Nghiên cứu thành phần và thử hoạt tính sinh học các hợp chất Cassaine Diterpene Alkaloids từ lá cây Lim xanh Erythrophleum fordii, Việt Nam

ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM DƯƠNG THANH PHƯƠNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN VÀ THỬ HOẠT TÍNH SINH HỌC CÁC HỢP CHẤT CASSAINE DITERPENE ALKALOIDS TỪ LÁ CÂY LIM XANH ERYTHROPHLEUM FORDII, VIỆT NAM Chuyên ngành: HÓA HỮU CƠ Mã số: 60 44 01 14 TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC Đà Nẵng, Năm 2017 Cơng trình hồn thành TRƯỜNG ĐẠI HỌC ĐÀ NẴNG Người hướng dẫn khoa học: TS NGUYỄN MINH HIỀN Phản biện 1: PGS.TS Trần Thị Xô Phản biện 2: TS Trần Mạnh Lục Luận văn bảo vệ trước Hội đồng chấm Luận văn tốt nghiệp thạc sĩ Khoa học họp Đại học Đà Nẵng vào ngày 09 tháng 09 năm 2017 Có thể tìm hiểu luận văn tại:  Trung tâm Thông tin-Học liệu, Đại học Đà Nẵng  Thư viện trường Đại học Bách khoa, Đại học Đà Nẵng MỞ ĐẦU 1.Đặt vấn đề Lim xanh có tên khoa học Erythrophleum fordii, phân bổ chủ yếu Việt Nam, Trung Quốc Đài Loan Trong thuốc dân gian cổ truyền Trung Quốc, lim xanh sử dụng thuốc giúp tăng tuần hoàn máu Lim xanh gỗ lớn, cao 37-45m, đường kính có tới 2-2,5m, thường xanh Gốc có bạnh vè, thân tròn, phân cành nhánh lớn, tán hình ơ, dày, rộng Vỏ màu nâu, bong vảy lớn, non có nhiều bì khổng Lá kép lông chim lần với 3-5 đôi cuống thứ cấp cuống mang 9-15 chét hình trái xoan, đầu nhọn, gốc tròn Là đặc hữu Việt Nam, phân bố đai thấp vùng có lượng mưa 1500-3000 mm/năm, từ Quảng Ninh, Bắc Giang, Phú Thọ, Vĩnh Phúc, Hồ Bình, Thanh Hố, Nghệ An, Quảng Bình, Huế, Quảng Nam tới Bình Thuận Là ưa sáng, lúc non chịu bóng, lớn lên tính ưa sáng rõ thường chiếm tầng rừng Lim xanh ưa đất feralit đỏ vàng, tốt, tầng dày, ẩm mát, tính chất đất rừng, tái sinh dạng rừng có độ tàn che 0,30,7, tái sinh chồi mạnh hạt Sống hỗn giao với Sồi, Giẻ, Trám trắng, au sau, ăng lẻ, Gội, Trâm,… Lim xanh coi giàu tannin, vỏ chứa khoảng 15,21% tannin Gỗ lim có dác lõi phân biệt, dác màu xám nhạt hay vàng nâu; lõi chặt màu xanh vàng sau chuyển màu nâu sẫm, cứng, thuộc loại tứ thiết; loại gỗ tốt Việt Nam Rễ có nốt sần cố định đạm làm tăng độ phì đất Khi bị chết, rễ mục giá thể tốt cho loài nấm, lồi nấm làm thuốc bổ q phát triển Nấm Lim xanh thường dùng để trị: ung thư gan, xơ gan, viêm gan B, viêm gan C, ung thư đại tràng, đau dày, thấp khớp, nóng gan,mụn, suy nhược thần kinh….Ngồi nấm lim xanh làm tăng miễn dịch thể, làm mạnh gan, cô lập diệt tế bào ung thư Trong năm gần việc nghiên cứu hoạt chất có hoạt tinh sinh học lim xanh thu hút quan tâm nhiều nhà khoa học giới Trong lim xanh Erythrophleum fordii có nhiều cassaine diterpenoid amine, amide triterpene Đặc biệt, cassaine alkaloid lim xanh cho thấy hoạt tính tương tự mao địa hoàng (dùng làm thuốc chữa suy tim) Ngồi ra, cho thấy khả gây độc tế bào với số dòng ung thư Vì việc nghiên cứu, phân lập hoạt chất cassaine alkaloid từ Erythrophleum fordii, điều cấp thiết, từ thực tính tốn in-silico, chuyển hố nhóm chức để tăng hoạt tính cassaine alkaloid Xuất phát từ nhu cầu thực tế định chọn đề tài “Nghiên cứu thành phần thử hoạt tính sinh học hợp chất Cassaine Diterpene Alkaloids từ lim xanh Erythrophleum fordii, Việt Nam” Mục tiêu nghiên cứu: - Xây dựng quy trình chiết tách hợp chất hóa học lim xanh - Phân tích định tính định lượng hợp chất cassaine diterpene alkaloid có lim xanh Erythrophleum fordii - Phân lập hợp chất hóa học, xác định thành phần hóa học, cấu trúc số hợp chất hóa học có lim xanh - Bước đầu khảo sát hoạt tính sinh học phân đoạn chiết, cassaine alkaloid phân lập 3 Đối tượng phương pháp nghiên cứu 3.1 Đối tượng Cây lim xanh tỉnh Quảng Nam 3.2 Nguyên liệu Cây lim xanh Quảng Nam Phương pháp nghiên cứu 4.1 Nghiên cứu lý thuyết - Nghiên cứu lim xanh : đặc điểm, phân bố, công dụng - Nghiên cứu diterpene alkaloid - Đánh giá hoạt tính gây độc tế bào ung thư phân đoạn cặn chiết từ lim xanh - Đánh giá khả gây độc tế bào hợp chất Cassaine diterpene alkaloid 4.1 Nghiên cứu thực nghiệm - Khảo sát chiết lim xanh - Phân tích định tính cassaine diterpene alkaloid có dịch chiết - Phân tích định lượng cassaine diterpene alkaloid phương pháp sắc ký lỏng cao áp ghép khối phổ (LC- MS), (LC,MS/MS) - Phân lập số cấu tử, xác định cấu trúc Thử hoạt tính sinh học 4.Dự kiến tiến độ nghiên cứu Tháng 12/2016: Xây dựng đề cương nghiên cứu; - Tháng 01/2017: + Chuẩn bị phần tổng quan tài liệu nghiên cứu; + Chuẩn bị phòng thí nghiệm, dụng cụ, hóa chất, nguyên liêu trang thiết bị cần thiết để thực thí nghiệm; + Xây dựng mơ hình thí nghiệm; -Tháng 02– 06/2017: Tiến hành thí nghiệm theo nội dung nghiên cứu xây dựng; thảo luận, xin ý kiến đạo giáo viên hướng dẫn; - Tháng 07/2017: Xử lý số liệu hoàn chỉnh luận văn; - Tháng 08/2017 : bảo vệ luận văn CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 GIỚI THIỆU VỀ CÂY LIM XANH 1.1.1 Đặc điểm sinh thái 1.1.2 Đặc điểm phân bố 1.1.3 Công dụng Lim xanh 1.2 LỚP CHẤT DITERPENE 1.2.1 Giới thiệu chung 1.2.2 Phân loại diterpene cơng dụng số diterpene điển hình 1.3 CASSAINE DITERPENE ALKALOIDS 1.3.1 Cassaine 1.3.2 Cassaine diterpene alkaloids 1.4 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 1.4.1 Phương pháp chiết 1.4.2 Phương pháp sắc ký mỏng sắc ký cột 1.4.3 Phương pháp sắc ký lỏng cao áp ghép khối phổ (LCMS) CHƯƠNG NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 NGUYÊN LIỆU, DỤNG CỤ VÀ HÓA CHẤT 2.1.1 Nguyên liệu 2.1.2 Thiết bị, dụng cụ, hóa chất 2.2 SƠ ĐỒ NGHIÊN CỨU 2.3 LỰA CHỌN PHÂN ĐOẠN CHIẾT TỐI ƯU 2.3.1 Phương pháp chiết 2.3.2 Khảo sát dung môi chiết với dung môi Methanol 2.3.3 Khảo sát dung môi chiết với dung môi Ethanol/nước 2.4 ĐỊNH TÍNH BẰNG CÁC THUỐC THỬ MÀU TƯƠNG ỨNG 2.4.1 Thuốc thử Mayer 2.4.2 Thuốc thử Wanger 2.4.3 Thuốc thử Dragendoff 2.5 PHƯƠNG PHÁP THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG VI SINH VÂT 2.6 PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ HỢP CHẤT CÓ TRONG CÁC DỊCH CHIẾT 2.7 PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH MỘT SỐ HỢP CHẤT CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC BƯỚC ĐẦU TRONG CÁC PHÂN ĐOẠN CHIẾT TƯƠNG ỨNG 2.7.1 Phương pháp ESI-MS phương pháp LC-MS 2.7.2 Phương pháp sắc ký mỏng 2.7.3 Phương pháp tách tinh chế chất 2.7.4 Chạy cột sắc ký phân đoạn F1 2.7.4 Chạy cột sắc ký phân đoạn F11 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 ĐỊNH TÍNH BẰNG THUỐC THỬ MÀU Bột Lim xanh sau chiết qua dung môi Bột Lim xanh sau chiết qua dung môi : hexane, chloroform, butanol, ethyl acetate thử qua loại thuốc thử : Mayer, Wanger, Dragendroff Qua ba thuốc thử dùng để định tính alkaloids, kết tổng hợp bảng 3.1 Thuốc thử Dung môi Mayer Wanger Dragendorff hexane ++ + + Chloroform + ++ ++ butanol + + + Ethyl acetate + + + Nhận xét : Dựa vào bảng 3.1, bốn dịch chiết với bốn dung môi khác độ phân cực butanol dạng dung mơi protic polar (có khả hòa tan anion thông qua liên kết Hydro nhờ vào việc sở hữu Hydro linh động) cho thầy xuất Alkaloid Tuy nhiên dựa vào độ lập lại, cường độ lượng kết tủa thu được, bước đầu kết luận, chiết với chloroform cho lượng alkaloid nhiều 3.2 PHƯƠNG PHÁP THỬ HOẠT TÍNH KHÁNG VI SINH VẬT 3.2.1 Ảnh hưởng dịch chiết đến sinh trưởng chủng vi khuẩn kiểm định 10 Nhận xét: Qua kết trên, nhận thấy bốn dịch chiết gây ức chế vi khuẩn kiểm định với độ lập lại tương đương thí nghiệm mục 3.2.1 Ngồi ra, dung môi không cho thầy ảnh hưởng đến sinh trưởng chủng vi khuẩn khảo sát, ngoại trừ dung mơi butanol Thử hoạt tính sinh học với vi khuẩn Pseudomonas dịch chiết với dung mơi ethyl acetate cho thấy hoạt tính gây ức chế sinh trưởng Pseudomonas mạnh 3.3 XÁC ĐỊNH MỘT SỐ THÀNH PHẦN CĨ HOẠT TÍNH SINH HỌC TRONG DỊCH CHIẾT Bảng 3.4 Khối lượng cao sau chiết phân đoạn với dung môi : hexane, chloroform, butanol, ethyl acetate Dung môi chiết Khối lượng cao chiết Khối lượng cao Chiết phân đoạn với methanol (g) với ethanol/nước (g) hexane 4,003 3,900 Chloroform 4,223 4,321 butanol 3,564 3,786 ethyl acetate 3,211 3,485 Nhận xét: Dựa vào bảng 3.4, mô tả khối lượng cao chiết với dung môi : hexane, chloroform, butanol, ethyl acetate Qua bảng 3.4, khối lượng cao thu nhiều sau chiết ứng với dung mơi chlororform, khơng có chênh lệch đáng kể dung môi chiết ban đầu methnol hay hỗn hợp ethanol/nước (95:5,v/v) Điều cho thấy tùy theo mục đích nghiên cứu ứng dụng sau mà chọn methanol hỗn hợp ethanol/nước (95:5,v/v) cho phù hợp a) Các hợp chất có hoạt tính sinh học đáng ý dịch 11 chiết với Methanol Bảng 3.5 Một số hợp chất có hoạt tính sinh học đáng ý dịch chiết hexane STT m/z Tên cấu tử CTPT 357 Prolithospermic acid Công thức cấu tạo C18H13O8 Từ bảng 3.5, hợp chất định danh Prolithospermic acid, dihydroxybenzoic acid, loại phenolic acid Bảng 3.6 Một số hợp chất có hoạt tính sinh học đáng ý dịch chiết với chloroform STT m/z Tên cấu tử CTPT Rosmarinic acid 359 C18H11O6 565 Ethyl lithospermate C29H25O12 565 Dimethyl lithospermate C29H25O12l Công thức cấu