BÁO cáo hết môn THỰC tập dược LIỆU 1

Họ tên sinh viên: ĐỒN LÊ KHÁNH LINH Nhóm: 09 Tiểu nhóm: 06 Buổi thực tập: Chiều thứ BÁO CÁO HẾT MÔN THỰC TẬP DƯỢC LIỆU I FLAVONOID Phương pháp tiến hành 1.1 Chiết xuất: - Sơ đồ chiết xuất: - Nguyên liệu: 1g dược liệu Bưởi Sơ đồ Sơ đồ quy trình chiết xuất vỏ Bưởi 1.2 Định tính Dịch chiết vỏ Bưởi Phản ứng nhóm OH phenol + NaOH 1% + AlCl3 1% MeOH Phản ứng vòng y -pyron + Chì Acetat trung tính — — — — — Phản ứng tăng màu Phản ứng tạo phức Phản ứng tạo phức Phản ứng tạo phức Dương tính Dương tính Tăn g màu Tăng màu Đục + Thuốc thử Diazonium + FeCl3 1% Dương tính Màu nâu đen Phản ứng Diazonium Dương tính Dương tính Đục Màu đỏ cam Sơ đồ Sơ đồ phản ứng định tính vỏ Bưởi Trang + bột Magie, HCl đậm đặc Phản ứng Cyanidin Dương tính Màu đỏ hồng Kết định tính 2.1 Phản ứng tăng màu với dung dịch NaOH 1% Hiên tượng: Khi cho 1-2 giọt dung dịch NaOH 1% vào dịch chiết vỏ Bưởi, lắc dịch chiết từ màu vàng nhạt dần chuyển sang cam Khi đun nóng, dịch chiết đậm màu Nhân xét: Dịch chiết vỏ Bưởi dương tính (+) với phản ứng tăng màu dung dịch NaOH 1% Nhóm OH phenol môi trường kiềm chuyển thành dạng phenolat làm dung dịch tăng màu Khi đun nóng, tốc độ phản ứng xảy nhanh hơn, triệt để nên màu có phần đậm 2.2 Phản ứng tạo phức với dung dịch A1C13 1% MeOH Hiên tượng: Khi cho 1-2 giọt dung dịch AlCl3 1% MeOH vào dịch chiết vỏ Bưởi, lắc dịch chiết từ màu vàng nhạt dần chuyển sang màu vàng đậm hơn, dung dịch xuất hiên tủa dạng huyền phù Nhân xét: Dịch chiết vỏ Bưởi dương tính (+) với phản ứng tạo phức với dung dịch AlCl3 1% MeOH Al3+ dung dịch tạo phức với Flavonoid làm dung dịch tăng màu Kết tủa tạo thành Al3+ tác dụng với OH phân tử Flavonoid nên kết tủa có dạng huyền phù 2.3 Hình Phản ứng tăng màu vỏ Bưởi Phản ứng tạo phức với dung dịch FeCl3 1% Hiên tượng: Khi cho 1-2 giọt dung dịch FeCl3 1% vào dịch chiết vỏ Bưởi, lắc dung dịch từ màu vàng nhạt chuyển sang màu nâu đen Nhân xét: Dịch chiết vỏ Bưởi dương tính (+) với phản ứng tạo phức với dung dịch FeCl3 1% Fe3+ dung dịch tạo phức với Flavonoid làm dung dịch chuyển màu nâu đen Hình Phản ứng tạo phức với dung dịch AlCl3 2.4 Phản ứng tạo phức với dung dịch Chì Acetat trung tính Hiên tượng: Khi cho 1-2 giọt dung dịch Chì Acetat trung tính vào dịch chiết Bưởi, lắc dung dịch từ suốt chuyển thành có tủa Nhân xét: Dịch chiết Bưởi dương tính (+) với phản ứng tạo phức với dung dịch Chì Acetat trung tính Pb2+ dung dịch tác dụng với nhóm OH phenol tạo tủa 2.5 Phản ứng với thuốc thử Diazonium Hiên tượng: Sau kiềm hóa dung dịch 12 giọt dung dịch NaOH 10%, cho vào ống nghiêm vài giọt thuốc thử Diazonium, lắc dung dịch từ màu vàng nhạt chuyển sang màu cam Nhân xét: Dịch chiết vỏ Bưởi dương tính (+) với phản ứng với thuốc thử Diazonium Lưu ý: Thuốc thử Diazonium phải bảo quản