1. Trang chủ
  2. » Luận Văn - Báo Cáo

Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung

18 679 1

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

THÔNG TIN TÀI LIỆU

Thông tin cơ bản

Định dạng
Số trang 18
Dung lượng 748,13 KB

Nội dung

Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung Phạm Huy Cường Trường Đại học Khoa học Tự nhiên Luận văn Thạc sĩ ngành: Sinh học thực nghiệm; Mã số: 60 42 30 Người hướng dẫn: TS. Nguyễn Văn Đô Năm bảo vệ: 2012 Abstract: Xác định biểu lộ của IL-2 và TNF-α ở mức độ mARN và protein của tế bào lympho nuôi cấy in vitro của bệnh nhân ung thư vòm mũi họng giai đoạn muộn và người bình thường về lâm sàng với hai liều thuốc khác nhau. Đánh giá tác dụng tăng cường miễn dịch của Crilin T so với Levamisol. Cần phải tăng số mẫu nghiên cứu để có thể đánh giá chính xác. Thử tác dụng thuốc ở liều lượng khác nhau hơn. Xây dựng mô hình thực nghiệm ung thư do hóa chất để thử tác dụng miễn dịch in vitro Keywords: Sinh học; Sinh học thực nghiệm; Miễn dịch; Cây Trinh nữ hoàng cung Content MỞ ĐẦU Trinh nữ hoàng cung (THNC) là một loại cây thuốc được sử dụng là thuốc cổ truyền ở nhiều nước nhiệt đới và cận nhiệt đới trên toàn thế giới. TNHC (Crinium latifolium (L.) đã được dùng như loại thuốc y học cổ truyền để điều trị các bệnh Viêm khớp dạng thấp, ung thư, lao, viêm do vi khuẩn sinh mủ. Viên nang Crila biệt dược của Nguyễn Thị Ngọc Trâm, chiết từ lá cây Trinh nữ Crila được sản xuất từ các alkaloid có hoạt tính sinh học. Các phân đoạn đã chứng minh là có tác dụng tăng cường miễn dịch và chống ung thư mạnh nhất (gồm các alkaloid và flavonoid) cũng đã được chiết và làm thành viên nén có tên là Crilin T. Chúng tôi tiến hành nghiên cứu tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro trên mô hình bệnh nhân ung thư đã có suy giảm miễn dịch, bằng cách nuôi cấy tế bào máu ngoại vi của bệnh nhân ung thư vòm mũi họng giai đoạn muộn và thử các nồng độ thuốc khác nhau và theo dõi đáp ứng miễn dịch chống ung thư bởi các dấu ấn biểu lộ IL-2, TNFα ở mức độ ARN và protein bằng phương pháp RT-PCR và ELISA một cách tương ứng. Đề tài này nhằm mục đích: 2 1. Xác định biểu lộ của IL-2 và TNF-α ở mức độ mARN và protein của tế bào lympho nuôi cấy in vitro của bệnh nhân ung thư vòm mũi họng giai đoạn muộn và người bình thường về lâm sàng với hai liều thuốc khác nhau. 2. Đánh giá tác dụng tăng cường miễn dịch của Crilin T so với Levamisol Chƣơng 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Cây Trinh nữ hoàng cung Cây Trinh nữ hoàng cung (TNHC) còn được gọi là Náng lá rộng, Tỏi lá rộng, Tây nam văn châu lan, Thập bát học sĩ - Crinum latifolium L., thuộc họ Náng Amaryllidaceae. TNHC là một loài có thân như củ hành tây to, đường kính 10-15 mm, bẹ lá úp vào nhau thành một thân giả dài khoảng 10-15 cm, có chiều lá mỏng kéo dài từ 80-100 cm, rộng 3-8 cm, hai bên mép lá lượn sóng. Gân lá song song mặt trên