KHẢO SÁT VỀ MẶT THỰC VẬT HỌC, HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYM α-AMYLASE VÀ α-GLUCOSIDASE IN VITRO CỦA CAO CHIẾT TOÀN PHẦN TỪ MƯỚP ĐẮNG RỪNG. TẦM BÓP. LÔ HỘI. LUẬN VĂN THẠC SĨ

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH Phùng Đan Thùy KHẢO SÁT VỀ MẶT THỰC VẬT HỌC, HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYM α-AMYLASE VÀ α-GLUCOSIDASE IN VITRO CỦA CAO CHIẾT TOÀN PHẦN TỪ MƯỚP ĐẮNG RỪNG (MOMORDICA CHARANTIA L VAR ABBREVIATA SER.), TẦM BĨP (PHYSALIS ANGULATA L.), LƠ HỘI (ALOE VERA (L.) BURM.F) LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh - 2014 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH Phùng Đan Thùy KHẢO SÁT VỀ MẶT THỰC VẬT HỌC, HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYM α-AMYLASE VÀ α-GLUCOSIDASE IN VITRO CỦA CAO CHIẾT TOÀN PHẦN TỪ MƯỚP ĐẮNG RỪNG (MOMORDICA CHARANTIA L VAR ABBREVIATA SER.), TẦM BĨP (PHYSALIS ANGULATA L.), LƠ HỘI (ALOE VERA (L.) BURM.F) Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60 42 01 14 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS.TS TRƯƠNG THỊ ĐẸP TS ĐỖ THỊ HỒNG TƯƠI Thành phố Hồ Chí Minh - 2014 i LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chưa công bố cơng trình khác Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2014 Học viên thực luận văn Phùng Đan Thùy ii LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành đề tài luận văn cách hoàn chỉnh bên cạnh cố gắng, nỗ lực thân cịn có hướng dẫn nhiệt tình q Thầy cô, động viên, quan tâm giúp đỡ gia đình, bạn bè suốt thời gian học tập nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn PGS.TS.Trương Thị Đẹp TS Đỗ Thị Hồng Tươi hết lịng giúp đỡ, hướng dẫn tơi suốt q trình học tập, nghiên cứu hồn thiện luận văn Xin gửi lời tri ân sâu sắc điều mà Cô dành cho Tôi xin gửi lời cảm ơn đến q Thầy Trường, Phịng Sau đại học, Khoa Sinh học trường ĐH Sư Phạm Tp HCM Đặc biệt q Thầy quản lí phịng thí nghiệm môn Thực Vật, môn Dược lý, môn Sinh hố Đại học Y Dược Tp Hồ Chí Minh tạo điều kiện, hỗ trợ thiết bị dụng cụ tốt để tơi hồn thành luận văn Cuối xin chân thành bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến cha mẹ gia đình khơng ngừng động viên, hỗ trợ, chia sẻ khó khăn suốt thời gian học tập thực luận văn Xin chân thành cảm ơn! Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2014 Học viên thực luận văn Phùng Đan Thùy iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i T 5T LỜI CẢM ƠN ii T 5T MỤC LỤC iii T 5T DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT v T T DANH MỤC CÁC BẢNG vi T 5T DANH MỤC CÁC HÌNH vii T 5T MỞ ĐẦU T 5T LÍ DO CHỌN ĐỀ TÀI T 5T MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU T 5T ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU .2 T 5T NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU .2 T 5T PHẠM VI NGHIÊN CỨU T 5T Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN T T Chương TỔNG QUAN T 5T 1.1 TỔNG QUAN VỀ BỆNH ĐÁI THÁO ĐƯỜNG T T 1.1.1 Khái niệm T 5T 1.1.2 Yếu tố nguy .4 T 5T 1.1.3 Phân