UNG THƯ ĐẠI TRỰC TRÀNG
3.3.1. Ảnh hưởng của cao chiết lên khả năng sống của tế bào ung thư đại trực tràng
Trước tiên, nghiên cứu đánh giá hiệu quả gây độc của cao tổng lên tế bào ung thư đại trực tràng Caco2. Các tế bào Caco2 được xử lý với cao chiết ở các nồng độ khác nhau và ở các thời điểm xác định. Hiệu quả ức chế tăng sinh tế bào dược đánh giá bằng phương pháp WST-1 theo hướng dẫn của nhà sản xuất. Nguyên tắc hoạt động của bộ kit dựa trên phản ứng phân cắt hợp chất WST-1 tetrazolium bởi enzyme dehydrogenases có trong ty thể tế bào. Dehydrogenases là một enzyme trong chuỗi hô hấp tế bào, chuyển hóa WST-1 tetrazolium thành formazan có màu vàng và hấp thu bước sóng 450 nm. Tế bào càng phát triển nhanh thì quá trình hô hấp và chuyển hóa của tế bào xảy ra mạnh, dẫn đến sự
43
chuyển hóa WST-1 tetrazolium thành formazan bởi enzyme dehydrogenases xảy ra càng mạnh. Mức độ tăng sinh của tế bào có thể định lượng thông qua độ hấp thu OD (bước sóng 450 nm)
Kết quả cho thấy hiệu quả ức chế tế bào tăng sinh không được quan sát thấy rõ ràng ở các thời điểm 12 giờ hay 24 giờ xử lý tế bào với nồng độ cao chiết thấp (P > 0,05; Hình 3.4). Sau 24 giờ xử lý cao chiết, chỉ có nồng độ cao chiết cao nhất 200 µg/ml ức chế sự tăng sinh của tế bào khoảng 30%. Vì vậy, nghiên cứu tiếp tục xử lý tế bào Caco2 với các nồng độ khác nhau của cao chiết trong thời gian lâu hơn. Sau 48 giờ xử lý, kết quả cho thấy cao chiết có tác dụng ức chế sự tăng sinh của các tế bào Caco2 phụ thuộc vào nồng độ sử dụng. Cụ thể, tỉ lệ tế bào sống ở các nhóm tế bào Caco2 được xử lý với các nồng độ cao tổng 50, 100 và 150 μg/ml lần lượt là 75,08 ± 2,99%, 47,32 ± 3,28% và 28,42 ± 2,54% khi so sánh với nhóm đối chứng (P < 0,05 và P < 0,01; Hình 3.4). Ở nồng độ cao nhất 200 μg/ml, tỉ lệ tế bào sống còn 22,38 ± 3,22%. Ngoài ra, nghiên cứu cũng xác định được chỉ số gây độc 50% quần thể tế bào của cao
tổng (IC50) là 76,48 ± 2,84 μg/ml. Như vậy, kết quả cho thấy cao tổng có thể
ức chế sự tăng sinh của tế bào ung thư Caco2 phụ thuộc vào nồng độ xử lý, tuy nhiên tác động ức chế tăng sinh tế bào chỉ quan sát thấy rõ ở các nồng độ cao.
44
Hình 3.4. Ảnh hưởng của cao chiết củ rẽ cây Sâm Đá lên sự tăng sinh của tế bào ung thư đại trực tràng Caco2. Sự tăng sinh tế bào được xác định bằng WST-1 sau khi xử lý với cao chiết ở các nồng độ khác nhau ở các thời điểm. Kết quả biểu thị bằng giá trị trung bình ± độ lệch chuẩn của ba lần lặp lại thí nghiệm. **p < 0,01 và *p < 0,05 khi so sánh với đối chứng.