lá lõm thành rãnh, mặt dưới lá có một có một sống lá nổi rất rõ, đầu bẹ lá nơi sát đất có màu đỏ tím. Hoa mọc thành tán gồm 6-18 hoa, trên một cán dài 30-60 cm. Cánh hoa màu trắng có điểm màu tím đỏ. Cây TNHC có nhiều nước Đông Nam Á và Nhật bản, gồm Việt Nam, Ấn Độ, Nhật Bản, Thái Lan, Malaysia, Philippin, Campuchia, Lào. Ở Việt Nam cây mọc hoang ven suối trong rừng và cây thường phát triển mạnh ở các vùng có khí hậu nóng khô từ Đà Nẵng đến tận mũi Cà Mau, đặc biệt là ở một số nơi thuộc tỉnh Đồng Nai và Bà Rịa - Vũng Tàu. Hình 1.1. Cây trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium L.) 1.1.1. Thành phần hóa học của cây Crinum latifolium L. Các nhà khoa học Ấn Độ, Nhật Bản và Việt Nam đã nghiên cứu thành phần hóa học của cây náng có tên khoa học Crinum latifolium L  Thành phần alkaloid của cây Crinum latifolium L. + Crinum latifolium L. Ấn Độ: 11-O-Acetylambelline, 11-O-Acetyl-1,2-- epoxyambelline, Ambeline, Crinafolidine, Crinafoline, (-) 2-Epilycorine, 2-Epipancrassidine, 1,2--epoxyambelline, Hippadine (Pratorine, Alkalois N3), Latindine, Latisodine, Latisoline (Latisodine-O--D-glucopyranosyl), (-) Lycorine, (-) Lycorine-1-0--glucoside, Pratorimine, Pratorinine, Pratosine, Pseudolycorine-1-0--D-glucpside. + Crinum latifolium L. Nhật Bản: 3-O-Acetylhamayne, (-) Acetyllycorine, Cherylline (S), (+) Crinamine, (-) Crinine (Vittatine, Crinidine), Hamayne (Bulbispermine, Demethylcrinamine), Hipeastrine, Latifine (S), Powelline, Undulatine. 3 + Cây TNHC Việt Nam với tên mới là Trinh nữ Crila (Crinum latifolium L.): 9- Octadecenamide b , Dihydro-oxo-demethoxyhaemanthamine, Augustamine, Oxoassoanine, Crinane-3--ol, Buphannidrine, Powelline, Undulatine, Ambelline, 6-hydroxybuphannidrine, 1,2-epoxyambelline, 6-hydroxycrinamidine, Epoxy-3,7-dimethoxycrinane-11-one, Lycorin và Pratorin (Hippadin) và các flavonoid: 4’7-dihydroxy-3-vinyloxyflavan, 4’7-dihydroxyflavan, kaemperol-3-O--glucopyranoside.  Thành phần hóa học khác của cây Crinum latifolium L. + Crinum latifolium L. Nhật Bản có Glucan a và Glucan b. + Cây TNHC Việt Nam (Crinum latifolium L.) có 32 chất bay hơi và saponin, acid hữu cơ, amino acid, p-hydroxycinnamat metyl, 3,4’-dihydroxycinnamat ethyl, keampferol-3- 4-di-O--D-glucopyranosit. 1.1.2. Tình hình nghiên cứu cây TNHC ở Việt Nam Viên nang Crila ra đời từ cụm công trình nghiên cứu về cây TNHC của Nguyễn Thị Ngọc Trâm và cộng sự trong và ngoài nước. Viên nang Crila được sản xuất từ các alkaloid có hoạt tính sinh học được chiết xuất từ lá cây TNHC, điều trị u xơ tử cung và phì đại lành tính tuyến tiền liệt. Viên nang Crila đã được Viện Kiểm nghiệm thuốc Trung ương nghiên cứu nâng cấp tiêu chuẩn kiểm nghiệm định lượng hàm lượng alkaloid bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). “Nghiên cứu định tính, định lượng crinamidin trong dược liệu và viên nang TNHC bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao”. 