tạo 12 Từ bảng 3.6, hợp chất định danh Rosmarinic acid, Ethyl lithospermate, Dimethyl lithospermate, Rosmarinic acid hợp chất hóa học tìm thấy nhiều loại thực vật, có tính oxy hóa mạnh Bảng 3.7 Một số hợp chất có hoạt tính sinh học đáng ý dịch chiết với butanol STT m/z Tên cấu tử CTPT 153 Protocatechuic acid Công thức cấu tạo [C7H5O4] Từ bảng 3.7, hợp chất định danh Protocatechuic acid, Protocatechuic acid axit dihydroxybenoic, loại axit phenolic Nó chất chuyển hóa polyphenol chống oxy hóa có trà xanh Nó có ảnh hưởng hỗn hợp lên tế bào bình thường ung thư nghiên cứu in vitro in vivo 13 Bảng 3.8 Một số hợp chất có hoạt tính sinh học đáng ý dịch chiết với ethyl acetate Tên cấu tử Công thức cấu tạo CTPT STT m/z 717 Salvianolic acid B [C36H29O16] 717 Salvianolic acid E [C36H29O16] Từ bảng 3.8, hợp chất định danh Salvianolic acid B Salvianolic E Hai hợp chất chất chống oxy hóa bảo vệ tế bào chất thải gốc tự điều tra cho loạt điều kiện từ rối loạn nhịp tim thiếu máu đến bệnh Alzheimer b) Một số hợp chất dịch chiết với ethanol/nước Bảng 3.9 Một số hợp chất có hoạt tính sinh học đáng ý dịch chiết hexane STT m/z Tên cấu tử CTPT Công thức cấu tạo 153 Protocatechuic acid [C7H5O4] 551 Monomethyl lithospermate [C28H23O12] 14 Từ bảng 3.9, hợp chất định danh Protocatechuic Monomethylllithospermate Protocachuic acid axit dihydroxybenzoic, loại axit phenolic Nó chất chuyển hóa polyphenol chống oxy hóa có trà xanh Nó có ảnh hưởng hỗn hợp lên tế bào bình thường ung thư nghiên cứu in vitro in vivo Bảng 3.10 Một số hợp chất có hoạt tính sinh học đáng ý STT m/z dịch chiết với chloroform Tên cấu tử CTPT Công thức cấu tạo 313 Salvianolic acid F [C17H13O6] Từ bảng 3.10, hợp chất định danh Salvianolic acid F Hợp chất Salvianolic acid F có hoạt tính chống oxy hóa Bảng 3.11 Một số hợp chất có hoạt tính sinh học đáng ý STT m/z dịch chiết với butanol Tên cấu tử CTPT Công thức cấu tạo 313 Salvianolic acid F [C17H13O6] 551 Monomethyl lithospermate [C28H23O12] 15 295 1,2Didehydrocryptotanshinone [C18H17O3]b 295 Tanshinone IIA [C18H17O3]b Từ bảng 3.11, số hợp chất định danh Salvianolic acid F, Monomethyl lithospermate, 1,2-Didehydrocryptotanshinone, Tanshinone IIA Các hợp chất có khả chống viêm, chống oxy hóa Bảng 3.12 Một số hợp chất có hoạt tính sinh học đáng ý STT m/z 277 dịch chiết với ethyl acetate Tên cấu tử CTPT Công thức cấu tạo Tanshinone [C20H19O5]b 313 Salvianolic acid F [C17H13O6] 357 Prolithospermic acid C18H13O8 537 Lithospermic acid [C18H15O8] 16 Từ bảng 3.12, số hợp chất có hoạt tính sinh học đáng ý định danh Tanshinone, Salvianolic acid F, Protocatechic acid, Lithospermic acid Nhận xét : Các kết ESI-MS cho thấy, so với dịch chiết dung môi hexane chloroform, dịch chiết dung môi butanol ethyl acetate cho thấy thành phần chứa nhiều hợp chất phenolic Mặc dù mẫu chiết cho thấy peak m/z ứng với khối lượng phân tử cassaie diterpene alkaloid, nhiên lẫn tạp chất nhiều Vì vậy, việc phân lập phương pháp sắc kí khác sau phân đoạn chiết để định danh cụ thể cassaine diterpene alkaloid có Lim xanh cần thiết 3.4.THỬ SẮC KÍ BẢN MỎNG KẾT HỢP LC-MS Hình 2.17 Sắc kí mỏng với hệ dung môi methanol : chloroform : acid acetic (10:70:0,095) g cao chiết chloroform tách cột silicagel, rửa giải hệ dung môi M/Cl/AA với tỷ lệ độ phân cực tăng dần từ 10:70:0,095 đến hệ M/Cl với tỷ lệ 10:60; 10:50; 10:40; 10:30; 10:20; 10:10 thu 12 phân đoạn (từ F1-F12) Hứng phân đoạn vào lọ penicillin khô Kiểm tra sắc ký mỏng với chất màu vanillin acid sulfuric Trong đó, số phân đoạn có vệt tròn rõ, đồng thời cho phản ứng màu ứng với xuất alkaloid, phân đoạn F1, F11 17 3.4.1 Kết phân lập hợp chất từ dịch chiết GC-MS Hình 3.19 Phổ GC-MS hợp chất phân đoạn F1 Hình 3.20 Phổ GC-MS hợp chất phân đoạn F11 Hình 3.21 Phổ GC-MS hợp chất phân đoạn F12 Nhận xét: Dựa vào phổ GC-MS, cho thấy peak khối lượng MS nhỏ 200, không cho thấy peak tương ứng với m/z cassaine diterpene alkaloid (Mr > 400) Vì vậy, mẫu gửi đo 18 LC-MS Phòng thí nghiệm Sinh hố hữu (Prof Kajihara’s Laboratory), Khoa Hoá, Đại học Osaka, Osaka, Nhật Bản kết đo LC-MS biện luận cụ thể phần 3.4.2 Kết phân lập hợp chất từ dịch chiết GC-MS Hình 3.22 Phổ LC-MS hợp chất có phân đoạn F1 Dựa vào phổ LC-MS, cho thầy có 05 đỉnh phân tử m/z 422.2 [M+H]+; 452.2[M+H]+;480.1[M+H]+;494.2[M+H]+ 534.2[M+H]+ Dựa vào kết phổ LC-MS so sánh hợp chất công bố [13] từ Lim xanh, số hợp chất cassaine diterpene alkaloid có mặt phân đoạn F1 bao gồm : m/z 422.2 [M+H]+ 6a-Hydroxydinorcassamide (B), ứng với công thức phân tử C23H35NO6 (B) m/z 452.2 [M+H] 3b-Hydroxynorerythrosuamide (A), ứng với công thức phân tử C24H37NO7 + 19 (A) m/z 480.1 [M+H]+ 3b-Acetoxydinorerythrosuamide(C), ứng với công thức phân tử C25H37NO8 (C) m/z 494.2 [M+H]+ 3b-Acetoxynorerythrosuamide (D), ứng với công thức phân tử C26H40NO8 (D) m/z 534.2 [M+H]+ 3b-Tigloyloxynorerythrosuamide (E), ứng với công thức phân tử C29H43NO8 (E) Nhận xét: Đối với mono cassaine diterpene alkaloid báo cáo trước [2], tìm thấy phân đoạn F1 Đáng lưu ý với điều kiện chạy RP-HPLC bước đầu khảo sát, hợp chất có thời gian lưu (rt) khác biệt với phổ MS sạch, sở tham khảo cho điều kiện chạy cột sắc ký lỏng pha đảo Và cần thiết phải kết hợp nhiều phương pháp bao gồm chiết 20 lỏng-lỏng, sắc kí cột silicagel sắc kí lỏng pha đảo RP-HPLC để phân lập mono cassaine diterpene alkaloid riêng biệt Đặc biệt với hợp chất F ứng với thời gian lưu rt = 6.5 với hàm lượng tương ứng cao (10.5 %), chưa định danh, cụ thể theo hình 3.23 Hình 3.23 Phổ LC-MS hợp chất F có phân đoạn F1 Đối với phân đoạn F11, lấy g cao từ phân đoạn F11 hòa tan MeOH để chạy cột sắc kí cột với hệ dung mơi M/C/AA với tỷ lệ độ phân cực tăng dần từ 10:70:0,095 đến hệ M/C với tỷ lệ 10:60; 10:50; 10:40; 10:30; 10:20; 10:10 thu phân đoạn có Rf gần giống có kí hiệu F12 F13 Dựa vào mỏng, lựa chọn phân đoạn F12 có vết tròn rõ Sau đó, phun thuốc thử, đuổi dung mơi gởi mẫu đến Phòng thí nghiệm Sinh hoá hữu (Prof