Trong nghiên cứu này, sử dụng nguyên liêụ lá dứa thơm Pandanus amaryllifolius, sử dụng dung môi trích ly là ethanol 90%, tỉ lệ nguyên liệu/ ethanol là 1/15 (w/v), sử dụng MgCO3 0,5% so với nguyên liệu để giúp tăng khả năng trích ly, trích ly hoàn thành sau 24 giờ trong điều kiện tối, ở nhiệt độ phòng. Kết quả thu được dịch trích ly có lượng chlorophyll 113,49mg/L.
Kỷ yếu hội thảo khoa học – Phân ban Công nghệ thực phẩm TRÍ CH LY VÀ THỬ HOẠT TÍ NH KHÁNG OXY HÓA CỦ A CHLOROPHYLL TỪ LÁ DỨA THƠM PANDANUS AMARYLLIFOLIUS Lê Nguyễn Thủy Tiên1, Trần Chí Hải1, Nguyễn Thị Hải Hòa1, Hoàng Thi Ngo ̣ ̣c Nhơn1,* Khoa Công nghệ Thực Phẩm, Trường Đại học Công nghiệp Thực Phẩm Tp Hồ Chí Minh * Email: nhonhtn@cntp.edu.vn Ngày nhận bài: 15/06/2017; Ngày chấp nhận đăng: 02/07/2017 TÓM TẮT Từ nửa sau kỷ XIX, mô ̣t nghiên cứu sơ lươ ̣c về hoa ̣t tính sinh ho ̣c và khả loa ̣i bỏ mùi của chlorophyll đươ ̣c báo cáo, có nhiều nghiên cứu khảo sát đánh giá phương pháp tách chiết chlorophyll từ nhiều nguồn khác tự nhiên Trong nghiên cứu này, chúng sử du ̣ng nguyên liê ̣u dứa thơm Pandanus amaryllifolius, sử du ̣ng dung môi trić h ly là ethanol 90%, tỉ lệ nguyên liệu/ ethanol 1/15 (w/v), sử dụng MgCO3 0,5% so với nguyên liệu để giúp tăng khả trích ly, trích ly hồn thành sau 24 điều kiện tối, nhiệt độ phòng Kết thu dịch trích ly có lượng chlorophyll 113,49mg/L Hoa ̣t tính kháng oxy hóa của dich ̣ trić h chlorophyll từ Pandanus amaryllifolius theo DPPH là: 531,33μg/mL Từ khóa: Chlorophyll, ethanol, MgCO3, Pandanus amaryllifolius MỞ ĐẦU Chlorophyll phân tử sinh học đóng vai trị quan trọng trình quang hợp thực vật phù du (phytoplankton) sinh vật tự dưỡng (autotrophic) Lượng chlorophyll có tế bào phụ thuộc vào lượng sinh khối [1] Tạo thành thông qua đường trao đổi chất, chlorophyll có cấu trúc giống sắc tố porphyrin khác Tại trung tâm chlorophyll ion Mg2+ tạo nên cấu trúc dạng heme gần giống với hemoglobin máu người [2, 3] Năm 1940, Hans Fischer tìm cấu trúc tổng quát chlorophyll, sau cấu trúc lập thể chlorophyll a b từ từ sáng tỏ Ở vị trí C3, loại a chứa nhóm methyl –CH3 cịn loại b chứa nhóm formyl –CHO[4] Chất màu tổng hợp phát triển mạnh mẽ nhiều quốc gia giới với ứng dụng tiện ích khác Tuy nhiên, thời gian gần chúng ý nhiều khía cạnh an tồn sức khỏe người tiêu dùng Một số chất màu tổng hợp hạn chế cấm sử dụng số quốc gia Chất nhuộm màu tím (E123) bị cấm Mỹ, Na Uy nhiều quốc gia khác Màu vàng tartrazine (E102) biết nguyên nhân gây phản ứng phụ bất lợi bệnh hen 48 Lê Nguyễn Thủy Tiên, Trần Chí Hải, Nguyễn Thị Hải Hịa, Hồng Thị Ngọc Nhơn suyễn viêm mũi nên hạn chế sử dụng [5]… Vì lý này, sắc tố màu tự nhiên quan tâm, sắc tố chlorophyll Sắc tố màu tự nhiên chlorophyll thêm vào sản phẩm bánh kẹo, nước giải khát, nước sốt,… vừa làm tăng giá trị nguyên liệu, vừa cung cấp lượng bột màu an toàn cho sức khỏe, tạo sản phẩm gần gũi với người tiêu dùng [6] Ngoài chlorophyll ứng dụng