1.2. Vai trò của hệ thống đáp ứng miễn dịch trong ung thƣ 1.2.1. Đại cương đáp ứng miễn dịch chống ung thư Ung thư là bệnh ác tính được sinh ra từ các tế bào bình thường bị biến đổi. Các tế bào ác tính phát triển vô hạn định và sẽ giết chết cơ thể chủ. Có nhiều bằng chứng cho thấy sự đáp ứng miễn dịch chống ung thư như: một số ít ung thư tự thoái triển, có rất nhiều lympho và đại thực bào thâm nhiễm khối u, thoái lui của di căn sau khi loại bỏ các khối u nguyên phát. Tỷ lệ mắc bệnh ung thư cao hơn sau ức chế miễn dịch, suy giảm miễn dịch (AIDS, trẻ sơ sinh, người già, bệnh nhân ghép tạng). Hệ miễn dịch tham gia bảo vệ cơ thể bằng hai cơ chế. 1.2.2. Suy giảm miễn dịch Suy giảm miễn dịch (SGMD) hay thiếu hụt miễn dịch cũng như mọi hệ thống, ngoài sự hoạt động bình thường thì trong những trường hợp nhất định do những nguyên nhân đã biết hay chưa biết do những tổn thương tiên phát hay thứ phát của một cấu thành nào đó mà dẫn đến những rối loạn. Cho nên, hệ thống miễn dịch có thể hoạt động một cách quá mức gây nên tình trạng quá mẫn, hay hoạt động yếu không đạt yêu cầu gọi là thiểu mẫn, thiểu năng miễn dịch hay suy giảm miễn dịch (SGMD) 1.2.3. Ung thư vòm mũi họng Ung thư vòm mũi họng (UTVMH) là bệnh đứng hàng đầu trong các ung thư khu vực tai mũi họng - đầu mặt cổ. UTVMH là bệnh mang đặc điểm vùng. Trên thế giới hình thành 3 khu vực địa lý, ở tỷ lệ mắc bệnh hoàn toàn khác nhau. 1.2.4. Nguyên nhân gây UTVMH - Yếu tố di truyền - Các yếu tố môi trường: Virus, thức ăn… 4 1.3. Tình hình nghiên cứu về thuốc điều trị suy giảm miễn dịch Tình trạng suy giảm miễn dịch có thể gặp ở hầu hết các loại bệnh lý do đó phạm vi chỉ định dùng thuốc kích thích miễn dịch rất rộng rãi. Vì vậy từ khi phát hiện ra chất kích thích miễn dịch thì các nghiên cứu về chúng phát triển cả về chiều rộng lẫn chiều sâu. 1.3.1. Vai trò của các cytokin Một hệ thống phức tạp như hệ thống miễn dịch muốn hoạt động được cần phải có sự tương tác giữa các tế bào. Để thực hiện được sự tương tác, các tế bào đó phải nhận biết được và truyền đi các thông tin, với vai trò trung gian của các thụ thể. Các thông tin được mang tới bởi những protein hay peptid rất nhỏ gọi là cytokin 1.3.2. Một số cytokin liên quan đáp ứng miễn dịch chống ung thư 1.3.2.1. Interleukin-2 (IL-2) Năm 1976 một lymphokin gây phân bào giúp cho lympho bào tăng sinh và duy trì trong các mẫu nuôi cấy lympho T bình thường gọi là IL-2. IL-2 là một polypeptide có 133 acid amin và TLPT khoảng 15kD do tế bào Th1 hoạt hóa sản xuất ra. 1.3.2.2. Yếu tố hoại tử u - Tumor Necrosis Factor alpha (TNFα) TNFα được sản xuất chủ yếu bởi đại thực bào sau đó đi vào máu rồi đến các mô và cơ quan khác, TNFα còn được tổng hợp trong các tế bào giết tự nhiên (NK), các tế bào u hắc tố và một vài dòng tế bào ung thư. 1.3.3. Levamisole - thuốc điều trị suy giảm miễn dịch Trên thực tế cũng như lâm sàng levamisole đã có rất nhiều nghiên cứu ứng dụng. Đến nay levamisol vẫn là thuốc kích thích miễn dịch cổ điển mà các nghiên cứu đã làm sáng tỏ mọi vấn đề về cơ chế tác dụng, công thức hóa học, cấu trúc phân tử. Vì vậy, Levamisol được sử dụng trong thực nghiệm nuôi cấy tế bào lympho máu ngoại vi in vitro của công trình này, với vai trò là chứng dương. 