Kajihara’s Laboratory), Khoa Hoá, Đại học Osaka, Osaka, Nhật Bản Kết thu hình 3.24 21 Hình 3.24 Phổ LC-MS hợp chất có phân đoạn F12 Dựa vào phổ LC-MS, cho thấy có đỉnh phân tử m/z 773.3 [M+Cl]- 846.1 [M+Cl]- Dựa vào kết phổ m/z so sánh hợp chất công bố [2] ta có : m/z 773.3 [M+Cl]- Erythrophlesin F (G), ứng với công thức phân tử C42H62NO10 (G) m/z = 846.1 [M+Cl] Erythrophlesin D (H) ứng với công thức - phân tử C45H66NO12 (H) 22 Nhận xét: Phù hợp với nghiên cứu trước đó, hàm lượng dạng dimer cassaine diterpene alkaloid tách từ Lim xanh thấp Vì lượng chất ban đầu để chiết cần lớn để thu lượng đáng kể phục vụ thí nghiệm 23 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Đã xác định khối lượng cao sau chiết phân đoạn tối ưu chiết với dung môi Chloroform với 4.223 g (chiết với Methanol) 4.321 g (chiết với ethanol/nước) Định tính Alkaloid sử dụng loại thuốc thử màu : Mayer, Dragendoff, Wanger với dịch chiết dung môi Dung mơi Chloroform dung mơi chứa dịch chiết có nhiều alkaloids Đã xác định số hợp chất flavonoid có hoạt tính kháng khuẩn mạnh dịch chiết hexane, chloroform, butanol ethyl acetate Lim xanh nhờ vào phổ ESI-MS Qua đó, giải thích lí dịch chiết butanol cho tính kháng khuẩn mạnh hàm lượng alkaloid dịch chiết butanol cao Sử dụng kết hợp phương pháp chiết lỏng-lỏng, sắc kí cột silicagel LC/MS cho phép xác định phân đoạn tách có mặt cassain diterpene alkaloid nhiều Các cassaine diterpene alkaloid định danh từ dịch chiết chloroform Lim xanh (Việt Nam) bao gồm 6a-Hydroxydinorcassamide, 3bHydroxynorerythrosuamide, 3b-Acetoxydinorerythrosuamide, 3bAcetoxynorerythrosuamide, 3b-Tigloyloxynorerythrosuamide, Erythrophlesin F, Erythrophlesin D KIẾN NGHỊ Tiếp tục nghiên cứu phân lập riêng lẽ với khối lượng lớn Cassaine diterpene alkaloid từ Lim Xanh (Việt Nam) quy trình tối ưu hố nêu luận văn, đồng thời thử hoạt tính sinh học quan trọng bao gồm điều hoà huyết áp chống ung thư số dòng ung thư hợp chất phân lập 24 Tiếp tục có thêm nhiều cơng trình nghiên cứu thời gian đến phận khác Lim xanh rễ, vỏ, tiến đến có cơng trình ứng dụng hiệu mang lại từ Lim xanh, nhằm góp phần làm tăng giá trị sử dụng Lim xanh thu hái địa bàn thuộc huyện Tiên Phước tỉnh Quảng Nam tương lai gần Bên cạnh alkaloids, từ lim xanh chứa số hoạt chất phenolic hứa hẹn số hoạt tính sinh học đáng chủ ý, điển hình chống oxi hố Điều mở số hướng ... tài Nghiên cứu thành phần thử hoạt tính sinh học hợp chất Cassaine Diterpene Alkaloids từ lim xanh Erythrophleum fordii, Việt Nam Mục tiêu nghiên cứu: - Xây dựng quy trình chiết tách hợp chất. .. học lim xanh - Phân tích định tính định lượng hợp chất cassaine diterpene alkaloid có lim xanh Erythrophleum fordii - Phân lập hợp chất hóa học, xác định thành phần hóa học, cấu trúc số hợp chất. .. Nguyên liệu Cây lim xanh Quảng Nam Phương pháp nghiên cứu 4.1 Nghiên cứu lý thuyết - Nghiên cứu lim xanh : đặc điểm, phân bố, công dụng - Nghiên cứu diterpene alkaloid - Đánh giá hoạt tính gây độc