loại .4 T 5T 1.1.4 Dịch tễ T 5T 1.1.5 Chẩn đoán .6 T 5T 1.1.6 Thuốc điều trị đái tháo đường T T 1.2 TỔNG QUAN VỀ DƯỢC LIỆU 11 T T 1.2.1 Mướp đắng rừng 11 T 5T 1.2.2 Tầm bóp 14 T 5T 1.2.3 Lô hội 16 T 5T 1.3 MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT VÀ LÀM KHÔ MẪU 20 T T 1.3.1 Phương pháp ngâm .20 T 5T 1.3.2 Phương pháp chiết nguyên liệu tươi 21 T T 1.3.3 Các phương pháp làm khô mẫu 21 T T iv 1.4 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ HOẠT TÍNH KHÁNG ĐÁI THÁO ĐƯỜNG CỦA T CÂY MƯỚP ĐẮNG RỪNG, TẦM BÓP, LÔ HỘI 22 T 1.4.1 Nghiên cứu Mướp đắng rừng 22 T T 1.4.2 Nghiên cứu Tầm bóp 24 T T 1.4.3 Nghiên cứu Lô hội .25 T T Chương PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 T T 2.1 THỜI GIAN, ĐỊA ĐIỂM VÀ VẬT LIỆU NGHIÊN CỨU 26 T T 2.1.1 Thời gian nghiên cứu 26 T T 2.1.2 Địa điểm nghiên cứu 26 T 5T 2.1.3 Vật liệu nghiên cứu .26 T 5T 2.1.4 Dung mơi, hóa chất, dụng cụ, trang thiết bị nghiên cứu 26 T T 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 T T 2.2.1 Khảo sát mặt thực vật học 28 T T 2.2.2 Chiết xuất thu cao dược liệu 28 T T 2.2.3 Khảo sát tác dụng hạ đường huyết in vitro cao dược liệu 29 T T 2.2.4 Phân tích kết xử lý số liệu thống kê 31 T T Chương KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN .32 T T 3.1 KHẢO SÁT VỀ MẶT THỰC VẬT HỌC .32 T T 3.1.1 Cây Mướp đắng rừng 32 T T 3.1.2 Cây Tầm bóp .40 T 5T 3.1.3 Cây Lô hội 47 T 5T 3.2 HIỆU SUẤT CHIẾT CAO DƯỢC LIỆU 53 T T 3.3 HOẠT TÍNH ỨC CHẾ α-AMYLASE, α-GLUCOSIDASE CỦA DƯỢC LIỆU .53 T T 3.3.1 Hoạt tính ức chế α-amylase 53 T T 3.3.2 Hoạt tính ức chế α-glucosidase 56 T T KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ .60 T 5T KẾT LUẬN 60 T 5T KIẾN NGHỊ 61 T 5T TÀI LIỆU THAM KHẢO 62 T 5T PHỤ LỤC T 5T v DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chú giải ĐTĐ Đái tháo đường IDF International Diabetes Federation (Hiệp hội Đái tháo đường giới) WHO IC 50 R World Health Organization (Tổ chức Y tế giới) Inhibitive concentration (nồng độ ức chế 50% hoạt tính enzym) vi DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1 Đặc điểm bệnh ĐTĐ týp týp Bảng 1.2 Một số dược liệu truyền thống sử dụng điều trị ĐTĐ 11 Bảng 1.3 Thành phần hóa học Lơ hội 17 Bảng 2.1 Danh mục thiết bị sử dụng đề tài 27 Bảng 3.1 Hiệu suất chiết cao từ Mướp đắng rừng, Tầm bóp, Lơ hội 53 Bảng 3.2 Hoạt tính ức chế α-amylase thạch Lô hội 55 Bảng 3.3 Hoạt tính ức chế α-amylase mẫu thuốc đối chứng Acarbose cao từ Mướp đắng rừng Tầm bóp 55 Bảng 3.4 Hoạt tính ức chế α-glucosidase cao dược liệu Mướp đắng rừng, Tầm bóp gel Lô hội khảo sát nồng độ 1000, 2000, 3000 µg/ml 56 Bảng 3.5 Hoạt tính ức chế α-glucosidase mẫu thuốc đối chứng acarbose, cao thân Mướp đắng rừng, cao rễ Tầm bóp 57 vii DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 1.1 Sơ đồ vai trị α-glucosidase q trình hình thành glucose Hình 2.1 Sơ đồ quy trình chiết cao tồn phần từ Mướp đắng rừng, Tầm bóp 29 Hình 3.1 Đặc điểm hình thái Momordica charantia L var abbreviata Ser 36 Hình 3.2 Cấu tạo giải phẫu rễ Momordica charantia L var abbreviata Ser 37 Hình 3.3 Cấu tạo giải phẫu thân Momordica charantia L var abbreviata Ser 38 Hình 3.4 Cấu tạo giải phẫu Momordica charantia L var abbreviata Ser 39 Hình 3.5 Đặc điểm hình thái Physalis angulata L 43 Hình 3.6 Cấu tạo giải phẫu rễ Physalis angulata L 44 Hình 3.7 Cấu tạo giải phẫu thân Physalis angulata L 45 Hình 3.8 Cấu tạo giải phẫu Physalis angulata L 46 Hình 3.9 Đặc điểm hình thái Aloe vera (L.) Burm f 49 Hình 3.10 Cấu tạo giải phẫu rễ Aloe vera (L.) Burm f 50 Hình 3.11 Cấu tạo giải phẫu thân Aloe vera (L.) Burm f 51 Hình 3.12 Cấu tạo giải phẫu Aloe vera (L.) Burm f 52 Hình 3.13 Hoạt tính ức chế α-amylase chất đối chứng Acarbose 53 Hình 3.14 Hoạt tính ức chế α-amylase cao thử từ Mướp đắng rừng 54 Hình 3.15 Hoạt tính ức chế α-amylase cao thử từ Tầm Bóp 54 Hình 3.16 Hoạt tính ức chế α-glucosidase chất đối chứng Acarbose 57 Hình 3.17 Hoạt tính ức chế α-glucosidase cao thân Mướp đắng rừng 58 Hình 3.18 Hoạt tính ức chế α-glucosidase cao rễ Tầm Bóp 58 MỞ ĐẦU LÍ DO CHỌN ĐỀ TÀI Đái tháo đường tình trạng rối loạn chuyển hóa đa ngun nhân, đặc trưng tình trạng tăng glucose huyết mạn tính rối loạn chuyển hóa carbohydrat, lipid, protein thiếu insulin, đề kháng insulin hai Tăng glucose huyết hậu bệnh đái tháo đường khơng kiểm sốt được, dẫn đến tổn thương nghiêm trọng nhiều hệ thống thể, đặc biệt mạch máu thần kinh [53] Hiện bệnh đái tháo đường xem bệnh nguy hiểm xếp thứ ba nhân loại sau bệnh tim mạch ung thư Thực tế cho thấy số người mắc bệnh đái tháo đường giới nói chung Việt Nam nói riêng ngày gia tăng Năm 2013, tồn giới có 382 triệu người mắc đái tháo đường ước tính đến năm 2035 có 592 triệu người mắc bệnh Trong có 5,1 triệu ca tử vong, trung bình giây lại có người chết mắc bệnh đái tháo đường [49] Riêng Việt Nam, năm 2008 có khoảng 7% dân số nhóm tuổi 30-69 bị bệnh đái tháo đường 17 000 người chết biến chứng bệnh [52] Ngày nay, có nhiều nhóm thuốc điều trị bệnh đái tháo đường insulin, biguanid, sulfonylurea… Tuy nhiên, việc điều trị nhóm thuốc bên cạnh tác dụng phụ gây hạ đường huyết mức, rối loạn tiêu hóa, tác dụng phụ gan thận… lúc kiểm soát đường huyết tốt tránh biến chứng bệnh đái tháo đường Ngoài ra, gánh nặng kinh tế cho người bệnh ngày tăng Trong đó, hiệu điều trị đái tháo đường loại thảo dược y học đại nghiên cứu chứng minh Với thuận lợi khí hậu nhiệt đới gió mùa, Việt Nam có nguồn dược liệu phong phú đa dạng, nhiều thuốc, phương thuốc dân gian cho hữu hiệu việc kiểm soát glucose huyết Tỏi, Cam thảo nam Vì nghiên cứu phát triển thuốc hạ đường huyết có nguồn gốc từ dược liệu với ưu điểm rẻ tiền, an toàn sử dụng lâu dài điều trị bệnh mạn tính định hướng ngành dược Việt Nam giới 2 Cây Mướp đắng rừng (Momordica charantia L var abbreviata Ser.) thuộc họ Bầu bí (Cucurbitaceae), Tầm bóp (Physalis angulata L.) thuộc họ Cà (Solanaceae) Lô hội (Aloe vera (L.) Burm.f) thuộc họ Lô hội (Aloaceae) ăn, vị thuốc rẻ tiền phổ biến sử dụng dân gian để hạ đường huyết bệnh nhân đái tháo đường Tuy nhiên Việt Nam có nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết phận từ ba dược liệu Từ sở đó, đề tài “Khảo sát mặt thực vật học, hoạt tính ức chế enzym α-amylase αglucosidase in vitro cao chiết toàn phần từ Mướp đắng rừng (Momordica charantia L var abbreviata Ser.), Tầm bóp (Physalis angulata L.), Lơ hội (Aloe vera (L.) Burm.f)” tiến hành nhằm khảo sát mặt thực vật học, sàng lọc phận dùng tiềm từ ba dược liệu để ứng dụng nghiên cứu phát triển thuốc hạ đường huyết, đóng góp thêm nhiều lựa chọn cho việc điều trị đái tháo đường an toàn MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Sàng lọc dược liệu tiềm có hoạt tính hạ đường huyết ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU Mướp đắng rừng, Tầm bóp thu hái huyện Đồng Phú, tỉnh Bình Phước Lá Lơ hội tươi thu hái vườn Dược liệu Khoa Dược, Đại học Y Dược Thành phố Hồ Chí Minh NHIỆM VỤ NGHIÊN CỨU Thu mẫu loài dược liệu: Mướp đắng rừng (Momordica charantia L var abbreviata Ser.), Tầm bóp (Physalis angulata L.), Lô hội (Aloe vera (L.) Burm.f), mô tả đặc điểm hình thái đặc điểm giải phẫu Chiết cao toàn phần từ phận dùng ba loại dược liệu trên, thử tác dụng hạ đường huyết in vitro qua phản ứng khảo sát khả ức chế enzym α-amylase ức chế enzym α-glucosidase 3 PHẠM VI NGHIÊN CỨU Khảo sát mặt thực vật học bao gồm đặc điểm hình thái, đặc điểm giải phẫu khảo sát tác dụng hạ đường huyết in vitro cao toàn phần từ dược liệu Mướp đắng rừng, Tầm bóp, Lơ hội Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN Ý nghĩa khoa học: đóng góp chung vào cơng việc mơ tả, phân biệt đặc điểm hình thái giải phẫu ba loài thực vật Ý nghĩa thực tiễn: sàng lọc phận dùng tiềm từ ba dược liệu Mướp đắng rừng, Tầm bóp, Lơ hội, cung cấp sở ban đầu cho nghiên cứu sâu để ứng dụng nghiên cứu phát triển thuốc hạ đường huyết 4 Chương TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ BỆNH ĐÁI THÁO ĐƯỜNG 1.1.1 Khái niệm Đái tháo đường (ĐTĐ) rối loạn chuyển hóa đa nguyên nhân đặc trưng tình trạng tăng glucose huyết mạn tính rối loạn chuyển hóa carbohydrat, lipid, protein thiếu insulin, đề kháng insulin hai Hệ tăng đường huyết mạn tính tổn thương nhiều quan như: mắt, thận, thần kinh [53] 1.1.2 Yếu tố nguy Béo phì, cao huyết áp, rối loạn chuyển hóa lipid, di truyền, nhiễm virus (quai bị, sởi…) Thói quen vận động, ăn nhiều thức ăn giàu lượng, sử dụng nhiều chất kích thích rượu, thuốc lá… Phụ nữ mang thai, sinh kg bị sẩy thai bị đa ối Sử dụng thuốc: corticoid, thuốc ngừa thai, thuốc lợi tiểu nhóm thiazid, diazoxid… [7] 1.1.3 Phân loại ĐTĐ có hai thể bệnh chính: ĐTĐ týp tụy tạng khơng tiết insulin týp giảm tiết insulin, đề kháng insulin ĐTĐ týp 1: tế bào β đảo Langerhans tụy khơng có khả tiết insulin, ngun nhân hệ thống miễn dịch thể tự tạo kháng thể công tế bào β Những triệu chứng điển hình ĐTĐ týp là: ăn nhiều, uống nhiều, tiểu nhiều, sụt cân, trẻ em chậm phát triển dễ bị nhiễm trùng ĐTĐ týp 2: tế bào β tiết insulin không đủ để trì nồng độ đường huyết, tế bào đích giảm nhạy cảm với insulin Bệnh nhân thường có triệu