1.3.4. Tác dụng hỗ trợ điều trị ung thư của TNHC Một số alkaloid của TNHC: Crinafolin và crinafolidin đã được Ghosal (1985) thử nghiệm với tế bào ung thư và cho kết quả tốt. Phan Thị Phi Phi và cs (2003), sử dụng mô hình chiếu xạ bán cấp để đánh giá khả năng phục hồi tế bào lympho T, NK cả về số lượng và chức năng tiết 2 cytokin IL-2 và TNFα của viên Crila cho thấy: Viên Crila kích thích khả năng hồi phục tế bào lympho T, NK về cả số lượng và chức năng tiết. Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Thời gian và địa điểm nghiên cứu  Thời gian nghiên cứu: Từ tháng 3/2012 đến tháng 12/2012.  Các mẫu máu bệnh nhân được thu thập tại Bệnh viện K Hà Nội. 5  Các kỹ thuật nuôi cấy tế bào, thu dịch nổi, chiết tách ARN và phân tích được tiến hành tại Phòng thí nghiệm của Bộ môn Miễn dịch - Sinh lý bệnh, Trường Đại học Y Hà nội. 2.2. Đối tƣợng nghiên cứu 2.2.1. Bệnh nhân 10 ml máu được lấy từ bệnh nhân UTVMH giai đoạn trước điều trị tia xạ, hóa chất nằm tại khoa xạ 1 và xạ 3, Bệnh viện K Hà Nội từ tháng 3/2012, tuổi từ 12 đến 78 tuổi. 2.2.2. Người bình thường 10 ml máu được lấy từ người khỏe mạnh về lâm sàng, tuổi từ 20 đến 60 là cán bộ, sinh viên trường Đại học Y Hà Nội. 2.2.3. Vật liệu nghiên cứu Thuốc viên nén Crilin T hàm lượng 250 mg/viên, được cung cấp bởi Nguyễn Thị Ngọc Trâm, Công ty Thiên dược, Bình Dương, Việt nam. 2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu  Nuôi cấy tế bào lympho  Đếm số lượng bạch cầu và dòng bạch cầu lympho  Chiết tách ARN từ tế bào nuôi cấy  Tổng hợp cADN  Kỹ thuật RT-PCR  Kỹ thuật ELISA định lượng IL-2 và TNFα trong dịch nuôi cấy tế bào lympho Chƣơng 3 KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1. Kiểm tra chất lƣợng ARN chiết tách đƣợc Chúng tôi kiểm tra bằng phản ứng RT-PCR với mồi của gen B2M thì vẫn cho kết quả dương tính với các băng đậm rõ nét (Hình 3.1A). Như vậy việc xác định sự biểu lộ các gen IL-2 và TNFα bằng phản ứng RT-PCR có độ nhạy cao là khả quan. 3.2. Phản ứng RT-PCR đơn mồi của gen B2M, IL-2 và TNFα Các cặp mồi này đều được khuếch đại đơn mồi với các tế bào dòng CTLL-2 (IL-2) và L929 (TNFα), chúng đều được thử điều kiện tối ưu và cho kết quả dương tính với 01 băng duy nhất cho mỗi gen nghiên cứu và gen nội chuẩn B2M (Hình 3.1 A, B, C). 