nhiều lĩnh vực y học Chlorophyll dẫn xuất hợp chất quan trọng sử dụng phổ biến sản phẩm dược phẩm, chúng làm tăng nhanh khả chữa lành vết thương đến 25% số nghiên cứu, chlorophyll thúc đẩy hình thành mơ tế bào, ngăn ngừa xâm nhập vi sinh vật [7],[8],[9] Đồng thời ức chế tích lũy canxi oxalat dihydrate (còn gọi sỏi thận) [10], giải độc gan, ruột, lọc máu độc tố… [11] Lá dứa thơm nguyên liệu tự nhiên, rẻ tiền, trồng phổ biến Việt Nam Lá dứa thơm lành, không gây độc hại cho sức khỏe người nên từ lâu dùng nhiều lĩnh vực cơng nghiệp, ẩm thực… Nhóm tác giả Đào Hùng Cường xác định thành phần hóa học dứa thơm [12], nhóm tác giả Lê Thị Ngọc Anh, Huỳnh Ngọc Trinh khảo sát tác động hạ glucose huyết độc tính cấp chlorophyll [13] Với điểm mạnh màu, mùi dược chất, dứa thơm nhân tố tiềm tàng đóng góp vào lĩnh vực cơng nghệ thực phẩm theo hướng tự nhiện an tồn cho sức khỏe Mặt khác, theo khảo sát ban đầu dứa chứa lượng chlorophyll cao Vì vậy, việc nghiên cứu tận dụng nguồn nguyên liệu dồi có sẵn từ tự nhiên không qua nhập để sản xuất bột màu xanh chlorophyll tự nhiên thay cho màu thực phẩm nhập ngoại hay màu tổng hợp vấn đề thực cần thiết, có ý nghĩa khoa học, có giá trị kinh tế, thực tiễn tính xã hội sâu sắc NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu Lá dứa thơm Pandanus amaryllifolius dạng tươi, màu xanh sẫm mua chợ Sơn Kỳ (phường Sơn Kỳ, quận Tân Phú, TP.HCM) Tại phòng thí nghiệm, dứa tươi rửa để loại bỏ tạp chất, để nước, xay nhỏ, đóng gói túi nilon tối màu tránh ánh sáng bảo quản nhiệt độ (5oC) Các dung môi tách chiết (ethanol, methanol, acetone) MgCO3 dạng hóa chất phân tích thương phẩm sử dụng nghiên cứu 2.2 Phương pháp tách chiết chlorophyll Tiến hành khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến hàm lượng chlorophyll: Loại dung môi (ethanol, methanol, acetone), nồng độ dung môi (60%, 70%, 80%, 90%, 99,5%), tỉ lệ chất/dung môi (1/5, 1/10, 1/15, 1/20, 1/25), thời gian ủ (8h, 12h, 24h, 36h, 48h), hàm lượng MgCO3 (0%, 0,1%, 0,5%, 1%, 5%) Khảo sát yếu tố, với lượng mẫu cố định ban đầu 5g dứa, kết khảo sát yếu tốcho lượng chlorophyll sau trích ly cao sử dụng thí nghiệm Tất thí nghiệm lặp lại ba lần Cân 5g dứa nguyên liệu cho vào bình tam giác, bổ sung MgCO3, cho dung mơi với nồng độ tỉ lệ chất/dung môi theo khảo sát Dung dịch thí nghiệm ủ trích ly điều kiện tránh 49 Trích ly thử hoạt tính chống oxy hóa chlorophyll từ dứa thơm Pandanus amaryllifolius ánh sáng, nhiệt độ phịng Sau đó, tiến hành ly tâm dịch trích (5500 vịng 15 phút), loại bỏ bã, thu phần dịch để xác định lượng chlorophyll 2.3 Phương pháp phân tích 2.3.1 Xác định lượng chlorophyll phương pháp đo quang phổ Đối với dung môi methanol, mẫu đo độ hấ p thu bước sóng 653nm 666nm Mẫu trắng (blank) mẫu chứa dung môi nồng độ tương ứng Nồng độ chlorophyll tính theo cơng thức [14] C = 15,65𝐴666 – 7,34𝐴653 (mg/L) Đối với dung môi acetone, mẫu đo độ hấ p thu bước sóng 664nm, 647nm, 630nm Mẫu trắng (blank) mẫu chứa dung môi nồng độ tương ứng Nồng độ chlorophyll tính theo cơng thức [15] C = 11,85𝐴664 – 1,54𝐴647 – 0,08𝐴630 (mg/L) Đối với dung môi ethanol, mẫu đo độ hấ p thu bước sóng 630nm, 645nm, 663nm Mẫu trắng (blank) mẫu chứa dung môi nồng độ tương ứng Nồng độ chlorophyll tính theo cơng thức [16] C = 11,64𝐴663 – 2,16𝐴645 – 0,1𝐴630 (mg/L) 2.3.2 Phương pháp thử hoạt tính kháng oxy hóa Khả khử gốc tự DPPH xác định theo phương pháp Fu Shieh [17] với vài hiệu chỉnh nhỏ Cụ thể sau: Khoảng 20-140µL dịch chiết pha lỗng đến nồng độ thích hợp trộn với nước cất để đạt thể tích tổng cộng 3ml Sau thêm 1ml dung dịch DPPH 0,2mM, lắc để yên bóng tối 30 phút Độ hấp thu quang học đo bước sóng 517nm Khả khử gốc tự DPPH xác định theo công thức sau [17]: DPPH (%) = 100 × (ACT - ASP)/ACT Trong đó: ACT: Độ hấp thu quang học mẫu trắng không chứa dịch chiết, ASP: Độ hấp thu quang học mẫu có chứa dịch chiết Kết báo cáo giá trị SC50 nồng độ dịch chiết khử 50% gốc tự DPPH điều kiện xác định Giá trị SC50 thấp hoạt tính khử gốc tự DPPH cao 2.4 Phương pháp xử lý số liệu Các thí nghiệm tiến hành lặp lại lần, kết trình bày giá trị trung bình ±SD Sử dụng phần mềm SPSS 22.0 Microsoft Excel 2010 để phân tích thống kê số liệu thí nghiệm đánh giá khác biệt mẫu 50 Lê Nguyễn Thủy Tiên, Trần Chí Hải, Nguyễn Thị Hải Hịa, Hồng Thị Ngọc Nhơn KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 Kết khảo sát dung mơi trích ly 3.1.1 Ảnh hưởng loại dung môi đến hàm lượng chlorophyll thu sau trình tách chiết Bảng Ảnh hưởng loại dung môi đến hàm lượng chlorophyll thu sau q trình tách chiết Dung mơi Hàm lượng Chl-tổng (mg/L) Ethanol 93,7 ± 0,4a Methanol 104,4 ± 0,2b Acetone 127,7 ± 0,4c Các chữ khác cột thể khác biệt mặt thống kê p < 0,05 Căn theo kết trình bày bảng 1, chúng tơi nhận thấy có khác biệt lượng chlorophyll tổng nhận trích loại dung mơi, nhiên, khác biệt không lớn Khi tách chiết acetone, lượng chlorophyll tổng nhận cao (127,7mg/L) đến methanol (104,4mg/L) thấp dung môi ethanol (93,7mg/L) Kết tương tự công bố R J Ritchie [18], dung môi acetone cho hiệu suất thu nhận chlorophyll từ su ổi Xylocarpus granatum, tương đối cao so với methanol ethanol, công bố R Stauffer M A Costache đồng tình với quan điểm [19],[20] Mặc dù hiệu suất trích ly chlorophyll acetone cao ethanol lý an tồn khả ứng dụng sản xuất công nghiệp nên ethanol dung mơi lựa chọn cho thí nghiệm 3.1.2 Ảnh hưởng nồng độ dung mơi đến hàm lượng chlorophyll thu sau q trình tách chiết Từ kết bảng nhận thấy nồng độ ethanol ảnh hưởng lớn đến lượng chlorophyll, hàm lượng chlorophyll tăng tỉ lệ thuận với việc tăng nồng độ dung môi Nồng độ ethanol 99,5% cho kết trích ly chlorophyll cao (90,9 mg/L) Tuy nhiên, ethanol 90% cho kết hàm lượng thu 90,9 mg/L, khơng có khác biệt mặt thống kê so với ethanol 99,5% xét mặt kinh tế cồn tuyệt đối có giá thành cao nên ethanol 90% lựa chọn cho thí nghiệm Kết tương tự với công bố Sartory [21], Kaczmar đối tượng thực vật phù du [16] Bảng Ảnh hưởng nồng độ dung môi đến hàm lượng chlorophyll thu sau trình tách chiết Nồng độ Hàm lượng Chl-tổng (mg/L) 60% 15,6 ± 0,3a 70% 45,6 ± 0,2b 80% 74,5 ± 0,4c 90% 90,4 ± 0,3d 99,5% 90,9 ± 0,1d Các chữ khác cột thể khác biệt mặt thống kê p < 0,05 51 Trích ly thử hoạt tính chống oxy hóa chlorophyll từ dứa thơm Pandanus amaryllifolius 3.1.3 Ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu/dung môi đến hàm lượng chlorophyll thu sau trình tách chiết Bảng Ảnh hưởng tỉ lệ nguyên liệu/dung môi đến hàm lượng chlorophyll thu sau trình tách chiết Tỉ lệ Hàm lượng Chl-tổng (mg/L) 1:5 620,6 ± 0,4a 1:10 821,4 ± 6,4b 1:15 980,9 ± 14,8c 1:20 745,4 ± 39,7d 1:25 665,3 ± 11,9e Các chữ khác cột thể khác biệt mặt thống kê p < 0,05 Kết thí nghiệm trình bày bảng 3, rõ ràng, tăng tỉ lệ nguyên liệu/ dung mơi lượng chlorophyll tổng tăng dần, đạt giá trị cao tỉ lệ 1/15 sau giảm dần tiếp tục tăng khối lượng dung môi với tỉ lệ 1/20 1/25 Cụ thể, lượng chlorophyll tổng tăng từ 620,6mg (tỉ lệ 1/5) lên 821,4mg (tỉ lệ 1/10), đạt đến 980,9mg (tỉ lệ 1/15) giảm 745,4mg (tỉ lệ 1/20), 665,3 mg (tỉ lệ 1/25) Lượng chlorophyll thu cao tỉ lệ 1/15 (890,875mg) Nguyên nhân chênh lệch gradient nồng độ cấu tử cần trích ly nguyên liệu dung môi Với khối lượng nguyên liệu, tăng lượng dung mơi sử dụng hiệu suất trích ly tăng Tuy nhiên, lượng cholorophyll mẫu trích hết, lượng dung mơi cịn dư làm lỗng mẫu Trong thí nghiệm này, chọn tỉ lệ nguyên liệu/dung môi 1/15 (w/v) để sử dụng thí nghiệm 3.2 Kết khảo sát thời gian ủ (trích ly) Thời gian trích ly yếu tố quan trọng, ảnh hưởng đến hiệu suất, chất lượng dịch trích Kết hình cho thấy thời gian trích ly lâu lượng chlorophyll tăng, song thời gian chiết lâu không mang lại hiệu Trong khoảng thời gian thử nghiệm, lượng chlorophyll thu tăng dần từ (91,155mg/L) đến 12 (104,31mg/L), đạt cao 24 (110,46mg/L) giảm dần tiếp tục tăng thời gian lên 36 (106,89mg/L) 48 (106,35mg/L) Do sử dụng phương pháp ngâm chiết nên điều kiện chiết tách chlorophyll thời gian ngắn không đủ để dung môi xâm nhập vào tế bào, trích ly ngồi chlorophyll lượng chlorophyll thu thấp, hiệu không cao Ngược lại, kéo dài thời gian trích ly, thời gian tiếp xúc nguyên liệu dung môi tăng, làm tăng q trình khuếch tán phân tử chất trích từ nguyên liệu vào dung dịch làm tăng hiệu suất trích ly Khi chênh lệch nồng độ chất trích nguyên liệu dung dịch đạt trạng thái cân bằng, q trình trích ly kết thúc Khi đó, việc kéo dài thời gian không làm tăng lượng chất trích ly 52 Hàm lượng chlorophyll (mg/l) Lê Nguyễn Thủy Tiên, Trần Chí Hải, Nguyễn Thị Hải Hịa, Hồng Thị Ngọc Nhơn 120 100 80 60 40 20 8h 12h 24h 36h 48h Thởi gian ủ (h) Hình Ảnh hưởng thời gian ủ đến lượng chloropyll trích ly Ngồi ra, kéo dài thời gian, lượng dung môi chiết bay đáng kể, đồng thời dẫn đến chuyển hóa chlorophyll tạo pheophytin đồng phân khác tác động yếu tố không thuận lợi dẫn đến hàm lượng chlorophyll giảm [22] 3.3 Kết khảo sát ảnh hưởng MgCO3 đến lượng chlorophyll thu Hàm lượng chlorophyll (mg/l) 120 115 110 105 100 95 90 85 0% 0.1% 0.5% 1% 5% Hàm lượng MgCO3 sử dụng (%) Hình Ảnh hưởng MgCO3 đến lượng chlorophyll trích ly Kết thí nghiệm trình bày hình Việc bổ sung MgCO3 có ảnh hưởng tích cực đến lượng chlorophyll trích giúp đảm bảo ion Mg2+ ln có dư dịch trích ly, hạn chế trường hợp nhân Mg2+ cấu trúc hóa học chlorophyll Trong thí nghiệm này, tăng lượng MgCO3 bổ sung vào dung dịch trích ly lượng chlorophyll thu tăng dần, đạt giá trị cao lượng MgCO3 0,5% (113,49mg/L) so với khối lượng mẫu, tăng lượng MgCO3 thêm chlorophyll bị acid hóa tạo thành 53 Trích ly thử hoạt tính chống oxy hóa chlorophyll từ dứa thơm Pandanus amaryllifolius phaeophytins, vòng isocyclic chlorophyll bị mở tạo thành rhodochlorin [23], dẫn đến lượng chlorophyll thu có giảm nhẹ Như vậy, lượng MgCO3 0,5% so với khối lượng mẫu chọn để tăng khả trích ly chlorophyll 3.4 Kết thử hoạt tính kháng oxy hóa chlorophyll Nhiều nghiên cứu hàm lượng polyphenol hoạt tính chống oxy hóa có mối tương quan chặt chẽ, nồng độ tăng khả khử gốc tự DPPH tăng [24, 25] Bảng trình bày kết xác định khả khử gốc tự DPPH dịch chiết từ dứa thơm so sánh với chất chống oxy hóa thương mại Trolox Để so sánh khả chống oxy hóa với chất thương mại, người ta dùng số SC50 Giá trị SC50 cao chiết dứa thơm 531,33μg/ml, giá trị Trolox 30,81μg/mL Như vậy, giá trị SC50 cao chiết dứa cao Trolox, hoạt tính chống oxy hóa cao chiết với giá trị SC50 tương đối mạnh Sở dĩ, cao chiết dứa dịch chiết thô, chưa đạt độ tinh khiết cao Trolox chất chống oxy hóa thương mại mạnh thuộc dạng tinh khiết nên hoạt tính chống oxy hóa dịch cao chiết dứa thơm thấp so với Trolox Bảng Kết thử hoạt tính kháng oxy hóa chlorophyll Chỉ tiêu Nồng độ (µg/mL) Kết 2000 81,35 ± 5,17 1000 72,41 ± 1,34 500 44,73 ± 1,24 250 27,19 ± 1,11 125 19,23 ± 0,81 Khả bắt gốc DPPH (%) chlorophyll 531,33 ± 13,64 SC50 (µg/mL) Khả bắt gốc DPPH (%) Trolox 80 93,67 ± 2,09 40 60,00 ± 0,94 20 26,00 ± 2,90 10 14,48 ± 4,13 10,39 ± 2,38 30,81 ± 1,89 SC50 (µg/mL) KẾT LUẬN Qua nghiên cứu, dung mơi trích ly thích hợp để thu nhận chlorophyll từ dứa thơm Pandanus amaryllifolius ethanol 90% xét phương diện an toàn thực phẩm Tỷ lệ chất/dung mơi thích 54 Lê Nguyễn Thủy Tiên, Trần Chí Hải, Nguyễn Thị Hải Hịa, Hồng Thị Ngọc Nhơn hợp 1/15 (w/v) Lượng MgCO3 thích hợp bổ sung vào dung dịch trích 0,5% so với khối lượng mẫu, trích ly 24 nhiệt độ phịng Hoa ̣t tiń h kháng oxy hóa của dich ̣ trích chlorophyll từ Pandanus amaryllifolius theo DPPH là: 531,33μg/mL Cần tối ưu hóa q trình trích ly nhằm tìm thơng số thích hợp để đạt hàm lượng cao nhất, khảo sát yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính chống oxy hóa chlorophyll, kiểm tra hoạt tính chống oxy hóa chế phẩm chlorophyll, xác định tiêu bột màu chlorophyll sau sấy phun, khảo sát