lạnh, không nên cho nhiều thuốc thử dung dịch bị acid hóa, phản ứng không xảy 2.6 Phản ứng vòng Y -pyron (phản ứng Cyanidin) Hiên tượng: Dung dịch từ màu vàng nhạt chuyển dần sang màu đỏ Nhân xét: Dịch chiết vỏ Bưởi dương tính (+) với phản ứng Cyanidin HCl phản ứng với Mg tạo Hydro sinh khử vịng Y -pyron tạo thành vịng pyrilium có màu đỏ Kết luận: Dược liệu Bưởi có ílavonoid có vịng Y -pyron Hình Phản ứng tạo phức với dung dịch Chì Acetat trung tính Hình Phản ứng với thuốc thử Diazonium Hình Phản ứng Cyanidin Họ tên sinh viên: ĐỒN LÊ KHÁNH LINH Nhóm: 09 Tiểu nhóm: 06 Buổi thực tập: Chiều thứ II COUMARIN Phương pháp tiến hành 1.1 Chiết xuất: - Nguyên liệu: 20g dược liệu Rễ Tiền hồ - Sơ đồ chiết xuất: - ' > Bột Rễ Tiền hồ - _ , ' _ 20ml EtOH 96% Đun cách thủy phút bơng gịn Ị r Lọc qua _ Dịch chiết rễ Tiền hồ 1.2 Sơ đồ Sơ đồ quy trình chiết xuất Rễ Tiền hồ Định tính: đổi độ Sơ đồ Sơ đồ phản ứng định tính Rễ Tiền hồ Trang Họ tên sinh viên: ĐỒN LÊ KHÁNH LINH Nhóm: 09 Tiểu nhóm: 06 Buổi thực tập: Chiều thứ Kết định tính 2.1 Phản ứng đóng mở vịng lacton Hiên tượng: Khi cho dung dịch NaOH 10% vào dịch chiết Rễ Tiền hồ, thêm vài giọt HCl đđ dung dịch đục ống nghiêm thêm NaOH 10% Nhân xét: Dịch chiết Rễ Tiền hồ dương tính (+) với phản ứng đóng mở vịng lacton Coumarin dược liêu mơi trường kiềm mở vịng lacton tạo thành dạng muối dễ tan nước hơn, acid hóa lại vịng lacton đóng lại tạo chất khó tan nước 2.2 Sự tăng huỳnh quang môi trường kiềm tác dụng tia UV Hiên tượng: Lúc lấy phần che bên bị che phát quang yếu bên khơng bị che Sau phút phát quang nửa Hiên tượng thấy Rễ Tiền hồ, không thấy Rễ Tranh Nhân xét: Dịch chiết Rễ Tiền hồ dương tính (+) với tăng huỳnh quang mơi trường kiềm tác dụng tia UV Hiên tượng xảy dẫn chất hydroxy cinnamic dạng cis phát huỳnh quang yếu dạng trans Dưới tác dụng tia UV 365 nm, chất chuyển thành dạng trans gây tăng huỳnh quang Hình Sự tăng huỳnh quang môi trường kiềm Trang Họ tên sinh viên: ĐỒN LÊ KHÁNH LINH Nhóm: 09 Tiểu nhóm: 06 Buổi thực tập: Chiều thứ 2.3 Phản ứng với thuốc thử Diazonium Hiên tượng: Sau kiềm hóa dung dịch 0,5 ml dung dịch NaOH 5%, đun cách thủy, để nguội, thêm thuốc thử diazonium vào dung dịch chuyển từ màu vàng sang màu đỏ cam Nhân xét: Dịch chiết rễ Tiền hồ dương tính (+) với phản ứng với thuốc thử Diazonium Hình Diazonium 2.4 Phản ứng với thuốc thử Thử nghiệm vi thăng hoa Hiên tượng: Khi soi lam kính hiển vi có xuất hiên tinh thể hình kim Nhân xét: Bột dược liêu Rễ Tiền hồ dương tính (+) với phản ứng vi thăng hoa Lưu ý: Cần bốc hoàn toàn nước tiến hành đặt phiến kính lên chén Hình 10 Tinh thể coumarin Kết luận: Dược liệu Tiền hồ có coumarin Trang Họ tên sinh viên: ĐOÀN LÊ KHÁNH LINH Nhóm: 09 Tiểu nhóm: 06 Buổi thực tập: Chiều thứ III.ANTHRANOID Phương pháp tiến hành 1.1 Chiết xuất: - Sơ đồ chiết xuất: Lớp kiềm có màu đỏ Lớp kiềm có màu đỏ Có tinh thể hình kim Phản ứng Borntager (+) - Nguyên liệu: 1,5g dược liệu Nhàu Sơ đồ Sơ đồ phản ứng định tính rễ Nhàu Trang 1.2 Định tính: Sơ đồ Sơ đồ quy trình chiết xuất rễ Nhàu Kết định tính 2.1 Định tính anthranoid dạng tự (dạng aglycon, anthraquinon) Hiên tượng: Khi cho ml dung dịch NaOH 10% vào dịch chiết rễ Nhàu, lắc kỹ, sau để n dung dịch tách thành lớp, lớp màu đỏ Nhân xét: Dịch chiết rễ Nhàu dương tính (+) với phản ứng Borntrager Lớp dicloromethan (DCM) có d = 1,32 nặng nên nằm lớp dưới, dung dịch kiềm nhẹ nằm phía Lớp kiềm có màu đỏ nhóm OH phenol dung dịch kiềm bị phenolat hóa Hìn h 11 Phả n ứng định tính anth rano id dạn g tự 2.2 Định tính anthranoid dạng kết hợp (dạng glycosid, anthraglycosid) Hiên tượng: Khi cho ml dung dịch NaOH 10% vào dịch chiết rễ Nhàu, lắc kỹ, sau để n dung dịch tách lớp, lớp dung dịch phía có màu đỏ Nhân xét: Dịch chiết rễ Nhàu (định tính glycosid) dương tính (+) với phản ứng Borntrager Lớp + NaOH 10% Ống chứng DCM có d=1,32 nặng nên nằm lớp dưới, dung dịch kiềm nhẹ phía Lớp kiềm có màu đỏ nhóm OH phenol dung dịch kiềm bị phenolat hóa H ì n h P h ả n ứ n g đị n h tí n h a nt h n oi d d n g k ết h ợ p 2.3 Thử nghiệm vi thăng hoa Hiên tượng: Khi soi lam kính hiển vi có tinh thể hình kim Lau nhẹ lam kính bơng tẩm NaOH 10% mặt bơng tiếp xúc chuyển màu đỏ Nhân xét: Bột dược liêu rễ Nhàu dương tính (+) với thử nghiêm vi thăng hoa tinh thể sinh dương tính (+) với phản ứng Borntrager Hình 13 Tinh thể anthranoid phản ứng Borntrager lam Kết luận: Dược liệu Nhàu có anthranoid dạng tự kết hợp IV TANNIN Phương pháp tiên hành 1.1 Chiết xuất: - Nguyên liệu: 1g dược liệu Ngũ bội tử - Sơ đồ chiết xuất: Sơ đồ Sơ đồ quy trình chiết xuất Ngũ bội tử 1.2 Định tính: Màu đen Tủa trăng sữa Tủa trăng Có tủa trắng đục Sơ đồ Sơ đồ phản ứng định tính Ngũ bội tử Kết định tính 2.1 Phản ứng với dung dịch protein Hiên tượng: Khi cho vài giọt thuốc thử gelatin muối vào dịch chiết Ngũ bội tử, lắc nhẹ, xuất hiên tủa màu trắng đục dung dịch, để yên thời gian tủa lắng xuống đáy ống nghiêm Nhân xét: Dịch chiết Ngũ bội tử dương tính (+) với phản ứng với dung dịch protein (gelatin muối) Nhóm OH tannin tạo liên kết hydro với protein, làm xuất hiên tủa trắng + gelatin muối Ống chứng Ị 1J L Hình 14 Phản ứng với dung dịch gelatin muối 2.2 Phản ứng với thuốc thử FeCl3 1% Hiên tượng: Khi cho giọt thuốc thử FeCl3 1% vào dịch chiết Ngũ bội tử, lắc đều, dung dịch từ màu vàng chuyển sang màu đen Nhân xét: Dịch chiết Ngũ bội tử dương tính (+) với phản ứng với thuốc thử FeCl3 1% Fe3+ dung dịch tạo phức với tannin làm đổi màu dung dịch Hình 15 Phản ứng với dung dịch FeCl3 1% 2.3 Phản ứng với thuốc thử Chì Acetat 1% Hiên tượng: Khi cho giọt thuốc thử Chì Acetat 1% vào dịch chiết Ngũ bội