6 Hình 3.1. RT-PCR đơn mồi xác định biểu lộ các gen B2M, IL-2 và TNFα ở các tế bào dòng chuẩn 3.3. Phản ứng RT-PCR đa mồi của gen B2M với IL-2/TNFα Các cặp mồi sẽ được khuếch đại đồng thời và tránh được sự gắn mồi không đặc hiệu và tạo ra nhiều sản phẩm không mong muốn. Kết quả cho thấy không có băng không đặc hiệu (Hình 3.2 A và 3.2 B). Hình 3.2. Hình ảnh PCR đa mồi của cặp gen nội chuẩn. Với kết quả này, PCR đa mồi sẽ được dùng để xác định sự biểu lộ gen IL-2 và TNFα ở các mẫu nuôi cấy lympho bào của người bình thường và bệnh nhân ung thư vòm. 3.4. Sự biểu lộ IL-2 ở mức độ mARN của lympho bào máu ngoại vi nuôi cấy in vitro với thuốc thử. 7 Hình 3.3. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của IL-2 ở lympho người bình thường nuôi cấy Hình 3.4. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của IL-2 ở lympho nuôi cấy của bệnh nhân ung thư vòm mũi họng Cả bệnh nhân và người thường đều cho kết quả như nhau và điều đặc biệt là Crilin T cho kết quả kích thích tăng tiết IL-2 cao hơn so với chứng dương và chứng âm. Để đánh giá sự tiết IL-2 của bệnh nhân so với người thường bằng RT-PCR (Hình 3.3 và Hình 3.4) có khác nhau hay không thì không phải dễ vì hình ảnh có độ phân dải, đậm nhạt khác nhau. Cần phải đối chiếu với kết quả ELISA, sẽ bàn luận sau. 3.5. Sự biểu lộ mARN của TNFα ở lympho bào nuôi cấy in vitro với thuốc thử. 8 Hình 3.5. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của TNFα ở lympho người bình thường nuôi cấy Hình 3.6. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của TNFα ở lympho bệnh nhân ung thư vòm mũi họng nuôi cấy Sản phẩm của phản ứng RT-PCR đối với biểu lộ mARN TNFα ở lympho bào bệnh nhân ung thư vòm mũi họng chỉ ra trong Hình 3.6. Các băng của B2M cũng tương đương nhau, trong khi đó ở hai nồng độ Crilin T đều cho biểu lộ nhiều hơn so với nhóm chứng. Nếu so sánh sự biểu lộ mARN của TNFα ở bệnh nhân và người thường thì thấy rằng Crilin T làm tăng biểu lộ TNFα ở cả 02 nhóm lympho bào người bệnh và người bình thường. Đây là tín hiệu cho thấy rằng thuốc có tác dụng tốt trong việc kích thích miễn dịch. Điều này sẽ được chứng minh ở mức độ protein. 3.6. So sánh biểu lộ protein của gen IL-2 ở dịch nuôi cấy lympho bào đƣợc xác định bởi ELISA Hình 3.7. So sánh sự biểu lộ IL-2 của Levamisol với chứng âm ở bệnh nhân (p=0,045) Trong 9 mẫu nuôi cấy lympho bào của bệnh nhân ung thư vòm mũi họng. Hầu hết Levamisol có tác dụng tăng tiết IL-2, tuy nhiên vẫn chưa cao hơn nhiều so với nhóm chứng âm (Hình 3.7). Kết quả này cũng phù hợp với kết quả RT-PCR ở trên. Điều này cho thấy sự 9 biểu lộ ở hai mức độ mARN và protein là đồng biến. Sự khác biệt này có ý nghĩa thông kê p<0,05. Hình 3.8. So sánh nồng độ IL-2 chứng dương và 0,25mg Crilin T ở tế bào bệnh nhân in vitro (p= 0,14) Hình 3.9. So sánh nồng độ IL-2 chứng dương và 0,5mg Crilin T ở dịch nuôi cấy in vitro tế bào lympho từ bệnh nhân (p=0,39) Hình 3.10. So sánh nồng độ IL-2 với liều Crilin T 0,25mg và 0,5mg ở tế bào lympho in vitro (p=0,23) Khi so sánh sự biểu lộ IL-2 ở lympho bào bệnh nhân với các nồng độ Crilin T với levamisol, cho thấy 6/9 mẫu liều thấp và 7/9 (77.7%) mẫu liều cao có sự biểu lộ cao hơn so với Levamisol (Hình 3.8 và hình 