(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu sự ức chế tăng sinh tế bào và cảm ứng apoptosis trên tế bào ung thư của cao chiết cây Sâm đá (Curcuma singularis)
ĐẶNG THỊ MINH THƯ BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - SINH HỌC THỰC NGHIỆ M Đặng Thị Minh Thư NGHIÊN CỨU SỰ ỨC CHẾ TĂNG SINH TẾ BÀO VÀ CẢM ỨNG APOPTOSIS TRÊN TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CAO CHIẾT CÂY SÂM ĐÁ (CURCUMA SINGULARIS) LUẬN VĂN THẠC SĨ: SINH HỌC THỰC NGHIỆM NĂM 2021 Thành phố Hồ Chí Minh - Năm 2021 BỘ GIÁO DỤC VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ ĐÀO TẠO VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Đặng Thị Minh Thư NGHIÊN CỨU SỰ ỨC CHẾ TĂNG SINH TẾ BÀO VÀ CẢM ỨNG APOPTOSIS TRÊN TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CAO CHIẾT CÂY SÂM ĐÁ (CURCUMA SINGULARIS) Chuyên ngành: Mã số : Sinh học thực nghiệm 8420114 LUẬN VĂN THẠC SĨ: SINH HỌC THỰC NGHIỆM NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC Hướng dẫn 1: TS Đồn Chính Chung Hướng dẫn 2: PGS TS Nguyễn Thị Phương Thảo TP HỒ CHÍ MINH - 2021 LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài “Nghiên cứu ức chế tăng sinh tế bào cảm ứng apoptosis tế bào ung thư cao chiết Sâm đá (Curcuma singularis)” cơng trình nghiên cứu tơi dựa tài liệu, số liệu tơi tự tìm hiểu nghiên cứu hướng dẫn nhiệt tình thầy TS Đồn Chính Chung PGS TS Nguyễn Thị Phương Thảo Chính vậy, kết nghiên cứu đảm bảo trung thực khách quan Đồng thời, kết chưa xuất nghiên cứu Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực sai tơi hồn chịu trách nhiệm Tp.Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2021 Học viên cao học Đặng Thị Minh Thư LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành cảm ơn Quý Thầy/Cô Học viện Khoa học Cơng nghệ tận tình dạy trang bị cho tác giả kiến thức cần thiết suốt thời gian vừa qua để luận văn hoàn thành cách tốt Tơi xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới thầy TS Đồn Chính Chung cô PGS TS Nguyễn Thị Phương Thảo, người hướng dẫn, dẫn dắt trực tiếp cố vấn cho tơi suốt q trình thực đề tài nghiên cứu khoa học Thầy người cho nhiều học chuyên môn cách làm việc thông qua đề tài dự án mình, giúp tơi định hướng phát triển nghiệp Một lần xin gửi lời cảm ơn đến thầy tất lòng chân thành biết ơn Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn đến gia đình tơi tạo điều kiện thuận lợi cho việc học tập để đạt thành công ngày hôm Tôi xin cám ơn tất người! Đặng Thị Minh Thư DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Phân loại chế hoạt động chất chống oxy hóa 17 Bảng 1.2 Ưu nhược điểm số mơ hình đánh giá khả kháng oxy hóa 21 Bảng 2.1 Các thuốc thử dùng để phân tích sơ thành phần hóa học 28 Bảng 3.1 Khả kháng oxy hóa in vitro chất đối chứng acid ascorbic nồng độ khác 35 Bảng 3.2 Khả kháng oxy hóa in vitro mẫu cao chiết tổng từ củ rễ Sâm Đá nồng độ khác 36 Bảng 3.3 Mức độ gây độc 50% quần thể tế bào (IC50) cao tổng củ rễ Sâm Đá dòng tế bào khác sau 48 xử lý 40 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Mẫu Sâm đá (Curcuma singularis) Hình 1.2 Các protein đường tín hiệu liên quan đến trình apoptosis tế bào Hình 1.3 Các protein đường tín hiệu liên quan trình autophagy tế bào 10 Hình 1.4 Phản ứng trung hoà gốc tự 18 Hình 1.5 Phản ứng hố học phương pháp sử dụng TBA – đo lượng MDA 19 Hình 1.6 Phản ứng FRAP 20 Hình 3.1 Phương trình đường chuẩn axit oleanolic sử dụng định lượng terpenoid tổng cao chiết 39 Hình 3.2 Ảnh hưởng cao chiết tổng củ rẽ Sâm Đá lên tăng sinh tế bào ung thư vú 40 Hình 3.3 Ảnh hưởng cao chiết tổng củ rẽ Sâm Đá lên tăng sinh dòng tế bào ung thư khác 41 Hình 3.4 Ảnh hưởng cao chiết lên tăng sinh nguyên