙ) nitrat 10% xuất kết tủa màu xanh Giải thích: lidocain Nhóm chức (-CO) nên phản ứng với dd Co(NO3)2 tạo LK phối trí nhóm chức (-CO) KL: -Lidocain Hydroclorid tạo kết tủa trắng kiềm -Lidocain tan tốt ethanol 96o tạo tủa xanh dd Co(NO3)2 -Tủa xanh với Co2+ (không làm tới bước này) ml cp giọt HNO3 10% giọt AgNO3 5% trắng lổn nhổn  Thí nghiệm 2: Phản ứng với dung dịch acid picric Tiến hành Hiện tượng Hòa tan 0,2g chế phẩm 10ml nước, thêm 10ml dd acid picric bão hòa Xuất kết tủa màu vàng Rửa nước, sấy khô Điểm chảy tủa khô khoảng 230oC Xuất tủa vàng thêm dd acid picric vào ống nghiệm: Kết luận giải thích KL: Lidocain tác dụng với thuốc thử nhóm alkaloid tạo kết tủa màu vàng muối picrat Giải thích: Do CTCT lidocain có chứa nhóm chức (N(C2H5)2) nên có phản ứng đặc trưng với thuốc thử nhóm alkaloid tạo kết tủa Q trình lọc rửa tủa(khơng làm tới bước này) BÁO CÁO THỰC HÀNH HÓA DƯỢC Bài 3: Kiểm nghiệm Isoniazid, Định tính chloramphenicol Mục tiêu: - Trình bày nguyên tắc làm phản ứng định tính isoniazid Trình bày ngun tắc thực phép thử tinh khiết isoniazid Trình bày nguyên tắc thực quy trình định lượng isoniazid PP bromate Trình bày nguyên tắc thực phản ứng định tính chloramphenicol I: Kiểm nghiệm Isoniazid: Công thức: C6H7N3O Ptl: 137,1 Đặt công thức tổng quát Isoniazid R-CO-NH-NH2 : Tính chất - Vật lý: Bột kết tinh trắng tinh thể không màu, không mùi - Độ tan: Dễ tan nước, tan ethanol 96 2: Định tính  Thí nghiệm 1: phản ứng với AgNO3 Nguyên tắc: Dựa vào tính khử nhóm chức hydrazid hỗ biến nước isoniazid Tiến hành Hiện tượng Thêm 1ml dd chế phẩm Sau đun xuất tủa 2% giọt dd AgNO3, đen xuất kết tủa trắng, đun nóng cho kết tủa đen Ag nguyên tố Kết luận giải thích Khi đun nóng tính khử isoniazid tăng đẩy bạc khỏi dung dịch tạo tủa đen Ag nguyên tố R-CO-NH-NH2 R-C(OH)=N-NH2 (ĐK PỨ hỗ biến dd nước) R-C(OH)=N-NH2 + AgNO3 RC(OAg)=N-NH2+ HNO3 R-CO-NH-NH2 + 4AgNO3  R-COOH+ 4Ag + 4HNO3 + N2 (Mt H2O) ml cp giọt HNO3 10% giọt AgNO3 5% trắng lổn nhổn  Thí nghiệm 2: thuốc thử Fehling Ngun tắc Nhóm hydrazid có tính khử nên dễ bị Oxh thuốc thử fehling PT PỨ: R-CO-NH-NH2+ 2CuO + 2OH-R-COOH+N2 +Cu2O +2H2O Tiến hành Hiện tượng Kết luận giải thích Thêm 1ml chế phẩm 2% giọt thuốc thủ fehling A giọt thuốc thử Fehling B Đun nóng tạo kết tủa đỏ gạch Cu2O Sau đun nóng cho kết tủa đỏ gạch Khi đun nóng Isoniazid dễ bị Oxh thuốc thử fehling cho kết tủa đỏ gạch Cu2O  Thí nghiệm 3: Phản ứng tạo Hydrazon Nguyên tắc: Isoniazid tham gia phản úng ngưng tụ với aldehyd, ceton để tạo hydrazon có điểm cháy xác định PT PỨ: Tiến hành Hiện tượng Hòa tan 0,1g isoniazid -Tủa vàng phtivazid 2ml nước, thêm 10ml dd vanilin 1% đun nóng Lắc, dùng đũa thủy tinh cọ thành ống nghiệm xuất kết tủa vàng Phtivazid Kết luận giải thích Isoniazid tác dụng với vanilin tạo kết tủa vàng, có độ chảy 226-231oC  Thí nghiệm 4: Phản ứng với CuSO4 Nguyên tắc: Do có nhóm chức hydrazid, isoniazid có khả phản ứng với CuSO tạo phức màu xanh PT PỨ: R-CO-NH-NH2 + CuSO4 (R-CO-N-NH2)2Cu (to) R-COOH +N2 +Cu2O Tiến hành Hiện tượng Hòa tan 0.1 gam isoniazid ml nước, thêm giọt dung dịch CuSO4 Xuất kết tủa màu xanh tao thành phúc Đun nóng màu xanh chuyển thành màu xanh ngọc thạch có bọt khí bay lên nhịm chức hydrazid bị khử giải phóng khí N2 -Màu dung dịch sau đun Kết luận giải thích Dung dịch chế phẩm isoniazid nước tác dụng với dung dịch CuSO4 tạo dung dịch màu xanh da trời có tủa đun nóng dung dịch  màu xanh ngọc thạch có bọt khí bay 3, Định lượng isoniazid phương pháp Bromate: Nguyên tắc: chuẩn độ Bromate có chất chuẩn độ Oxy hóa – Khử Nhóm chức Hydrazid ( -NH-NH2) Isoniazid có tính khử, Brom có tính oxy hóa, nên Bromate dùng để định lượng Isoniazid PTPƯ: BrO3- + 5Br- + 6H+  3Br2 +3H2O R-CO-NH-NH2 + H2O+ 2Br2R-COOH+ 4HBr + N2 Tiến hành Hiện tượng Hịa tan 0.25g Dung dịch bình nón nhỏ chế phẩm thị Metyl đỏ có màu đỏ nước, thêm nước đến vừa đủ 100ml Lấy xác 20ml dung dịch trên, thêm 100ml nước, 20ml HCL đặc, 0.2g KBr 0.05ml dung dịch metyl đỏ Chuẩn độ với KbrO3 0.1N dung dịch hết màu đỏ Sau chuẩn độ dung dich bình nón dần chuyển sang màu vàng nhạt Kết luận Từ PTPU ta có: (V.N)kBrO3= (V.N)Iso NIso= → mIso = E (V.N)KBrO3/ 103 (g) Do lấy 1/5 thể tích định lượng nên: mIso= Vậy phần trăm isoniazid chế phẩm là: C%= 100% Kết thực nghiệm: Khối lượng isoniazid thực tế cân đc: m(tt)= 0,2509g độ ẩm: b=0,1 thay vào cơng thức ta có phần trăm isoniazid chế phẩm là: Với V1=14,5ml C%=100%=99,14% Với V2=14,55ml C%=100%=99,48% ml cp giọt HNO3 10% giọt AgNO3 5% Kết luận ( hàm lượng): Hàm lượng Isoniazid mức cho phép trắng lổn nhổn III Định tính Chloramphenicol Cơng thức: Ptl: 323,13 Tính chất - Vật lý: Bột kết tinh mịn màu trắng, trắng xám trắng vàng hay tinh thể hình phiến dài Bền vững PH