PHẦN III NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
5.6 Phương pháp nhuộm tế bào vi khuẩn
Các vi khuẩn đã kiểm tra cĩ khả năng tổng hợp IAA được tiếp tục đánh giá về mặt hình thái, màu sắc. Các đặc điểm sinh lý hĩa sinh. Từ đĩ sơ bộ xác định được lồi vi khuẩn đã phân lập được.
Một giọt nước cất vơ trùng được đặt ở trung tâm của lam kính thủy tinh. Lấy 1 khuẩn lạc đơn từ nuơi cấy đã được thực hiện, trộn với nước, và được đặt ở trung tâm của lam kính.
Huyền phù này được dàn mỏng ra trên lam kính bằng cách sử dụng mũi kim tiêm.
Dàn mỏng được sấy khơ trong khơng khí và cố định thơng qua sưởi nhẹ bằng cách đi qua phía bên dưới của lam kính 3 đến 4 lần trên ngọn lửa đèn cồn.
Mẫu sau đĩ bị ngập với dung dịch tím tinh thể trong 1 phút và rửa sạch nhẹ nhàng trong dịng chảy của nước cất.
Sau đĩ, cho lam kính ngập với dung dịch Lugol trong 1 phút, ngay lập tức xả ra, và ngâm một lần nữa với dung dịch này. Sau khi ủ ở nhiệt độ phịng trong 1 phút, dung dịch iốt được ráo nước sau đĩ rửa với ethanol 95%. Tiếp theo, nĩ đã được rửa sạch bằng nước trong vịng 15 đến 30 giây và blot khơ cẩn thận.
Mẫu được ủ với các dung dịch Fucshin trong 1 phút. Lam kính được rửa nhẹ nhàng bằng nước cất và sấy khơ trong khơng khí. Lam kính đã được quan sát dưới kính hiển vi và dữ liệu đã được ghi nhận.
Nếu vi khuẩn bắt màu xanh tím thì là vi khuẩn gram dương Nếu vi khuẩn bắt màu hồng thì là vi khuẩn gram âm
Quan sát hình thái tế bào vi khuẩn và chụp lại hình ảnh thơng qua hệ thống chụp ảnh tự động từ kính hiển vi