tử, lắc đều, dung dịch xuất hiên tủa trắng, để yên thời gian tủa lắng xuống đáy ống nghiêm Nhân xét: Dịch chiết Ngũ bội tử dương tính (+) với phản ứng với thuốc thử Chì Acetat 1% Pb2+ dung dịch tạo phức với tannin tạo tủa Hình 16 Phản ứng với dung dịch chì acetat 1% 2.4 Phản ứng với thuốc thử Đồng Acetat 1% Hiên tượng: Khi cho giọt thuốc thử Đồng Acetat 1% vào dịch chiết Ngũ bội tử, lắc đều, dung dịch xuất hiên tủa, để yên thời gian tủa lắng xuống đáy ống nghiêm Nhân xét: Dịch chiết Ngũ bội tử dương tính (+) với phản ứng với thuốc thử Đồng Acetat 1% Cu2+ dung dịch tạo phức với tannin tạo tủa Hình 17 Phản ứng với dung dịch đồng acetat 1% Kết luận: Dược liệu Ngũ bội tử có chứa Tannin 2 Định lượng 2.1 Phương pháp tiến hành Nguyên liệu: Dược liệu Bàng Sơ đồ Sơ đồ tóm tắt quy trình định lượng tannin Lá Bàng 2.2 Kết định lượng Dịch chiết + FC DC loại tannin casein + FC Hình Abs (760 nm) A1= 0,530 A2= 0,212 Tính tốn kết quả: - Cơng thức: Hàm lượng polyphenol tồn phần (P1) polyphenol khơng liên kết với casein (P2) tính theo đường tuyến tính chuẩn acid gallic sau: _ X X Vx kx 100 x m X 106 X (1 - h) x: Nồng độ polyphenol tồn phần dung dịch thử tính theo phương trình hồi quy y = 0,0606xx + 0,0432 (R2 = 0,9902), với y độ hấp thu dung dịch thử sau phản ứng với F-C; (pg/ml) V: Thể tích dịch chiết mẫu thử (ml) ( 250 ml) k: Độ pha loãng mẫu thử ( 62,5) m: Khối lượng cân mẫu thử (g) ( 1,0007g) h: Độ ẩm mẫu dược liệu ( 10,1%) o Từ đường tuyến tính ta có x1= 8,033( g/ml) -> P1= 13,967 % x2= 2,785( g/ml) -> P2= 4,843 % Hàm lượng tannoid tính theo acid gallic dược liệu: P3 = P1 - P2 = 9,124% Nhân xét: Hàm lượng tannin dược liệu Lá Bàng thấp nên tiến hành bước định lượng cần ý điểm sau: - Không thấm ướt giấy lọc xếp nếp dung môi khác - Trước tiến hành đo quang cần khởi động máy trước 30 phút - Độ hấp thu đo phải nằm khoảng tuyến tính đường chuẩn xây dựng - Mẫu thử sau thêm thuốc thử F-C phải tiến hành đo quang (trước phút) Kết luận: Dược liệu Bàng có hàm lượng tannin 9,124% Về phần kết quả: Abs 760nm mẫu chứa DC +F- C nằm ngồi khoảng tuyến tính( 0,080,512) dẫn đến kết định lượng khơng xác Ngun nhân thao tác lấy xác sai dẫn đến nồng độ bị thay đổi  ... (g) ( 1, 0007g) h: Độ ẩm mẫu dược liệu ( 10 ,1% ) o Từ đường tuyến tính ta có x1= 8,033( g/ml) -> P1= 13 ,967 % x2= 2,785( g/ml) -> P2= 4,843 % Hàm lượng tannoid tính theo acid gallic dược liệu: ... anthranoid phản ứng Borntrager lam Kết luận: Dược liệu Nhàu có anthranoid dạng tự kết hợp IV TANNIN Phương pháp tiên hành 1. 1 Chiết xuất: - Nguyên liệu: 1g dược liệu Ngũ bội tử - Sơ đồ chiết xuất: Sơ... Acetat 1% Cu2+ dung dịch tạo phức với tannin tạo tủa Hình 17 Phản ứng với dung dịch đồng acetat 1% Kết luận: Dược liệu Ngũ bội tử có chứa Tannin 2 Định lượng 2 .1 Phương pháp tiến hành Nguyên liệu: