2.2.4.1. Nghiên cứu tác dụng chống dị ứng trên mô hình gây shock phản vệ trên chuột nhắt trắng
Chuột nhắt trắng chủng Swiss, thuần chủng, cả hai giống, khỏe mạnh, nặng 25 2 g.
Phương pháp: nghiên cứu theo phương pháp thực nghiệm trên mô hình gây shock phản vệ bằng Compound 48/80.
Tác nhân gây shock phản vệ là Compound 48/80. Compound 48/80 được tiêm vào màng bụng của chuột nhắt trắng sau 2 giờ uống thuốc. Quan sát tỷ lệ chuột chết ở các lô trong 1 giờ.
Chỉ tiêu quan sát: số chuột chết
Chỉ tiêu đánh giá: Tỷ lệ phần trăm chuột chết trong 1 giờ sau khi tiêm Compound 48/80.
X(%) = B 100
A
Trong đó:
X(%): tỷ lệ chuột chết [33], [38], [41], [47]. B là số chuột chết của từng lô sau 1 giờ A là tổng số chuột nghiên cứu của từng lô
2.2.4.2. Nghiên cứu tác dụng chống dị ứng trên mô hình gây ngứa trên chuột nhắt trắng.
Chuột nhắt trắng chủng Swiss, thuần chủng, cả hai giống, khỏe mạnh, nặng 25 2 g.
Phương pháp: sử dụng Copound 48/80 liều 4mg/kg để gây tình trạng dị ứng biểu hiện bằng triệu chứng ngứa trên da chuột. Gây ngứa bằng cách tiêm dung dịch Compound 48/80 dưới da cổ. Theo dõi phản xạ gãi trên toàn bộ cơ
thể (tại các thời điểm 0-5, 5-10, 10-15, 15-20 phút). Các lô chuột được đánh giá bằng toàn bộ các nghiên cứu viên tham gia để tránh sai số.
Chỉ tiêu quan sát: số lần phản xạ gãi trên toàn bộ cơ thể chuột.
Chỉ tiêu đánh giá: Số lần gãi trung bình giữa các lô ở từng thời điểm và tổng số lần gãi trung bình trong 20 phút được so sánh giữa các lô để đánh giá tác dụng chống dị ứng.
2.2.4.3. Nghiên cứu tác dụng chống dị ứng bằng mô hình gây viêm cấp tính trên chân chuột
Chuột nhắt trắng chủng Swiss, thuần chủng, cả hai giống, khỏe mạnh, nặng 25 2 g.
Phương pháp: Sử dụng Compound 48/80 để gây tình trạng dị ứng trên da gan bàn chân chuột, đánh giá mức độ dị ứng thông qua chiều dày và sự gia tăng thể tích chân chuột. Gây mô hình bằng cách tiêm dưới da gan bàn chân dung dịch Compound 48/80 0,4%. Đo độ dày và thể tích bàn chân trước và sau khi tiêm ( 30 phút và 1 giờ). Tính kết quả trung bình và so sánh.
Chỉ tiêu quan sát:
- Chiều dày chân bên phải. - Thay đổi thể tích chân chuột.
Chỉ tiêu đánh giá: Độ gia tăng thể tích và chiều dày chân chuột ở 2 thời điểm 30, 60 phút so với ban đầu. So sánh giá trị trung bình về mức độ gia tăng thể tích và chiều dày giữa các lô để đánh giá tác dụng chống dị ứng.
Tính kết quả theo công thức của Fontaine + Độ gia tăng thể tích chân của từng chuột:
Trong đó: Vt: Thể tích chân chuột sau khi gây dị ứng. Vo: Thể tích chân chuột trước khi gây dị ứng.
+ Tác dụng chống dị ứng của thuốc được đánh giá bằng khả năng ức chế gia tăng thể tích chân chuột (I%):
% % % % c t o V V I V Trong đó: % c V
: Trung bình độ tăng thể tích chân chuột ở lô đối chứng.
%
t
V
: Trung bình độ tăng thể tích chân chuột ở lô uống thuốc.
%
o
V
: Trung bình thể tích chân chuột trước khi gây viêm I%: Mức độ ức chế phù [23], [30], [35], [46].
+ Khả năng ức chế gia tăng chiều dày chân chuột
(%) c t 100 c d d X d Trong đó:
X là mức độ ức chế gia tăng chiều dày [33], [41], [55].
,
c t
d d
lần lượt là thay đổi chiều dày chân chuột trước và sau khi gây mô
hình của lô đối chứng và lô thuốc thử.