chứng thường phát triệu chứng biến chứng, phát tình cờ xét nghiệm máu trước mổ có biến chứng như: nhồi máu tim, tai biến mạch máu não, nhiễm trùng da kéo dài 5 Bảng 1.1 Đặc điểm bệnh đái tháo đường týp1 týp [5] ĐẶC ĐIỂM Tuổi khởi bệnh điển hình Liên hệ gen Tình trạng dinh dưỡng Tỷ lệ bệnh Kiểu xuất bệnh Yếu tố làm xuất bệnh Insulin huyết tương Biến chứng cấp tính ĐTĐ TÝP Trước 30 Nhiễm sắc thể số Suy dinh dưỡng 10-20% Đột ngột Bất thường miễn dịch Khơng có, Nhiễm toan-ceton huyết Điều trị insulin Cần, bắt buộc Điều trị thuốc hạ Không đáp ứng đường dạng uống ĐTĐ TÝP Sau 30 Thường không xác định Béo phì 80-90% Từ từ Mập phì, cao tuổi Bình thường, cao, thấp Hôn mê tăng áp lực thẩm thấu Có cần Có đáp ứng 85 - 90% ĐTĐ thai kỳ: tình trạng rối loạn dung nạp glucose thai kỳ gặp - 5% phụ nữ có thai Tình trạng kháng insulin liên quan đến thay đổi chuyển hóa giai đoạn cuối thai kỳ làm tăng nhu cầu insulin dẫn đến tăng đường huyết hay rối loạn dung nạp glucose Đa số trở bình thường sau sinh có nguy đáng kể (30 - 60%) phát triển thành ĐTĐ sau Các loại ĐTĐ khác: gồm ĐTĐ người trẻ khởi phát tuổi trưởng thành (MODY); bệnh tụy ngoại tiết; bệnh nội tiết bệnh to cực, Cushing; nhiễm siêu vi gây tổn thương tụy [5] 1.1.4 Dịch tễ Theo thống kê Hiệp hội ĐTĐ giới (International Diabetes Federation IDF) năm 2013, 5,38 % dân số giới (382 triệu người) mắc bệnh ĐTĐ [49] Ở Việt Nam, ước tính WHO cho thấy năm 2008 có khoảng 17000 người chết biến chứng bệnh ĐTĐ 20 năm trước số người mắc ĐTĐ chiếm - 2% dân số thành phố lớn Hà Nội, Huế Hồ Chí Minh, đến năm 2002, tỷ lệ mắc bệnh tăng lên - 5% dân số Số liệu gần thành phố Hồ Chí Minh cho thấy năm 2008 có gần 7% dân số độ tuổi 30 - 69 bị bệnh ĐTĐ [52] 6 1.1.5 Chẩn đoán Theo hiệp hội ĐTĐ Hoa Kỳ 2011, bệnh nhân chẩn đốn ĐTĐ đáp ứng tiêu chuẩn sau [18]: - Đường huyết lúc đói (8 khơng ăn) ≥ 126 mg/dL lần đo khác - Đường huyết sau ăn (2 giờ) ≥ 200 mg/dL (đường huyết sau uống 75 g glucose) - Đường huyết (ngẫu nhiên) ≥ 200 mg/dL - HbA c (hemoglobin gắn glucose) ≥ 6,5% R R 1.1.6 Thuốc điều trị đái tháo đường Ba nhóm chính: insulin, thuốc trị ĐTĐ đường uống dược liệu truyền thống 1.1.6.1 Trị liệu với insulin Insulin: hormon tế bào β đảo Langerhans tụy tiết dạng proinsulin - Cơ chế tác động Insulin liên kết với receptor glycoprotein đặc hiệu màng tế bào có hoạt tính tyrosin kinase làm phát sinh dịng thác phosphoryl hóa protein, phát sinh chất trung gian insulin tín hiệu khác làm hoạt hóa ức chế enzym sở cho tác động chuyển hóa glucid, lipid protid - Phân loại + Theo nguồn gốc Insulin “human” sản phẩm tái tổ hợp gen ADN mã hóa cho insulin biến nạp vào plasmid E coli tế bào vi khuẩn tổng hợp sản phẩm tương tự insulin người Insulin có nguồn gốc từ động vật, chiết xuất từ tụy tạng bị heo, sau tinh chế Nó khác với insulin người từ đến acid amin Sự khác biệt gây dị ứng cho bệnh nhân + Theo thời gian tác động Loại tác dụng nhanh: Aspart, Lispro, Glulisin Loại tác dụng ngắn: Regular Loại tác dụng trung bình: NPH (Neutral Protamin Hagedorn) Loại