bào sợi WS1 tế bào nội mô HUVEC 44 Hình 3.5 Ảnh hưởng cao chiết củ rẽ Sâm Đá lên tăng sinh tế bào ung thư đại trực tràng Caco2 45 Hình 3.6 Ảnh hưởng của cao chiết củ rẽ Sâm Đá lên hàm lượng enzyme LDH giải phóng mơi trường ni cấy từ tế bào ung thư đại trực tràng Caco2 46 Hình 3.7 Ảnh hưởng cao chiết củ rẽ Sâm Đá lên hình thái tế bào ung thư đại trực tràng Caco2 47 Hình 3.8 Ảnh hưởng của cao chiết củ rẽ Sâm Đá lên hình thành bào lạc tế bào ung thư đại trực tràng Caco2 50 Hình 3.9 Ảnh hưởng cao chiết lên hình thái nhân tế bào ung thư Caco2 51 MỤC LỤC Lời cam đoan Lời cảm ơn Danh mục bảng Danh mục hình Mục lục Mở đầu Chương Tổng quan tài liệu 1.1 Tổng quan tài liệu 1.1.1 Ung thư 1.1.2 Tổng quan Sâm đá 1.1.3 Tổng quan đường tín hiệu liên quan tới chết tế bào 1.1.4 Các nghiên cứu hoạt tính sinh học hoạt chất germacrone 11 1.2 Tổng quan tình hình nghiên cứu nước 12 1.2.1 Một số nghiên cứu hỗ trợ điều trị bệnh ung thư dược liệu tự nhiên 12 1.2.2 Một số nghiên cứu Sâm Đá 14 1.2.3 Các nghiên cứu hoạt tính sinh học hoạt chất germacrone 15 1.2.4 Chất kháng oxy hóa 16 1.3 Tình hình nghiên cứu nước 22 Chương Vật liệu Phương pháp nghiên cứu 25 2.1 Vật liệu sử dụng nghiên cứu 25 2.1.1 Nguyên liệu sử dụng nghiên cứu 25 2.1.2 Các dòng tế bào sử dụng nghiên cứu 25 2.1.3 Các kit sử dụng nghiên cứu 26 2.1.4 Các môi trường hóa chất dùng nghiên cứu 26 2.1.5 Các thiết bị dụng cụ dùng nghiên cứu 26 2.2 Phương pháp nghiên cứu 26 2.2.1 Phương pháp tách chiết cao 26 2.2.2 Phương pháp phân tích sơ hợp chất cao chiết 27 2.2.3 Phương pháp đánh giá hoạt tính kháng oxy hóa in vitro 28 2.2.4 Phương pháp giải đông nuôi cấy tăng sinh tế bào 30 2.2.5 Phương pháp đánh giá mức độ gây độc hay ức chế tăng sinh tế bào 30 2.2.6 Phương pháp xác định hàm lượng enzyme LDH 31 2.2.7 Phương pháp đánh giá thay đổi hình thái tế bào 32 2.2.8 Phương pháp đánh giá ảnh hưởng dịch chiết lên ức chế hình thành bào lạc tế bào (phương pháp colony assay) 32 2.2.9 Phương pháp nhuộm nhân thuốc nhuộm DAPI 33 2.2.10 Phương pháp xác định chuyển dịch phân tử PS apoptosis tế bào 33 2.2.11 Phân tích thống kê 34 Chương Kết - bàn luận 35 3.1.Kết đánh giá khả kháng oxy hoá cao chiết củ rễ Sâm Đá 35 3.2 Kết đánh giá khả gây độc tế bào cao chiết củ rễ Sâm Đá 38 3.2.1 Khả gây độc cao chiết tế bào ung thư 38 3.2.2 Khả gây độc cao chiết tế bào thường 41 3.3 Ảnh hưởng cao chiết lên tăng sinh tế bào ung thư đại trực tràng 42 3.3.1 Ảnh hưởng cao chiết lên khả sống tế bào ung thư đại trực tràng 42 3.3.2 Ảnh hưởng cao chiết lên hàm lượng enzyme LDH giải phóng từ tế bào ung thư đại trực tràng 44 3.3.3 Ảnh hưởng cao chiết lên hình thái tế bào ung thư đại trực tràng 46 3.3.4 Ảnh hưởng cao chiết lên hình thành bào lạc tế bào ung thư đại trực tràng 47 3.4 Ảnh hưởng cao chiết lên cảm ứng apoptosis tế bào ung thư da 49 3.4.1 Ảnh hưởng cao chiết lên hình thái nhân tế bào ung thư 49 3.4.2 Ảnh hưởng cao chiết lên tỉ lệ apoptosis tế bào ung thư 51 Chương Kết luận – kiến nghị 53 4.1 Kết luận 53 4.2 Kiến nghị 53 Tài liệu tham khảo 54 Phụ lục ... Minh Thư NGHIÊN CỨU SỰ ỨC CHẾ TĂNG SINH TẾ BÀO VÀ CẢM ỨNG APOPTOSIS TRÊN TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CAO CHIẾT CÂY SÂM ĐÁ (CURCUMA SINGULARIS) Chuyên ngành: Mã số : Sinh học thực nghiệm 8420114 LUẬN VĂN THẠC... bào ung thư cao chiết Sâm đá (Curcuma singularis) Nội dung chi tiết đề cương luận văn thạc sĩ Nội dung 1: Đánh giá hoạt tính ức chế tăng sinh tế bào in vitro cao chiết hay cao phân đoạn từ Sâm. .. BÀO CỦA CAO CHIẾT CỦ RỄ CÂY SÂM ĐÁ 3.2.1 Khả gây độc cao chiết tế bào ung thư Nghiên cứu xác định cao chiết tổng củ rễ Sâm Đá ức chế tăng sinh tế bào ung thư hay không Các tế bào ung thư gan