Luân văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E coly DH5α part 3 ppt

... DNA polymerase (tổng hợp) 5’ 3 , exonuclease (thủy giải) 3 5’ và exonuclease 5’ 3 . Enzym DNA fragment Klenow là enzym DNA polymerase I bị cắt bỏ tiểu đơn vị nhỏ (nhờ một protease), phần ... bởi hai loại enzym là E. coly DNA lygase hay T4 DNA lygase. 2.5 .3. 1 E. coly DNA lygase Enzym đƣợc ly trích từ E. coly xúc tác nối hai đoạn DNA có đầu sole 5’ ACGG + T...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... 3. 2.6 Các loại enzym dùng trong thí nghiệm 25 3. 3 Phƣơng pháp nghiên cứu 26 3. 3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3. 3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α ... tƣợng biến nạp 4 2 .3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E. coly 5 2 .3. 1 Khái niệm sự biến nạp nhân tạo. 5 2 .3. 2 Sự điều hoà...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... 15.http://www.kings.edu/Biology/lux/bacterial.html 6. 16.http://fruitfly4.aecom.edu/labmanual/27.html 7. 17.http://core.eai.edu/biol/foruvellm/farwelebpage/Biotech3100/pvector.200.pfd 8. http://lybrary.thinkquest.org/19697/data/ovpc6b.html ... http://opbs.okstate.edu/~melcher/MG/MGW4/ html 13. http://www.ornl.gov/sci/techresourses/human 14. http://www_biology.ucsd.edu/classes/bimm100.FA...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... bằng (blunt end) cho đoạn DNA DC TS TS DC EcoRV DC1 DC2 DC3 DNA plasmid 3. 0kb 56 Hình 4.20 Sản phẩm cắt plasmid tách chiết mẫu biến nạp đoạn DNA 629bp và mẫu biến nạp đoạn DNA 580bp. ... theo thể tích giữa tế bào khả nạp và plasmid là 3 : 0.5, điện di ở 100V trong 30 phút. Qua 3 lần tách chiết, chúng tôi đã hoàn thiện đƣợc quy trình t...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... còn lẫn tạp 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 DNA genome DNA plasmid 3. 0kb 43 4.2 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 4.2.1 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ ... biến nạp ở tỉ lệ thể tích là 10 : 1. Hình 4.8 Kết quả cấy vi khuẩn biến nạp ở tỉ lệ thể tích là 3 : 0.5. Biến nạp với tỉ lệ...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... lại bằng 3 l elution buffer. 3. 3.11 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coly DH5α khả nạp (theo quy trình của Sambrook và cộng sự, 1989 có chỉnh sửa) Thực hiện biến nạp theo quy trình sau ... sau: Nồng độ ATP thấp (0.5mM), (Ferretti và Sgaramella 1981), nồng độ enzym lygase cao (50unit/ml), lƣợng DNA insert và vector cao, tỉ lệ về số mol của vector...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... ở 37 0 C. 27 3. 3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm tra Sơ đồ 3. 3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi ... pháp nghiên cứu 3. 3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Sơ đồ...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... cả khi nồng độ ComK thấp. 2 .3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E. coly 2 .3. 1 Khái niệm sự biến nạp nhân tạo. Biến nạp nhân tạo là vi c đƣa một đoạn DNA vào tế bào chủ nhằm nhân nhanh số lƣợng ... 3 PHẦN 2. TỔNG QUAN TÀI LYỆU 2.1 Hiện tƣợng biến nạp ở vi khuẩn 2.1.1 Hiện tƣợng biến nạp Biến nạp là hiện tƣợng tiếp nhận DNA từ bên...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... biến nạp theo quy trình 2 (ở thể tích biến nạp là 3: 0 .5, và dịch biến nạp đã pha loãng ½ khi trang lên đĩa) cho kết quả tốt hơn chọn lọc thể biến nạp theo quy trình 1 (ở thể tích biến nạp 3: 0 .5, ... ở 37 0 C. A B C D 37 3. 4.10 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5α khả nạp (theo quy trình của Sambrook và cộng sự,...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 02:21

... Sơ đồ 3. 3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm tra. Vi khuẩn Ecoly DH5α Khả nạp + CaCl 2 Plasmid Bluescript II SK (+/-) Vi khuẩn mang plasmid Bluescript Sốc ... theo quy trình 3. 3.7.1, thực hiện phản ứng cắt theo quy trình 3. 3.7.2 Phản ứng PCR trên plasmid: Primer T3 và primer T7 đƣợc thiết kế dựa trên tr...

Ngày tải lên: 16/11/2012, 16:15