KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP: XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM NGUYÊN LIỆU VÀ CAO CHIẾT TỪ QUẾ. HỌ LONG NÃO VÀ XẠ CAN HỌ LAY ƠN

Bộ Giáo Dục & Đào Tạo Trường Đại Học Sư Phạm TP Hồ Chí Minh Khoa Hóa  KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC CHUYÊN NGÀNH: HÓA HỮU CƠ XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM NGUYÊN LIỆU VÀ CAO CHIẾT TỪ QUẾ (Cinnamomum cassia Bl.) HỌ LONG NÃO (Lauraceae) VÀ XẠ CAN (Belamcanda chinensis (L.) DC) HỌ LAY ƠN (Iridaceae) Người hướng dẫn khoa học: ThS DƯƠNG THỊ MỘNG NGỌC Người thực hiện: : HOÀNG THỊ MAI TP Hồ Chí Minh - 2013 i LỜI CẢM ƠN  Trong suốt q trình thực khóa luận tốt nghiệp này, hướng dẫn tận tình quý thầy cô anh chị, bạn thực khóa luận, đề tài Trung tâm Sâm Dược Liệu TP Hồ Chí Minh tạo điều kiện giúp em hồn thành tốt khóa luận Em xin gởi lời cảm ơn chân thành đến:  Gia đình ủng hộ tinh thần, vật chất tạo điều kiện cho em năm học vừa qua suốt q trình làm khóa luận  Các thầy Khoa Hóa học trường ĐH Sư Phạm TP.HCM tận tụy dạy dỗ em suốt khóa học trường  PGS.TS Trần Công Luận, Giám Đốc Trung tâm Sâm Dược Liệu tạo điều kiện cho em hoàn thành khóa luận  Cơ ThS Dương Thị Mộng Ngọc chị Nguyễn Thị Ngọc Đan người trực tiếp hướng dẫn truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm tạo điều kiện tốt để em thực tốt khóa luận  Cô Nguyễn Thị Hoa, chị Lâm Thị Bích Thảo, anh Bùi Thế Vinh q thầy cơ, anh chị trung tâm Sâm Dược Liệu hết lòng giúp đỡ tạo điều kiện tốt thời gian em thực khóa luận  Các bạn sinh viên trường ĐH Khoa Học Tự Nhiên, ĐH Nông Lâm TP.HCM bạn sinh viên lớp giúp đỡ, chia sẻ kinh nghiệm học tập vui buồn suốt thời gian em làm khóa luận Trung tâm Sinh viên thực HOÀNG THỊ MAI ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT vi DANH MỤC CÁC BẢNG vii DANH MỤC CÁC HÌNH ix Phần 1: ĐẶT VẤN ĐỀ 10 Phần 2: TỔNG QUAN 13 GIỚI THIỆU VỀ CÁC DƯỢC LIỆU 14 1.1 Quế [1,3,6,10,13,21,23,24] 14 1.1.1 Mô tả thực vật 14 1.1.2 Bộ phận dùng 15 1.1.3 Thành phần hoá học 15 1.1.4 Tác dụng dược lý 16 1.1.5 Tánh vị, công 16 1.1.6 Công dụng 17 1.1.7 Các thuốc có quế 18 1.1.8 Các chế phẩm từ quế 20 1.2 Xạ can[1,2,3,6,8,10,14,18,20,22] 21 1.2.1 Mô tả thực vật 21 1.2.2 Bộ phận dùng 22 1.2.3 Thành phầnhoá học 22 1.2.4 Tác dụng dược lý 25 1.2.5 Tính vị cơng 26 1.2.6 Công dụng 26 1.2.7 Bài thuốc có xạ can 26 1.2.8 Các chế phẩm từ Xạ Can 30 CÁC PHƯƠNG PHÁP CHIẾT[1,3,5,16] 31 2.1 2.2 2.3 Chiết lỏng-lỏng 31 Chiết siêu âm 31 Chiết soxhlet 31 ĐỊNH TÍNH BẰNG PHẢN ỨNG HỐ HỌC[1,3,5,10] .31 PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỚP MỎNG[1,3,12,16] .32 PHỔ TỬ NGOẠI KHẢ KIẾN (PHỔ UV-VIS)[1,3,4,5,10] 33 5.1 Khái niệm 33 iii 5.2 Đặc điểm 33 Phần 3: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 35 VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU .36 1.1 1.2 Đối tượng nghiên cứu 36 Dung mơi- Hố chất- Trang thiết bị 36 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 37 2.1 Xây dựng tiêu chuẩn kiếm nghiệm nguyên liệu 37 2.1.1 Khảo sát độ tinh khiết nguyên liệu 37 2.1.2 Định tính hợp chất hoá thực vật nguyên liệu 39 2.1.3 Định lượng hợp chất hóa thực vật nguyên liệu 40 2.2 Xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm cao Quế cao Xạ Can 43 2.2.1 Khảo sát độ tinh khiết cao Quế cao Xạ Can 43 2.2.2 Định tính hợp chất cao Quế cao Xạ Can 44 2.2.3 Định lượng hợp chất cao Quế cao Xạ Can 47 Phần 4: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 52 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM NGUYÊN LIỆU QUẾ VÀ XẠ CAN 53 1.1 Khảo sát độ tinh khiết nguyên liệu 53 1.1.1 Độ ẩm 53 1.1.2 Độ tro toàn phần 53 1.1.3 Độ tro không tan acid 54 1.2 Định tính hợp chất hóa ngun liệu Quế Xạ Can 54 1.2.1 Quế 54 1.2.2 Xạ Can 56 1.3 Định lượng hợp chất hóa thực vật 58 1.3.1 Quế 58 1.3.2 Xạ Can 58 XÂY DỰNG TIÊU CHUẨN KIỂM NGHIỆM CAO QUẾ VÀ CAO XẠ CAN .59 2.1 Khảo sát độ tinh khiết cao Quế cao Xạ Can 59 2.3.1 Độ ẩm 59 2.3.2 Độ tro toàn phần 59 2.2 Định tính hợp chất cao Quế cao Xạ Can 60 2.2.1 Cao Quế 60 2.2.2 Cao Xạ Can 63 2.3 Định lượng hợp chất cao Quế cao Xạ Can 67 2.3.1 Cao Quế 67 2.3.2 Cao Xạ Can 67 Phần 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 69 KẾT LUẬN .70 iv KIẾN NGHỊ 71 2.1 Xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm nguyên liệu 71 2.1.1 Quế 71 2.1.2 Xạ Can 72 2.2 Xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm cao Quế cao Xạ Can 73 2.2.1 Cao Quế 73 2.2.2 Cao Xạ Can 74 TÀI LIỆU THAM KHẢO 75 v DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT dd : Dung dịch TT : Thuốc thử NaOH : Natri hydroxyd SKLM : Sắc ký lớp mỏng MeOH : Methanol n-BuOH : n-butanol EtOAc : Etyl acetate HCl : Acid clohydric H SO : Acid sulfuric CHCl : Chlorofrom UV : Ultraviolet PE : Petroleum ether DĐVN : Dược Điển Việt Nam vi DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1: Các chế phẩm từ Quế 20 Bảng 2: Các chế phẩm từ Xạ Can .30 Bảng 3: Dung mơi- Hố chất- Trang thiết bị 36 Bảng 4: Độ ẩm nguyên liệu 53 Bảng 5: Độ tro toàn phần nguyên liệu .53 Bảng 6: Độ tro không tan acid nguyên liệu 54 Bảng 7: Hàm lượng tinh dầu có nguyên liệu Quế 58 Bảng 8: Hàm lượng 31-norcycloartanyl tridecanoat nguyên liệu Xạ Can 58 Bảng 9: Độ ẩm cao Quế cao Xạ Can .59 Bảng 10: Độ tro toàn phần cao Quế cao Xạ Can 59 Bảng 11: Hàm lượng aldehyd cinamic cao Quế 67 Bảng 12: Hàm lượng 31- norcycloartanyl tridecanoat cao Xạ Can 68 vii DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ 1: Định lượng 31- norcycloartanyl tridecanoat nguyên liệu Xạ Can 42 Sơ đồ 2: Định lượng aldehyd cinamic cao Quế .48 Sơ đồ 3: Định lượng 31- norcycloartanyl tridecanoat cao Xạ can 50 viii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1: Quế (Cinnamomum cassia Bl.) 14 Hình 2: Xạ Can (Belamcanda chinensis (L.) DC.) 21 Hình 3: Dụng cụ xác định hàm lượng nước phương pháp cất với dung mơi 37 Hình 4:Thiết bị cất tinh dầu 41 Hình 5: SKLM kiểm tra diện chất chuẩn aldehyd cinamic nguyên liệu Quế .55 Hình 6: Phản ứng hóa học ngun liệu Xạ Can 56 Hình 7: SKLM kiểm tra diện chất chuẩn 31- norcycloartanyl tridecanoat nguyên liệu Xạ Can 57 Hình 8:SKLM kiểm tra diện nguyên liệu Quế cao Quế .61 Hình 9: SKLM kiểm tra diện chất chuẩn aldehyd cinamic cao Quế 62 Hình 10: Phản ứng hóa học cao Xạ Can .63 Hình 11: SKLM kiểm tra diện nguyên liệu cao Xạ Can 65 Hình 12: SKLM kiểm tra diện chất chuẩn 31- norcycloartanyl tridecanoat cao Xạ Can 66 ix Phần 1: ĐẶT VẤN ĐỀ Thuốc sử dụng phịng chữa bệnh có hai nguồn gốc: tự nhiên (dược liệu) thuốc tổng hợp (hóa dược) Thuốc sản xuất theo đường hóa học tổng hợp có tác dụng điều trị cao hiệu nhanh, nhiên, bên cạnh lợi ích tức thời, có khơng loại thuốc có nhiều phản ứng phụ, tác dụng mong muốn ảnh hưởng xấu đến sức khỏe theo hướng khác Theo thống kê Tổ chức Y Tế giới có tới 2000 lồi thảo dược sử dụng 80% dân số giới dựa vào nguồn thuốc có nguồn gốc dược liệu Trên 25% thuốc sử dụng lâm sàng có nguồn gốc thực vật Thị trường thuốc có nguồn gốc thực vật giới vào khoảng 30 tỉ USD Nhiều biệt dược Đông dược châu Á tiêu thụ mạnh châu Âu Trong nước ta nước có hệ thống động thực vật phong phú đa dạng từ núi cao đồng bờ biển, nước ước tính có khoảng 12.000 lồi có khoảng 4.000 lồi sử dụng làm thuốc Nhiều nguyên liệu mặt hàng có giá trị xuất như: Quế, hồi, sa nhân, hoa hịe,……Trong số Quế Xạ Can hai loại nguyên liệu mà sử dụng nhiều thuốc dân gian Quế tên khoa học Cinnamomum cassia Bl biết đến với hàng loạt công dụng khác Quế sử dụng thuốc dân gian để chữa số bệnh về: đường tiêu hố, đường hơ hấp, kích thích tuần hồn máu, lưu thông huyết mạch, giúp làm ấm thể, chống lại giá lạnh có tính chất sát trùng Ngoài ra, Quế nhân dân coi bốn vị thuốc có giá trị “Sâm, Nhung, Quế, Phụ” Xạ can với tên khoa học Belamcanda chinensis (L.) DC coi vị thuốc quý chữa bệnh họng, viêm amiđan có mủ, ho nhiều đờm, khản tiếng, dùng chữa sốt, đại tiểu tiện không thông, sưng vú tắc tiêu sữa, đau kinh, làm thuốc lọc máu Hiện nay, để điều trị bệnh hơ hấp, có nhiều dược phẩm tây y sử dụng, nhiên bên cạnh hiệu quả, dược