3.9). Với tỷ lệ này, chứng tỏ Crilin T có tác dụng kích thích miễn dịch cao hơn Levamisol. Khi xem xét các liều thuốc Crilin T khác nhau, liều thấp cho đáp ứng khá hơn so với liều cao (Hình 3.10). Tuy nhiên, những sự khác biệt này đều không có ý nghĩa thống kê, do cỡ mẫu còn thấp. Các kết quả này cũng phù hợp với sự biểu lộ mARN phát hiện bằng RT-PCR. 10 Vì đối tượng nghiên cứu là máu của những bệnh nhân ung thư vòm họng giai đoạn muộn hay người bình thường đã khác nhau về di truyền học, do đó khả năng đáp ứng của các tế bào lympho nuôi cấy với các tác nhân sinh học có thể khác nhau, sẽ cho kết quả khác nhau. Đối với đối tượng người thường, chúng tôi thu được kết quả như sau: Nhóm chứng có biểu lộ tốt, Levamisol cao hơn chứng âm (Hình 3.11), liều thấp và cao kích thích cao hơn Levamisol (4/5) (Hình 3.12 và hình 3.13) và liều cao lại cho biểu lộ cao hơn liều thấp (Hình 3.14). Tuy nhiên, sự khác biệt không có ý nghĩa thống kê. Hình 3.11. So sánh sự biểu lộ Il-2 của lympho được kích thích bởi Levamisol với chứng âm ở người thường (p=0,18) Hình 3.12. So sánh nồng độ IL-2 chứng dương và 0,25mg Crilin T ở dịch nuôi cấy người thường in vitro (p=0,42) Hình 3.13. So sánh nồng độ IL-2 chứng dương và 0,5mg Crilin T ở dịch nuôi cấy người thường in vitro (p=0,30) [...]... (2012), Trinh nữ CRILA-Crinum latifolium L var crilae Tram & Khanh, var n.: Một thứ mới của loài Trinh nữ Hoàng cung- Crinum latofolium L (Họ náng -Amaryllidaceae) ở Việt nam”, Tạp chí Sinh học, 34(2), tr 190-193 17 Nguyễn Thị Ngọc Trâm, Z.K., V Bankova, S Popov, E Zvetkova, E Katzarovo, Lê Văn Hương (2001), “Hoạt tính gây độc tế bào của phân đoạn alkaloid từ cây trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium... cao của Crilin T cho kết quả tốt hơn Đáp ứng TNFα xảy ra rất sớm, sau 4h nuôi cấy tế bào lympho in vitro với Crilin T Crilin T có xu hướng đáp ứng tốt hơn so với Levamisol ở cả hai cytokin IL-2 và TNFα KIẾN NGHỊ Cần phải tăng số mẫu nghiên cứu để có thể đánh giá chính xác - Thử tác dụng thuốc ở liều lượng khác nhau hơn - Xây dựng mô hình thực nghiệm ung thư do hóa chất để thử tác dụng miễn dịch in vivo... minh bởi nhiều tác giả khác trước đây khi dùng các chất kích thích miễn dịch khác [4], [5] Hình 3.15 So sánh nồng độ IL-2 ở tế bào bệnh nhân ung thư vòm mũi họng và người bình thường in vitro 3.7 So sánh biểu lộ protein của gen TNFα ở dịch nuôi cấy có sử dụng các thuốc thử Khác với IL-2, TNFα biểu lộ rất cao trong các tế bào nuôi cấy in vitro, dù mới chỉ có 4h sau khi nuôi cấy Và thuốc Crilin T có tác. .. sát về thực vật, nuôi trồng và thu hái cây trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium L)” Tạp chí Dược học, Số 2, tr 21-22 19 Nguyễn Thị Ngọc Trâm, Phan Thị Phi Phi., Phan Thị Thu Anh và cs (2008), Tác dụng phục hồi tổn thương tế bào lympho T và dòng tủy của viên nang Crila Trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium L.)”, Tạp chí Dược học, Số 5, tr 12-14 20 Cao Hữu Vinh (2009), Nghiên cứu nồng độ TNFα ở bệnh... độ protein cũng cho kết quả tương tự (Hình 3.18A và hình 3.18B) Như vậy, các kỹ thuật ELISA và RT-PCR đều cho kết quả tốt đối với sự biểu lộ TNFα 3.8 Đánh giá tác dụng tăng cƣờng miễn dịch của Crilin T so với nhóm chứng dƣơng Levamisol 12 Qua kết quả thu được ở cả hai sự biểu lộ IL-2 và TNFα trong các thực nghiệm trên, ta thấy Crilin T có tác dụng mạnh hơn Levamisol, đặc biệt là TNFα có sự chế tiết... miễn dịch chống ung thư của các alkaloid va Flavonoid được chiết xuất từ cây trinh nữ hoàng cung (crinum latifonium L.) để sử dụng làm nguyên liệu sản xuất thuốc bổ trợ điều trị ung thư Báo cáo tổng hợp kết quả khoa học công nghệ nhiệm vụ hợp tác quốc tế về khoa học và công nghệ theo nghị định thư giữa Việt nam và Bungari, Bộ khoa học và công nghệ 16 Nguyễn Thị Ngọc Trâm, Trần Công Khánh (2012), Trinh. .. II Nhà xuất bản Y học 12 Đỗ Tất Lợi (2003), Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam, NXB Y Học Hà Nội, tr 511-512 13 Phan Thị Phi Phi (1997), “Đại cương về Cytokin”, Giáo trình giảng dạy sau đại học 14 Nguyễn Nhật Thành, Phạm Thị Ninh, Trần Thị Phương Thảo, Hoàng Minh Châu, Trần Văn Sung (2011), “Nghiên cứu thành phần hóa học lá cây trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium) trồng ở Đồng Nai, Việt Nam”, Tạp... Crilin T 0,25mg và 0,5mg ở tế bào người bình thường in vitro (p = 0,34) Để xem xét tổng hợp sự biểu lộ của IL2 giữa nhóm người thường và nhóm người bệnh, chúng tôi thấy sự biểu lộ ở nhóm người bệnh tốt hơn nhóm người thường (Hình 3.15) Điều này cũng có thể phù hợp với sinh học khi đáp ứng miễn dịch bình thường đã tốt nay kích thích miễn dịch, khả năng tăng đáp ứng sẽ thấp hơn trong tình trạng hệ miễn dịch. .. vivo References Tiếng việt 1 Vũ Triệu An, Jean Claude Homberg, (1997), Miễn dịch học NXB Y học, 1997 2 Trần Ngọc Anh, Phan Thu Giang, và Trần Văn Quy (2006), Nghiên cứu định tính, định lượng crinamidin trong dược liệu và viên nang trinh nữ hoàng cung bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao, Kiểm nghiệm thuốc, 4(14), tr 10-14 3 Phạm Hoàng Anh, Nguyễn Hoài Nga, Trần Hồng Trường và cs (2000), “Tình hình... “Khảo sát alcaloid chiết từ lá cây Trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium L Amaryllidaceae) bằng kỹ thuật sắc ký ghép với khối phổ (GC - MS)”, Tạp chí Dược học 10 Nguyễn Ngọc Lanh, Văn Đình Hoa và cs (2006), Miễn dịch học, Nhà xuất bản y học 11 Nguyễn Ngọc Lanh, Vũ Triệu An, Phan Thị Phi Phi, Văn Đình Hoa, Phan Thị Thu Anh, Trần Thị Chính, Dương Ngọc Quý (2003), Miễn dịch học Xuất bản lần II Nhà xuất . Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung Phạm Huy Cường Trường Đại học. giá tác dụng tăng cường miễn dịch của Crilin T so với Levamisol Chƣơng 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Cây Trinh nữ hoàng cung Cây Trinh nữ hoàng cung