tác dụng dài: Detemir, Glargin - Chỉ định Điều trị insulin định bắt buộc bệnh nhân ĐTĐ týp bệnh nhân ĐTĐ týp không đáp ứng với chế độ ăn thuốc hạ glucose huyết đường uống Dùng cho bệnh nhân ĐTĐ cắt tụy - Tác dụng phụ, độc tính + Hạ đường huyết tác dụng phụ thường thấy Mức độ thay đổi tùy liều dùng, cách tiêm loại chế phẩm + Dị ứng với insulin kháng insulin: Ban đỏ, ngứa, sốc phản vệ Sự kháng insulin kháng thể IgG Sự dị ứng insulin thường xảy dùng insulin từ súc vật Trong trường hợp ta thay insulin người (human insulin) insulin súc vật tinh khiết hóa cao + Teo mơ mỡ phì đại mơ mỡ nơi tiêm chích [5], [7] 1.1.6.2 Thuốc hạ glucose huyết đường uống - Nhóm sulfonylurea + Cơ chế tác động Sulfonylurea kích thích tiết insulin từ tế bào β tuyến tụy cách gắn với thụ thể -SH gây đóng kênh kali ATP mở kênh calci - có tác dụng kích thích tiết insulin Ngồi ra, sulfonylurea cịn tăng tính nhạy cảm mô ngoại biên với insulin ức chế nhẹ tiết glucagon + Chế phẩm Thế hệ đầu tiên: Tolbutamid, Acetohexamid, Tolazamid Chlorpropamid Thế hệ thứ hai: Glyburid (Glibenclamid), Glipizid, Gliclazid Glimepirid + Chỉ định Sulfonylurea dùng để kiểm soát glucose huyết bệnh nhân ĐTĐ týp khơng kiểm sốt chế độ ăn luyện tập thể lực Những thuốc sử dụng kết hợp với biguanid, kết hợp với insulin + Tác dụng phụ, độc tính Hạ đường huyết Biến chứng bệnh tim mạch Tác dụng phụ khác: sẩn da, buồn nơn, ói mửa, vàng da ứ mật, bạch cầu hạt, thiếu máu tiêu huyết bất sản, đặc biệt Chlorpropamid giữ nước tăng cường tác động ADH ống thu thận [7] 8 - Nhóm meglitinid + Cơ chế tác động Chúng tác động lên thụ thể với sulfonylurea vị trí gắn khác Meglitinid làm hạ nhanh chóng glucose huyết kích thích tuyến tụy tiết insulin + Chế phẩm Repaglinid (prandin), Nateglinid (starlix) + Tác dụng phụ, độc tính Hạ đường huyết, nhiễm trùng hô hấp, viêm mũi, viêm phế quản, nhức đầu, buồn nơn, tiêu chảy, chống váng, chóng mặt [5], [7] - Nhóm biguanid + Cơ chế tác động Metformin làm gia tăng hoạt tính insulin tế bào ngoại biên ức chế hấp thu glucose ruột, tăng sử dụng glucose mô ngoại biên giảm sản xuất glucose gan ức chế trình tân tạo glucose Metformin khơng kích thích tiết insulin mà tăng khả dùng insulin + Chế phẩm Buformin, Metformin + Chỉ định điều trị Metformin sử dụng đơn trị kết hợp với thuốc nhóm sulfonylurea để cải thiện kiểm soát glucose huyết lipid huyết bệnh nhân đáp ứng với điều chỉnh chế độ ăn sử dụng đơn trị sulfonylurea + Tác dụng phụ, độc tính Nhiễm acid lactic, rõ với phenformin Dùng lâu dài gây chán ăn, sụt cân, đắng miệng, miệng có vị kim loại, buồn nơn, tiêu chảy [5] - Nhóm glitazon (Thiazilidinedion-TZD) + Cơ chế tác động Những TZD đối kháng chọn lọc với receptor phân tử PPARγ (Peroxisome Proliferator Activated Receptor) Nhóm làm tăng nhạy cảm mô insulin gan, tế bào mô mỡ Chúng giảm tân tạo glucose gan 9 + Chế phẩm Rosiglitazon, Pioglitazon, Troglitazon + Chỉ định điều trị Trị ĐTĐ týp kháng insulin + Tác dụng phụ, độc tính Tăng cân, phù, tăng thể tích huyết tương, nguy gãy xương