phẩm để lại tác dụng phụ có hại cho gan, thận Trước tình hình này, Trung tâm Sâm Dược Liệu TP Hồ Chí Minh tiến hành nghiên cứu sản phẩm điều trị bệnh hô hấp từ dược liệu, để nối tiếp nghiên cứu triển khai, đề tài “Xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm nguyên liệu cao chiết từ Quế (Cinnamomum cassia Bl.), họ Long não (Lauraceae) Xạ Can (Belamcanda chinensis (L.) DC) họ Lay ơn (Iridaceae)” thực với mục tiêu sau: Xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm nguyên liệu Quế (Cinnamomum cassia Bl.) Xạ Can (Belamcanda chinensis (L.) DC) Xây dựng tiêu chuẩn kiểm nghiệm cao Quế (Cinnamomum cassia Bl.) cao Xạ Can (Belamcanda chinensis (L.) DC Phần 2: TỔNG QUAN GIỚI THIỆU VỀ CÁC DƯỢC LIỆU 1.1 Quế [1,3,6,10,13,21,23,24] Tên khoa học: Cinnamomum cassia Bl Thuộc giống: Cinnamomum Họ: Long não (Lauraceae) Tên khác: Quế đơn, quế bì, quế Trung Quốc, nhục quế, mạy quẻ (Tày), kía (Dao) Tên nước ngoài: Chinese cassia, Chinese cinnamon, cassia bark (Anh), cannellier casse, laurier casse, cinnamone (Pháp) Hình 1: Quế (Cinnamomum cassia Bl.) 1.1.1 Mô tả thực vật Cây to, cao 10-20m Cành hình trụ, nhẵn, màu nâu Lá mọc so le, dày cứng dai, hình mác, dài 12-25cm, rộng 4-8 cm, gốc thuôn, đầu nhọn, mặt nhẵn, màu lục sẫm bóng, mặt màu xám tro, có lơng lúc cịn non; gân 3, hình cung, rõ mặt dưới, gân bên kéo dài đến đầu lá, gân phụ nhiều, song song; cuống to, dài 1,5-2 cm, có rãnh mặt Cụm hoa mọc kẽ lá, gần đầu cành thành chuỳ dài 7-15 cm; bao hoa gồm phiến gần nhau, màu trắng, dài 3cm, mặt ngồi có lơng nhỏ Quả hạch, hình trứng hình bầu dục, có cạnh dài 1,2-1,3 cm, nằm đài tồn nguyên chia thuỳ Vỏ vị có mùi thơm Mùa hoa: tháng 4-7; mùa quả: tháng 10-12 1.1.2 Bộ phận dùng Vỏ thân, vỏ cành non phơi sấy khô (Quế chi) Vỏ thân phơi khơ trơng bóng râm (Quế nhục) Tinh dầu từ cành 1.1.3 Thành phần hoá học Vỏ quế nói chung chứa tinh dầu tới 4% ( thông thường 1%), tannin (gồm nhiều đơn vị 3,5,3’,4’- tetrahydroflavan-3,4-diol polymer hóa),catechin proanthocyanin, dầu béo, chất nhựa, chất nhầy, gôm, đường, calci oxalat, hai hợp chất có tác dụng diệt trùng (cinnzelanin cinnzelanol), tinh bột, protein, chất vô cơ, coumarin…(A Y Leung cs,1996;Prosea 13, 1999) Cinnamomum cassi (quế Trung quốc, quế đơn, quế bì) lồi trồng nhiều Việt Nam • Vỏ chứa nhiều tinh dầu 1-2%, tannin, chất nhựa, đường, calci oxalat, chất nhầy coumarin • Tinh dầu quế (hàm lượng >1%), thành phần tinh dầu aldehydcinamic, thành phần cinnamylacetat, cinnamylalcol làm giảm giá trị tinh dầu • Lá chứa 0,7-1,2% tinh dầu Trong vỏ quế có hợp chất diterpenoid, phenyl glycosid, chất nhầy, hợp chất flavonoid, tanin, coumarin 1.1.4 Tác dụng dược lý • Tác dụng kháng khuẩn: Trên ống nghiệm nhục quế có tác dụng ức chế mạnh với nhiều loại vi khuẩn gam (+), mạnh gam (-), ức chế nấm gây bệnh Tác dụng mạnh phẩy khuẩn tả, nống độ ức chế tối thiểu nhóm phẩy khuẩn tả Elotor, Inaba Ogawa 2/10000 • Tác dụng lên tim mạch: Nước sắc nhục quế tăng lưu lượng máu đọng mạch vành tim cô lập chuột lang cải thiện thiếu máu tim cấp thỏ pituitrin gây nên Có tác dụng an thần, giảm hoạt động tự nhiên chuột nhắt có tác dụng đối kháng với vận động gây apomorphin methamphetamin • Dầu vỏ quế thuốc thơm kiện vị trừ phong: Có tác dụng kích thích nhẹ dày ruột Thuốc có tác dụng tăng tiết nước bọt dịch vị tăng cường chức tiêu hóa, làm giảm thắt trơn nội tạng, làm dịu đau bụng thắt ruột Cinnamaldehyd có tác dụng ức chế hình thành lt bao tử chuột kích thích • Trên động vật thực nghiệm: Thuốc mà chủ yếu cinamaldehyd có tác dụng ức chế trung khu thần kinh, an thần, giảm đau giải nhiệt Cinamaldehyd cịn có tác dụng làm giảm co giật tử vong động vật tiêm liều strychnin 1.1.5 Tánh vị, công Quế có vị ngọt, thơm, mùi cay, tính nóng Có tác dụng bổ hoả, hồi dương, ẩm tỳ thận, thơng huyết mạch, trừ hàn tích 1.1.6 Cơng dụng Quế dùng làm thuốc cấp cứu bệnh hàn chân tay lạnh, mạch chậm nhỏ, hôn mê, đau bụng trúng thực, phong tê bại, chữa tiêu hoá kém, tả lỵ, thũng tiểu tiện bất lợi, kinh bế, rắn cắn, ung thư Ngày dùng 1-4g dạng thuốc hãm, hoà tán mài với nước mà uống Kiêng kỵ: Những người âm hư, dương thịnh phụ nữ thai nghén khơng nên dùng Theo tài liệu nước ngồi, vỏ quế bì dùng y học Trung Quốc để chữa chứng bệnh sau: − Cảm lạnh, phối hợp với nhân sâm, hoàng kỳ, thục địa − Tiêu chảy, phối hợp với mộc hương, phục linh, nhục đậu khấu − Đau vùng hông, phối hợp với phụ tử, địa hoàng − Đau dày, đau bụng, đau kinh, phối hợp với đương quy, hương phụ − Mụn nhọt lâu lành, phối hơp với ma hoàng, cao nhung, bạch giới tử Liều dùng ngày: 2-7,5g, sắc nước uống tán bột lần uống 0,5-2g, ngày uống 1-2 lần Vỏ cành quế trị: − Cảm mạo, sốt, mồ hôi, sợ lạnh, phối hợp với bạch thược, cam thảo, sinh khương, hồng táo − Phong hàn thấp,đau khớp, phối hợp với phụ tử, sinh khương, cam thảo − Tim hồi hộp, tức ngực, ho có đờm lỗng, phối hợp với phục linh, bạch truật, cam thảo − Bế kinh đau bụng, thống kinh, phối hợp với xuyên khung, đương quy, ngơ thù du, xích lược − Sốt rét, phối hợp với xuyên khung, bạch chỉ, thương truật Liều lượng: ngày 2-11g, dạng thuốc sắc 1.1.7 Các thuốc có quế Chữa cảm mạo (Quế chi thang): Quế chi 8g, cam thảo 6g, thược dược 6g, sinh khương 6g, táo đen quả, nước 600ml, sắc 200ml Chia lần uống nóng ngày Chữa tiêu chảy: Vỏ thân quế 4-8g, gạo nếp rang vàng 10g, hạt cau già 4g, gừng nướng lát Sắc