thiết lập qui trình Southern blot phần 2
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP: THIẾT LẬP QUI TRÌNH SOUTHERN BLOT (Phần 2)
... sau: Diện tích màng: 6 x 6 x 2 = 72 (cm 2 ) Thể tích đệm lai: 0 .25 x 72 = 18 (ml) Nồng độ probe cần: 10 x 18 = 180 (ng) Thể tích probe: 180 / 10 =18 (µl) * Qui trình thực hiện phản ứng lai ... Cặp primer ngoài: Khuếch đại trình tự 745 bp Phl - 2a: GAGGACGTCGAAGACCACCA Phl - 2b: ACCGCAGCATCGTGTATGAG - Cặp primer trong: Khuếch đại trình tự 629 bp B2BF: ACCCACCGCAGCATCGTTTATGAGC ....
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP: THIẾT LẬP QUI TRÌNH SOUTHERN BLOT (Phần phụ)
... giới hạn. Tóm lại, chúng tôi đã thiết lập được qui trình Southern blot trên đối tượng là vi khuẩn Pseudomonas fluorescens nhưng vẫn chưa hoàn thiện được qui trình ở mức genomic DNA. Kết quả ... của phương pháp Southern blot. ...................................................4 2. 4 Sự khác nhau giữa Southern blot, Northern blot, và Western blot. .........................
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP: THIẾT LẬP QUI TRÌNH SOUTHERN BLOT (Phần 1)
... NHAU GIỮA SOUTHERN BLOT, NORTHERN BLOT VÀ WESTERN BLOT Bảng 2. 1 Những điểm khác nhau cơ bản giữa Southern blot, Northern blot và Western blot Southern blot Northern blot Western blot 1) ... VÀ YÊU CẦU 1 .2. 1 Mục tiêu đề tài Thiết lập qui trình Southern blot trên đối tượng là vi khuẩn Pseudomonas fluorescens trong điều kiện phòng thí nghiệm.
2 1 .2. 2 Y...
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP: THIẾT LẬP QUI TRÌNH SOUTHERN BLOT (Phần 3)
... chúng tôi thiết lập qui trình. Từ thực nghiệm, chúng tôi rút ra được những điểm cần lưu ý trong quá trình ly trích: 70 121 123 127 128 150 154 23 28 65 67 18 129 149 ... 28 , 129 , 130 với cặp primer B2BF, BRR4; L: Ladder (thang chuẩn 1000 bp). b) Sản phẩm PCR của các mẫu 130, 129 , 121 , 4, 28 với hai cặp primer B2BF, BRR4 và phl - 2a, ph l- 2b
62 ... phản ứng PCR trên các dò...
KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP: THIẾT LẬP QUI TRÌNH SOUTHERN BLOT (PHỤ LỤC 2)
... o C – 8 o C. 79
6. Dung dịch rửa 2 Thành phần nồng độ cuối Tris base 121 g 1 M NaCl 1 12 g 2 M Pha dung dịch 20 X Hòa tan 121 g Tris base và 1 12 g NaCl trong 800 ml nước cất. Điều chỉnh pH ... MgCl 2 1M 1 ml 1 mM Blocking reagent 2 g 0 ,2 % (g/v) Các thành phần trên được hòa tan trong 1000 ml nước cất. Dung dịch này có thể bảo quản 1 tuần ở 2 o C – 8 o C. 79
6. Dung dịc...
Thiết lập qui trình southern blot
... sau: Diện tích màng: 6 x 6 x 2 = 72 (cm2 ) Thể tích đệm lai: 0 .25 x 72 = 18 (ml) Nồng độ probe cần: 10 x 18 = 180 (ng) Thể tích probe: 180 / 10 =18 (µl) * Qui trình thực hiện phản ứng lai Bước ... - Cặp primer ngoài: Khuếch đại trình tự 745 bp Phl - 2a: GAGGACGTCGAAGACCACCA Phl - 2b: ACCGCAGCATCGTGTATGAG - Cặp primer trong: Khuếch đại trình tự 629 bp B2BF: ACCCACCGCAGCATCGTTTATGA...
Thiết lập qui trình southern blot 3
... chúng tôi thiết lập qui trình. Từ thực nghiệm, chúng tôi rút ra được những điểm cần lưu ý trong quá trình ly trích: 70 121 123 127 128 150 154 23 28 65 67 18 129 149 ... số 4, 28 , 129 , 130 với cặp primer B2BF, BRR4; L: Ladder (thang chuẩn 1000 bp). b) Sản phẩm PCR của các mẫu 130, 129 , 121 , 4, 28 với hai cặp primer B2BF, BRR4 và phl - 2a, ph l- 2b
62 Chúng ... phản ứng PCR...