Ngày đăng: 10/02/2014, 20:48

HÌNH ẢNH LIÊN QUAN

Hình 1.1. Cây trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium L.) 1.1.1. Thành phần hóa học của cây Crinum latifolium L - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 1.1. Cây trinh nữ hoàng cung (Crinum latifolium L.) 1.1.1. Thành phần hóa học của cây Crinum latifolium L (Trang 2)
Hình 3.1. RT-PCR đơn mồi xác định biểu lộ các gen B2M, IL-2 và TNFα ở các tế bào dòng chuẩn  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.1. RT-PCR đơn mồi xác định biểu lộ các gen B2M, IL-2 và TNFα ở các tế bào dòng chuẩn (Trang 6)
Hình 3.2. Hình ảnh PCR đa mồi của cặp gen nội chuẩn. - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.2. Hình ảnh PCR đa mồi của cặp gen nội chuẩn (Trang 6)
Hình 3.4. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của IL-2 ở lympho nuôi cấy của bệnh nhân ung thư vòm mũi họng  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.4. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của IL-2 ở lympho nuôi cấy của bệnh nhân ung thư vòm mũi họng (Trang 7)
Hình 3.3. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của IL-2 ở  lympho người bình thường nuôi cấy  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.3. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của IL-2 ở lympho người bình thường nuôi cấy (Trang 7)
Hình 3.6. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của TNFα ở lympho bệnh nhân ung thư vòm mũi họng nuôi cấy  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.6. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của TNFα ở lympho bệnh nhân ung thư vòm mũi họng nuôi cấy (Trang 8)
Hình 3.5. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của TNFα ở lympho người bình thường nuôi cấy  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.5. Hình ảnh điện di sản phẩm RT-PCR của TNFα ở lympho người bình thường nuôi cấy (Trang 8)
Hình 3.8. So sánh nồng độ IL-2 chứng dương và 0,25mg Crilin Tở tế bào bệnh nhân in vitro (p= 0,14)  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.8. So sánh nồng độ IL-2 chứng dương và 0,25mg Crilin Tở tế bào bệnh nhân in vitro (p= 0,14) (Trang 9)
Hình 3.9. So sánh nồng độ IL-2 chứng dương và 0,5mg Crilin Tở dịch nuôi cấy in vitro tế bào lympho từ bệnh nhân (p=0,39)  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.9. So sánh nồng độ IL-2 chứng dương và 0,5mg Crilin Tở dịch nuôi cấy in vitro tế bào lympho từ bệnh nhân (p=0,39) (Trang 9)
Hình 3.11. So sánh sự biểu lộ Il-2 của lympho được kích thích bởi Levamisol với chứng âm ở người thường (p=0,18) - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.11. So sánh sự biểu lộ Il-2 của lympho được kích thích bởi Levamisol với chứng âm ở người thường (p=0,18) (Trang 10)
Hình 3.12. So sánh nồng độ IL-2 chứng dương và 0,25mg Crilin Tở dịch nuôi cấy người thường in vitro (p=0,42)  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.12. So sánh nồng độ IL-2 chứng dương và 0,25mg Crilin Tở dịch nuôi cấy người thường in vitro (p=0,42) (Trang 10)
Hình 3.14. So sánh nồng độ IL-2 với liều Crili nT 0,25mg và 0,5mg ở tế bào người bình thường in vitro (p = 0,34)  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.14. So sánh nồng độ IL-2 với liều Crili nT 0,25mg và 0,5mg ở tế bào người bình thường in vitro (p = 0,34) (Trang 11)
Hình 3.15. So sánh nồng độ IL-2 ở tế bào bệnh nhân ung thư vòm mũi họng và người bình thường in vitro  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.15. So sánh nồng độ IL-2 ở tế bào bệnh nhân ung thư vòm mũi họng và người bình thường in vitro (Trang 11)
Hình 3.17. So sánh nồng độ TNFα với liều Crili nT 0,25mg và 0,5mg ở tế bào người bình thường in vitro (p=0,42)  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.17. So sánh nồng độ TNFα với liều Crili nT 0,25mg và 0,5mg ở tế bào người bình thường in vitro (p=0,42) (Trang 12)
Hình 3.16. So sánh nồng độ TNFα ở liều Crili nT 0,25mg và 0,5mg ở tế bào lympho in vitro (p=0,17)  - Thử nghiệm tác dụng tăng cường miễn dịch in vitro của các chế phẩm cây trinh nữ hoàng cung
Hình 3.16. So sánh nồng độ TNFα ở liều Crili nT 0,25mg và 0,5mg ở tế bào lympho in vitro (p=0,17) (Trang 12)

TỪ KHÓA LIÊN QUAN

TÀI LIỆU CÙNG NGƯỜI DÙNG

TÀI LIỆU LIÊN QUAN

w