Luân văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E coly DH5α part 4 pps
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 4 pps
...
3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm tra
Sơ đồ 3.3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α ... nghiên cứu
3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn
Sơ đồ 3.2...
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 9 pptx
... Các loại enzym dùng trong thí nghiệm 25
3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 26
3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26
3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm ... primers (T3, T7) và (ITS4, ITS5) 38
PHẦN 4: KẾT QUẢ THẢO LUẬN 39
4. 1 Xây dựng đƣờng tƣơng quan tuyến tính 39
4. 2 Các quy trình biến nạp...
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 8 pptx
... 15.http://www.kings.edu/Biology/lux/bacterial.html
6. 16.http://fruitfly4.aecom.edu/labmanual/27.html
7. 17.http://core.eai.edu/biol/foruvellm/farwelebpage/Biotech3100/pvector.200.pfd
8. http://lybrary.thinkquest.org/19697/data/ovpc6b.html ... http://www.unn.edu/biology/Bial395-s-05/lab4a.html
12. http://opbs.okstate.edu/~melcher/MG/MGW4/ html
13. http://www.ornl.gov/sci/techresourses/hu...
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 7 pdf
... quy trình tách chiết plasmid từ
vi khuẩn E. coly biến nạp, kết quả tách chiết không còn lẫn DNA genome và các tạp
DC 1 2 3 4 5
1 2 DC 3 4 5
DNA
plasmid
3.0kb
DNA
plasmid
3.0kb
54 ... bằng (blunt end) cho đoạn DNA
DC TS TS DC
EcoRV DC1 DC2 DC3
DNA
plasmid
3.0kb
56
Hình 4. 20 Sản phẩm cắt plasmid tách chiết mẫu biến nạp đoạn DNA 6...
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 6 doc
...
3.0kb
43
4. 2 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn
4. 2.1 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng sinh 60µg/ ml
Hình 4. 3 Kết quả cấy vi khuẩn biến nạp khi sốc nhiệt ... khuẩn biến nạp ở tỉ lệ thể tích là 10 : 1.
Hình 4. 8 Kết quả cấy vi khuẩn biến nạp ở tỉ lệ thể tích là 3 : 0.5.
Biến nạp...
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 5 pot
... bằng 3μl elution buffer.
3.3.11 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coly DH5α khả nạp (theo quy
trình của Sambrook và cộng sự, 1989 có chỉnh sửa)
Thực hiện biến nạp theo quy trình sau ... phù tế bào competen cell đã đƣơc chuẩn bị cho vào eppendorf
1.5 ml, thêm 3µl DNA plasmid tái tổ hợp vào, đảo nhẹ, giữ lạnh trong đá trong 20
phút.
Chuyển nha...
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 3 ppt
...
đƣợc xúc tác bởi hai loại enzym là E. coly DNA lygase hay T4 DNA lygase.
2.5.3.1 E. coly DNA lygase
Enzym đƣợc ly trích từ E. coly xúc tác nối hai đoạn DNA có đầu sole
5’ ACGG + TAATCGCCA 3’ ... là vi khuẩn E. coly DH5α và plasmid
pBluescirpt II SK (
+
/
-
), đoạn DNA thu đƣợc từ phản ứng PCR.
3.2.1.1 Vi khuẩn E. coly DH5α
Chủng vi khuẩn đ...
Luân. văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.coly DH5α part 1 pdf
... tƣợng biến nạp ở vi khuẩn
2.1.1 Hiện tƣợng biến nạp
Biến nạp là hiện tƣợng tiếp nhận DNA từ bên ngoài vào tế bào vi khuẩn. Hiện
tƣợng biến nạp đƣợc chứng minh lần đầu tiên trên vi khuẩn Streptococcus ... khi nồng độ ComK
thấp.
2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E. coly
2.3.1 Khái niệm sự biến nạp nhân tạo.
Biến nạp nhân tạo là vi...
Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E.Coly DH5α
...
Sơ đồ 3.3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm tra.
Vi khuẩn Ecoly DH5α
Khả nạp
+ CaCl
2
Plasmid Bluescript II SK (+/-)
Vi khuẩn mang plasmid Bluescript
Sốc ... 30 : 3.
Hình 4. 7 Kết quả cấy vi khuẩn biến nạp ở tỉ lệ thể tích là 10 : 1.
Hình 4. 8 Kết quả cấy vi khuẩn biến nạp ở tỉ lệ thể...
Luận văn : HOÀN THIỆN QUY TRÌNH BIẾN NẠP ĐOẠN DNA VÀO TẾ BÀO VI KHUẨN E. coli DH5α part 3 pptx
... plasmid vào tế bào vi khuẩn
Hình 4. 1 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn ở thể tích 1 0:1 .5
(A) Biến nạp với tỷ lệ tế bào khả nạp và plasmid ... 1 (ở thể tích biến nạp 3:0 .5, và dịch biến nạp không pha loãng khi trang lên
đĩa) và chọn lọc thể biến nạp theo quy trình 3 (ở thể t...