Luân văn : Xây dựng quy trình biến nạp đoạn DNA vào tế bào vi khuẩn E coly DH5α part 9 pptx

... Các loại enzym dùng trong thí nghiệm 25 3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 26 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 26 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm ... primers (T3, T7) và (ITS4, ITS5) 38 PHẦN 4: KẾT QUẢ THẢO LUẬN 39 4.1 Xây dựng đƣờng tƣơng quan tuyến tính 39 4.2 Các quy trình biến nạ...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... Sambrook J, E. F. Fritsch, T. Maniatis, 198 9, Molecular cloning A laboratory manual, second edition, CSH. 5. Wolgang Schumann, 199 5, Genetic Enginereering Techniques. Các website 1. http://faculty.plattsbuggh.edu/donald-slysh/transformation.html ... 15.http://www.kings.edu/Biology/lux/bacterial.html 6. 16.http://fruitfly4.aecom.edu/labmanual/27.html 7. 17.http://core.eai.edu/biol/f...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... bằng (blunt end) cho đoạn DNA DC TS TS DC EcoRV DC1 DC2 DC3 DNA plasmid 3.0kb 56 Hình 4.20 Sản phẩm cắt plasmid tách chiết mẫu biến nạp đoạn DNA 629bp và mẫu biến nạp đoạn DNA 580bp. ... hoàn thiện đƣợc quy trình tách chiết plasmid từ vi khuẩn E. coly biến nạp, kết quả tách chiết không còn lẫn DNA genome và các tạp DC 1 2 3 4 5 1 2 DC 3 4...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... tạp 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 DNA genome DNA plasmid 3.0kb 43 4.2 Các quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn 4.2.1 Chọn lọc vi khuẩn biến nạp với nồng độ kháng ... khuẩn biến nạp ở tỉ lệ thể tích là 10 : 1. Hình 4.8 Kết quả cấy vi khuẩn biến nạp ở tỉ lệ thể tích là 3 : 0.5. Biến nạp với tỉ lệ...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... bằng 3μl elution buffer. 3.3.11 Chuyển sản phẩm nối vào tế bào vi khuẩn E. coly DH5α khả nạp (theo quy trình của Sambrook và cộng sự, 198 9 có chỉnh sửa) Thực hiện biến nạp theo quy trình sau ... sau: Nồng độ ATP thấp (0.5mM), (Ferretti và Sgaramella 198 1), nồng độ enzym lygase cao (50unit/ml), lƣợng DNA insert và vector cao, tỉ lệ về số mol của vector và...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... 3.3.2 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm tra Sơ đồ 3.3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α ... nghiên cứu 3.3.1 Quy trình biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn Sơ đồ 3.2...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... là vi khuẩn E. coly DH5α và plasmid pBluescirpt II SK ( + / - ), đoạn DNA thu đƣợc từ phản ứng PCR. 3.2.1.1 Vi khuẩn E. coly DH5α Chủng vi khuẩn đã đột biến, có những thiếu hụt dùng để biến nạp ... ( 197 3), đã thành công khi biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào vi khuẩn E. coly bằng phƣơng pháp Calcium chloride. Sambrook và cộng sự ( 198...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... tƣợng biến nạp ở vi khuẩn 2.1.1 Hiện tƣợng biến nạp Biến nạp là hiện tƣợng tiếp nhận DNA từ bên ngoài vào tế bào vi khuẩn. Hiện tƣợng biến nạp đƣợc chứng minh lần đầu tiên trên vi khuẩn Streptococcus ... khi nồng độ ComK thấp. 2.3 Sự biến nạp nhân tạo vào tế bào E. coly 2.3.1 Khái niệm sự biến nạp nhân tạo. Biến nạp nhân tạo là vi...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 06:20

... nối vào tế bào vi khuẩn E. coli DH5α khả nạp (theo quy trình của Sambrook và cộng sự, 198 9 có chỉnh sửa) Thực hiện biến nạp theo quy trình sau: - Hút 10µl dịch huyền phù tế bào competent cell ... plasmid vào tế bào vi khuẩn Hình 4.1 Biến nạp plasmid vào tế bào vi khuẩn ở thể tích...

Ngày tải lên: 28/07/2014, 02:21

... Sơ đồ 3.3 Quy trình biến nạp đoạn DNA vào vi khuẩn E. coly DH5α và kiểm tra. Vi khuẩn Ecoly DH5α Khả nạp + CaCl 2 Plasmid Bluescript II SK (+/-) Vi khuẩn mang plasmid Bluescript Sốc ... ( 197 3), đã thành công khi biến nạp plasmid tái tổ hợp vào tế bào vi khuẩn E. coly bằng phƣơng pháp Calcium chloride. Sambrook và cộng sự ( 198 9...

Ngày tải lên: 16/11/2012, 16:15