phụ nữ sau mãn kinh [7] - Nhóm ức chế α-glucosidase + Cơ chế tác động Những thuốc làm giảm hấp thu ruột chất tinh bột, dextrin, disaccharid cách ức chế hoạt tính α-glucosidase rìa tế bào bàn chải ruột Sự ức chế enzym làm chậm trình hấp thu glucid nên làm chậm tăng glucose huyết sau bữa ăn cá thể bình thường bệnh nhân ĐTĐ Vai trị α-glucosidase q trình hình thành glucose thể (Hình 1.1.) Tinh bột Saccharose (Glucose + Fructose) Amylase Maltose (Glucose + Glucose) α-glucosidase Glucose Glucose Glucose Fructose Glucose huyết tăng Hình 1.1 Sơ đồ vai trị α-glucosidase q trình hình thành glucose 10 Dưới tác dụng α-amylase, tinh bột bị thủy phân thành maltose Sau tác dụng α-glucosidase, đường maltose tiếp tục bị thủy phân thành đường glucose Ngoài hấp thu tinh bột, thể hấp thu saccharose Dưới tác dụng α-glucosidase, đường saccharose bị thủy phân thành đường glucose đường fructose Một cách làm hạn chế lượng glucose tăng lên máu ức chế hoạt động α-glucosidase làm cho trình thủy phân maltose saccharose diễn chậm Vì hàm lượng glucose khơng tăng mạnh sau ăn + Chế phẩm Acarbose, Miglitol + Chỉ định điều trị Thuốc có tác dụng với bữa ăn có carbohydrat phức tạp, nhiều chất xơ, glucose, sucrose + Tác dụng phụ, độc tính Sinh ruột, chậm tiêu, tiêu chảy [7] - Nhóm hormon incretin Là hormon tiết biểu mô ruột non Khi nồng độ glucose ống tiêu hóa tăng, hormon tiết ra, vào máu đến tụy tạng kích thích tiết insulin Có loại: Glucose-dependent Insulinotropic Peptid (GIP) Glucagon-Like Peptid-1 (GLP-1) (exenatid) tác dụng kích thích insulin cịn làm giảm tiết glucagon [7] - Nhóm ức chế DPP-4 (Dipeptidyl peptidase-4): Sitagliptin, Saxagliptin… Ngăn phân hủy nhanh hormon GLP-1 Các chất ức chế DPP-4 dùng đường uống chất hormon incretin phải dùng đường tiêm [7] 1.1.6.3 Dược liệu truyền thống Việc sử dụng phương thuốc có nguồn gốc thiên nhiên ngày mở rộng, đặc biệt quốc gia châu Á Hiệu điều trị loại thảo dược y học đại nghiên cứu chứng minh 11 Bảng 1.2 Một số dược liệu truyền thống sử dụng điều trị ĐTĐ [31], [43] TÊN KHOA HỌC TÊN VIỆT NAM Allium sativum Tỏi Anacardium occidentale Đào lộn hột, Điều Azadirachta indica Sầu đâu hoa trắng Eucalyptus globulus Khuynh diệp Ficus racemosa Sung Momordica charantia Khổ qua, Mướp đắng Scoparia dulcis Cam thảo nam Smilax glabra Thổ phục linh Syzygium cuminii Vối rừng Taraxacum officinale Bồ công anh Trigonella foenum-graecum Hồ lô ba Vinca rosea Dừa cạn Có 1200 lồi thực vật đại diện cho 725 chi thuộc 183 họ từ tảo, nấm thực vật bậc cao sử dụng nhân gian thực nghiệm để điều trị triệu chứng ĐTĐ Kết cho thấy 81% loài thực vật dùng để hạ đường huyết sử dụng dân gian 47% loài chưa sử dụng thực nghiệm chứng minh cho kết tốt điều trị ĐTĐ [31] 1.2 TỔNG QUAN VỀ DƯỢC LIỆU 1.2.1 Mướp đắng rừng Vị trí phân loại Mướp đắng rừng [2], [4] Ngành: Ngọc lan (Magnoliophyta) Lớp: Ngọc lan (Magnoliopsida) Bộ: Bầu bí (Cucurbitales) Họ: Bầu bí (Cucurbitaceae) Chi: Mướp đắng (Momordica) Lồi: Momordica charantia L Thứ: Momordica charantia L var abbreviata Ser