2.3.5.1 Đánh giá kích thước tiểu phân và phân bố kích thước tiểu phân
Nguyên tắc xác định KTTP: Kích thước hạt được xác định bằng phương pháp tán xạ lase. Nguyên lý của phương pháp là khi chiếu chùm tia lase vào các hạt có kích thước khác nhau sẽ thu được mức độ tán xạ ánh sáng khác nhau. Dựa vào độ tán xạ của chùm tia sau khi va chạm vào hạt ta có thể tính được kích thước hạt theo thuyết Mie.
Phương pháp tiến hành: SLNs sau khi bào chế được pha loãng bằng một lượng nước cất 2 lần (lọc qua màng 0,2 µm) vừa đủ sao cho count rate nằm trong khoảng 200-400 kcps.
2.3.5.2. Xác định hiệu suất bao gói dược chất trong tiểu phân nano lipid rắn mafenid acetat.
Hiệu suất bao gói dược chất được xác định gián tiếp thông qua việc định lượng dược chất tự do trong hệ theo công thức sau:
EE (%) = 𝐻à𝑚 𝑙ượ𝑛𝑔 𝑀𝐴 𝑡ổ𝑛𝑔−ℎà𝑚 𝑙ượ𝑛𝑔 𝑀𝐴 𝑡ự 𝑑𝑜
𝐻à𝑚 𝑙ượ𝑛𝑔 𝑀𝐴 𝑡ổ𝑛𝑔 x100%
a. Xác định tổng lượng MA trong hệ:
- Hút chính xác 5 ml sản phẩm thu được vào bình định mức 50 ml, bổ sung khoảng 40 ml methanol chạy sắc ký, đun cách thủy ở 70oC trong 30 phút, bổ sung đến vừa đủ 50 ml methanol.
- Làm lạnh đến 4oC trong 30 phút.
- Ly tâm hỗn dịch trên ở tốc độ 5000 v/p, nhiệt độ 15oC trong 30 phút. - Hút lấy phần dịch trong, lọc qua màng 0,45µm.
- Định lượng bằng phương pháp HPLC với thông số được mô tả ở mục 2.3.3.2
b. Xác định hàm lượng MA tự do trong hệ
- Hút khoảng 2 ml sản phẩm thu được cho vào ống siêu ly tâm vẩy?? Millipore® UFC801008 Amicon®, tiến hành ly tâm ở tốc độ 5000 v/p, nhiệt độ 15oC trong khoảng 45 – 60 phút.
- Hút lấy phần dịch trong, pha loãng 10 lần bằng nước cất 2 lần.
- Định lượng bằng kỹ thuật HPLC với các thông số được mô tả ở mục 2.3.3.1
CHƯƠNG 3. THỰC NGHIỆM, BÀN LUẬN VÀ KẾT QUẢ