HƯỚNG DẪN PHÂN TÍCH MẪU NGOẠI KIỂM VI SINH ĐỢT 04- NĂM 2021 (Hướng dẫn phân tích cập nhật qua đợt ngoại kiểm) Để kết ngoại kiểm xác, đề nghị khoa/phịng xét nghiệm (PXN) đọc kĩ thực theo hướng dẫn sau: Nhận mẫu: Kiểm tra thơng tin, tình trạng mẫu ngoại kiểm nhận mẫu Nội dung kiểm tra gồm: − Thùng vận chuyển mẫu đảm bảo nguyên vẹn, không bị nứt vỡ − Điều kiện vận chuyển mẫu < 25oC − Thông tin ống mẫu, tiêu ngoại kiểm phải rõ ràng − Bộ mẫu ngoại kiểm bao gồm: 02 lam kính có phết mẫu vi khuẩn, lam kính có mã 2021-4A, lam kính có mã 2021-4B 02 ống mẫu để định danh vi khuẩn, ống có mã 2021-4C, ống có mã 2021-4D 02 ống mẫu để xác định tính nhạy cảm với kháng sinh vi khuẩn, ống có mã 2021-4E, ống có mã 2021-4F − Tính tồn vẹn mẫu: tiêu khơng bị nứt vỡ, ống mẫu không bị bật nắp, nứt vỡ − PXN đưa nhận định trực quan mẫu ngoại kiểm vi sinh nhận được, thấy dấu hiệu bất thường ngồi tính tồn vẹn mẫu, PXN thực đánh giá biên giao nhận mẫu vui lòng gọi điện trực tiếp tới điện thoại chương trình − Nếu có vấn đề tính tồn vẹn mẫu, PXN vui lòng chụp ảnh xác nhận, liên hệ trực tiếp qua điện thoại gửi email (kèm theo hình ảnh mẫu ngoại kiểm chụp) chương trình để Trung tâm làm gửi lại mẫu Thông tin liên hệ xem mục Hướng dẫn Các mẫu Trung tâm xác nhận hủy bỏ, PXN cần xử lý mẫu bệnh phẩm lây nhiễm theo quy định an toàn sinh học Trang 1/4 Bảo quản: Mẫu tiêu bảo quản nhiệt độ phịng khơ thống Mẫu định danh kháng sinh đồ bảo quản nhiệt độ lạnh (2-8 oC) Việc bảo quản mẫu ngoại kiểm khơng điều kiện khuyến cáo gây ảnh hưởng đến chất lượng mẫu ngoại kiểm Không mở nắp ống mẫu ngoại kiểm PXN thực phân tích Chuẩn bị mẫu phân tích: Nhuộm Gram: tiêu cố định, PXN tiến hành nhuộm Gram theo quy trình mà PXN sử dụng Hướng dẫn hồn ngun chủng vi khuẩn đơng khơ: Hồn ngun mẫu với ml nước cất vơ trùng, để tan hồn tồn từ 10-15 phút, đảm bảo thao tác vơ trùng Ngay sau đó, lấy 100 µl từ dung dịch hồn ngun cấy chuyển mơi trường điều kiện khí trường phù hợp Mẫu khơng đảm bảo độ ổn định để mẫu hoàn nguyên sau 60 phút Thực cấy chuyển lần trước phân tích mẫu Định danh vi khuẩn: + Thông tin mẫu 2021-4C: Vi khuẩn phân lập từ nước tiểu phụ nữ mang thai tuần 36 + Thông tin mẫu 2021-4D: Thông tin lâm sàng: vi khuẩn thu thập từ mẫu đờm bệnh nhân sốt cao, ho nhiều + Yêu cầu: PXN sử dụng kỹ thuật áp dụng PXN để định danh loài vi khuẩn mẫu ngoại kiểm - Kháng sinh đồ: Tiến hành cấy chuyển vi khuẩn sang thạch máu, ủ 36 ± độ C 18 – 24 Các chủng đông khô cần cấy chuyển lần trước thực kháng sinh đồ Sau đó, sử dụng kỹ thuật kháng sinh đồ thực PXN để xác định Trang 2/4 Tên vi khuẩn