Cho vào bình cầu hai cổ thể tích 1000ml: 15,0g (0,083mol) L-tyrosin (2), 400ml CH3OH. Khuấy tạo hỗn dịch. Nhỏ từ từ 10ml H2SO4 đặc đến khi dung dịch đồng nhất. Đun hồi lƣu hỗn hợp trong 12h. Kiểm tra phản ứng bằng SKLM. Sau phản ứng, hỗn hợp phản ứng để nguội về nhiệt độ phòng, cất thu hồi methanol. Cắn thu đƣợc hòa tan trong 100ml nƣớc, làm lạnh. Sau đó điều chỉnh pH dung dịch về 9 bằng dd Na2CO3 bão hòa, xuất hiện kết tủa. Lọc, thu đƣợc 12,46g tủa thô 9.
Tinh chế tủa thô 9: hòa tan 12,46 gam 9 trong 50,0ml dung dịch HCl 1M, làm lạnh rồi điều chỉnh pH dung dịch về 9 bằng dd Na2CO3 bão hòa, xuất hiện tủa. Lọc thu đƣợc tủa 9. Rửa tủa 9 bằng nƣớc lạnh (3 lần), thu đƣợc 10,86g sản phẩm 9. Nhiệt độ nóng chảy 134 -136oC. Hiệu suất 67,2%.
Theo dõi phản ứng và kiểm tra độ tinh khiết của sản phẩm bằng SKLM khai triển với hệ dung môi n-butanol : acid acetic : nƣớc (6 : 2 : 2,5). Hiện màu bằng thuốc thử ninhydrin 0,1%/aceton. Kết quả đƣợc biểu diễn dƣới hình sau:
SKLM của hỗn hợp phản ứng sau 6h
SKLM của sản phẩm tinh khiết
26
Nhận xét: Kết quả cho thấy sản phẩm 9 có giá trị hệ số lƣu giữ khác nguyên liệu. Trong hệ dung môi n-butanol : acid acetic : nƣớc cất = 6 : 2 : 2,5, sản phẩm tạo thành cho một vết tròn, màu cam đậm có Rf là 0,69 so với nguyên liệu có Rf là 0,47. Nhƣ vậy có thể kết luận sơ bộ sản phẩm thu đƣợc đã loại bỏ hoàn toàn nguyên liệu và không có tạp.