trạng thái, tính chấ t chế phẩm ứng dụng vào số sản phẩm thực phẩm: kem tươi, mì sợi, nước giải khát… TÀI LIỆU THAM KHẢO WasmundN., Topp I., and Schories D., Optimising the storage and extraction of chlorophyll samples, Oceanologia, 48 (2006) Humphrey A -Chlorophyll as a color and functional ingredient, Journal of food science, 69 (2004) 422-425 Scheer H - Chlorophylls and carotenoids, Encyclopedia of Biological Chemistry, (2004) 430437 Scheer H - Chlorophylls and carotenoids,Encyclopedia of Biological Chemistry, (2004) 430437 Walford J -Developments in food colours: Elsevier Applied Science London and New York, (1984) Spears K - Developments in food colourings: the natural alternatives, Trends in Biotechnology, (1988) 283-288 Smith L W and Livingston A E - Wound healing: an experimental study of water soluble chlorophyll derivatives in conjunction with various antibacterial agents,The American Journal of Surgery, 67 (1945) 30-39 Carpenter E B - Clinical experiences with chlorophyll preparations: with particular reference to chronic osteomyelitis and chronic ulcers,The American Journal of Surgery, 77 (1949) 167-171 Horwitz B., Role of chlorophyll in proctology,The American Journal of Surgery, 81 (1951)8184 10 EgnerP A.,Muñoz A., and Kensler T W - Chemoprevention with chlorophyllin in individuals exposed to dietary aflatoxinMutation Research/Fundamental and Molecular Mechanisms of Mutagenesis, 523 (2003) 209-216 11 Ferruzzi M G and Blakeslee J - Digestion, absorption, and cancer preventative activity of dietary chlorophyll derivatives,Nutrition Research, 27 (2007) 1-12 12 Đào Hùng Cường - Nghiên cứu xác định thành phần hóa học dứa thơm huyện Đại Lộc-Quảng Nam, Tạp chí khoa học cơng nghệ, Đại học Đà Nẵng, 36 (1) (2010) 13 Lê Thị Ngọc Anh,Trinh H N - Khảo sát tác động hạ glucose huyết độc tính cấp dứa thơm (Pandanus amaryllifolius),Tạp chí Dược học, 55 (2015) 50-53 55 Trích ly thử hoạt tính chống oxy hóa chlorophyll từ dứa thơm Pandanus amaryllifolius 14 Lichtenthaler H K.and Wellburn A R - Determinations of total carotenoids and chlorophylls a and b of leaf extracts in different solvents, Portland Press Limited (1983) 15 Jeffrey S t and Humphrey G - New spectrophotometric equations for determining chlorophylls a, b, c1 and c2 in higher plants, algae and natural phytoplankton,Biochem Physiol Pflanz BPP, (2005) 16 Kaczmar - Phytoplankon pigments, (2004) 17 Fu H Y., Shieh D E., and Ho C T - Antioxidant and free radical scavenging activities of edible mushrooms,Journal of food lipids, (2002) 35-43 18 Ritchie R J.