Loại kháng sinh PXN Mã mẫu: 2021-4E Nồng độ Mã mẫu: 2021-4F Nồng độ (Klebsiella khoanh kháng (Shigella flexneri) khoanh kháng pneumoniae) sinh sinh Amoxicillin / 20/10 µg Ampicillin 10 µg clavulanic acid Trimethoprim / 1.25/23.75 µg Cefepime 30 µg Sulfamethoxazole Ciprofloxacin µg Ciprofloxacin µg Meropenem 10 µg Tetracycline 30 µg Piperacillin100/10 µg Ceftazidime 30 µg tazobactam Tất việc thực phân tích mẫu ngoại kiểm PXN phải lưu hồ sơ (chụp ảnh, tờ in kết từ máy) làm chứng để kiểm tra yêu cầu Báo cáo kết quả: Các PXN gửi kết Trung tâm Kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm y học trước 17h ngày 23/11/2021 Khoa/PXN truy cập địa chỉ: eqa.qcc.edu.vn/ Tại giao diện đăng nhập PXN nhập tài khoản mật khoa phịng xét nghiệm Kích chọn đăng nhập PXN kích chọn theo thứ tự 1, 2, hình để nhập kết quả: Trang 3/4 Lưu ý: Nhuộm Gram: Khoa/PXN báo cáo kết cho tiêu nhuộm Gram Chỉ báo cáo kết cho tiêu nằm vịng trịn màu đen, khơng báo cáo kết cho tiêu nằm vòng màu hồng (chứng Gram dương) vòng tròn màu xanh (chứng Gram âm) Định danh: PXN báo cáo kết cho ống định danh theo tên khoa học loài vi khuẩn phân lập nêu rõ kỹ thuật định danh sử dụng Kháng sinh đồ: PXN báo cáo kết kháng sinh đồ hai phương pháp: phương pháp kháng sinh khuếch tán Kirby-Bauer phương pháp xác định nồng độ ức chế tối thiểu MIC PXN phiên giải kết kháng sinh đồ theo tiêu chuẩn CLSI, cập nhật năm 2021 Tất mẫu ngoại kiểm TTKC kiểm tra độ đồng độ ổn định, PXN báo cáo kết cho mã mẫu ngoại kiểm An toàn sinh học: Khi tiến hành phân tích, xử lý huỷ bỏ mẫu, PXN cần tuân thủ quy tắc, hướng dẫn đảm bảo an toàn sinh học tương tự mẫu bệnh phẩm lây nhiễm Thơng tin liên hệ: Phịng xét nghiệm kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm Vi sinh- Ký sinh trùng Trung tâm Kiểm chuẩn chất lượng xét nghiệm y học- Trường Đại học Y Hà Nội Địa chỉ: Số 1, Tôn Thất Tùng, Đống Đa, Hà Nội Điện thoại: 02435.747.248/nhánh 15 Hotline: 0961.153.709 Email: ngoaikiemvisinh@qcc.edu.vn Trang 4/4 ... lượng mẫu ngoại kiểm Không mở nắp ống mẫu ngoại kiểm PXN thực phân tích Chuẩn bị mẫu phân tích: Nhuộm Gram: tiêu cố định, PXN tiến hành nhuộm Gram theo quy trình mà PXN sử dụng Hướng dẫn hoàn... kết kháng sinh đồ theo tiêu chuẩn CLSI, cập nhật năm 2021 Tất mẫu ngoại kiểm TTKC kiểm tra độ đồng độ ổn định, PXN báo cáo kết cho mã mẫu ngoại kiểm An tồn sinh học: Khi tiến hành phân tích, xử... khí trường phù hợp Mẫu không đảm bảo độ ổn định để mẫu hoàn nguyên sau 60 phút Thực cấy chuyển lần trước phân tích mẫu Định danh vi khuẩn: + Thông tin mẫu 2021-4C: Vi khuẩn phân lập từ nước tiểu