uống Chữa sai khớp, bong gân, chấn thương Cao gián gồm hỗn hợp tinh dầu quế, hồi, menthol, camphor, cao ngải cứu, cao cúc tần, trộn vào hỗn hợp keo cao su Chữa suy nhược thể bệnh đường tiêu hoá: Nhục quế 4g, đảng sâm, bạch truật, hồng kỳ, đại táo vị 12g; trần bì, ngũ vị tử, vị 6g; cam thảo 4g; gừng 2g Sắc uống ngày thang Chữa dương hư, khí lực suy nhược, di tinh, liệt dương, thai nghén khó khăn, sợ lạnh: Nhục quế 12g; thục địa 24-32g; sơn thù, hoài sơn, bạch linh, vị 16g; mẫu đơn, trạch tả, vị 8g Tán bột thành viên, ngày uống 30-40g, hay sắc uống Chữa viêm phế quản mãn tính: Quế chi 12g, phục linh 16g, bạch truật 8g, cam thảo 4g Sắc uống ngày thang Chữa viêm khớp cấp: Quế chi 8g; thạch cao, ngạnh mễ, vị 20g; tri mẫu, hoàng bá, tang chi, vị 12g; thương truật 8g Sắc uống ngày thang 8 Chữa nhồi máu tim Nhục quế 6g; đương quy, đan sâm, nhục thung dung, ba kích, vị 12g; nhân sâm, phụ tử chế, loại 8g Sắc uống ngày thang Chữa thiếu máu: Quế tâm 6g; đảng sâm (hay nhân sâm) 16g; phục linh, hoàng kỳ, thục địa, bạch thược, đại táo, vị 12g; đương quy, ngũ vị tử, viễn chí, vị 10g; bạch truật 8g; cam thảo, trần bì, vị 6g; gừng 2g Sắc uống ngày thang 10 Chữa viêm loét dày, tá tràng: Quế chi 8g; hoàng kỳ 16g; đại táo 12g; hương phụ, bạch thược, vị 8g; sinh khương, cam thảo, cao lương khương, vị 6g Sắc uống ngày thang 11 Chữa viêm cầu thận cấp tính: Quế chi 8g; bạch truật, phục linh,trạch tả, vị 12g; trư linh 8g Sắc uống ngày thang 12 Chữa kinh nguyệt không đều, chậm kinh: Nhục quế 4g; bạch truật, đảng sâm, bạch thược, hoàng kỳ, vị 12g; phuc linh, thục địa, xuyên khung, đương quy, vị 8g; cam thảo 4g Sắc uống ngày thang 13 Chữa nôn mửa có thai Quế chi 8g; bạch thược 12g; đại táo 8g; cam thảo, sinh khương, vị 6g Sắc uống 14 Chữa viêm mũi dị ứng: Quế chi 8g; hồng kỳ 16g; bạch thược 12g; bạch truật 8g; phịng phong, đại táo, vị 6g; gừng 2g Nếu viêm mũi cấp tính chảy nước mũi nhiều, thêm ma hồng 4g; tế tân 6g Nếu mệt mỏi ăn kém, đoạn hơi, thêm đảng sâm 16g; kha tử 6g 15 Chữa viêm tắc nghẽn động mạch: Quế chi 12g; đan sâm 20g; hồng kỳ 20g; xun quy vỹ 16g; xích lược, bạch chỉ, nghệ, nhũ hương, dược, hồng hoa, đào nhân, tô mộc, loại 12g Sắc uống ngày thang 1.1.8 Các chế phẩm từ quế Trà quế Cẩm Xuyên Hương Dạng bào chế: Hộp 10vỉ x 10 viên Cơng dụng: nang Có tác dụng bổ huyết, tĩnh tâm, Chỉ định: Điều trị trường hợp có tác dụng trị chứng lo âu, mệt cảm cúm, cảm lạnh, nhức đầu, hắt mỏi hơi, sổ mũi, sốt xuất huyết Liều dùng: Người lớn ngày uống lần, lần 2-3 viên Trẻ em ngày uống hai lần lần viên Hương Y Ba Công dụng: Đặc trị tiêu chảy, viêm ruột, viêm đại tràng, lỵ, trực trùng, rối loạn tiêu hoá Bảng 1: Các chế phẩm từ Quế