- Consistent sets of spectrophotometric chlorophyll equations for acetone, methanol and ethanol solvents,Photosynthesis research, 89 (2006) 27-41 19 StaufferR., Lee G., and Armstrong D E - Estimating chlorophyll extraction biases, Journal of the Fisheries Board of Canada, 36 (1979) 152-157 20 CostacheM A., Campeanu G., and Neata G - Studies concerning the extraction of chlorophyll and total carotenoids from vegetables,Romanian Biotechnological Letters, 17 (2012) 7703-7708 21 Sartory D and Grobbelaar J - Extraction of chlorophyll a from freshwater phytoplankton for spectrophotometric analysis, Hydrobiologia, 144 (1984) 177-187 22 Mackinney G and Joslyn M - The conversion of chlorophyll to pheophytin,Journal of the American Chemical Society, 62 (1940) 231-232 23 Porra R J - The chequered history of the development and use of simultaneous equations for the accurate determination of chlorophylls a and b,Discoveries in Photosynthesis, ed: Springer, (2005) 633-640 24 Nguyễn Xuân Duy, Đặng Quang Quốc - Hoạt tính chống oxy hóa ức chế enzym tyrosinase nấm linh chi thượng hồng (Phellinus linteus) Việt Nam,Tạp chí Dược học, 56, (2016) 3841 25 Chen H Y.and Yen G C - Antioxidant activity and free radical-scavenging capacity of extracts from guava (Psidium guajava L.) leaves,Food Chemistry, 101 (2007) 686-694 56 Lê Nguyễn Thủy Tiên, Trần Chí Hải, Nguyễn Thị Hải Hịa, Hồng Thị Ngọc Nhơn ABSTRACT ISOLATION AND EVALUATION ANTIOXIDANT ACTIVITY OF CHLOROPHYLL EXTRACT FROM PANDANUS AMARYLLIFOLIUS Le Nguyen Thuy Tien1, Tran Chi Hai1, Nguyen Thi Hai Hoa1, Hoang Thi Ngoc Nhon1,* Faculty of Food Technology, Ho Chi Minh City University of Food Industry * Email: nhonhtn@cntp.edu.vn Since the second half of the last century when chlorophyll extracts were first used for odor removal, an increasing activity of research into the more general area of bioactivity has been reported There are many previous studies on chlorophyll extraction and isolation from natural sources In this study, our material was Pandanus amaryllifolius, and we usedvacuum evaporator to enhaned the content of chlorophyll before spray drying to obtain chlorophyll powder Pandanus amaryllifolius in fresh were extracted with ethanol 90%, the ratio of material/ethanol 1/15, adding MgCO3 0.5% compare with materials to help increase extraction capabilities Extraction was complete after 24 hours in the dark at room Results showed that there was 113.49mg/L chlorophyll in extraction solution Antioxidant avtivities of chlorophyll from Pandanus amaryllifolius in DPPH solution is 531.33μg/mL Keywords: Chlorophyll, ethanol, MgCO3, Pandanus amaryllifolius 57 ... hạ glucose huyết độc tính cấp dứa thơm (Pandanus amaryllifolius) ,Tạp chí Dược học, 55 (2015) 50-53 55 Trích ly thử hoạt tính chống oxy hóa chlorophyll từ dứa thơm Pandanus amaryllifolius 14 Lichtenthaler... thí nghiệm ủ trích ly điều kiện tránh 49 Trích ly thử hoạt tính chống oxy hóa chlorophyll từ dứa thơm Pandanus amaryllifolius ánh sáng, nhiệt độ phịng Sau đó, tiến hành ly tâm dịch trích (5500... tăng lượng MgCO3 thêm chlorophyll bị acid hóa tạo thành 53 Trích ly thử hoạt tính chống oxy hóa chlorophyll từ dứa thơm Pandanus amaryllifolius phaeophytins, vòng isocyclic chlorophyll bị mở tạo