Tiến hành sắc kí hỗn hợp ba chất FEL, NIF, AMLO trong MeOH, sắc kí đồ được ghi lại ở hình 3.1.
Hình 3.1.Sắc kí đồ hỗn hợp ba chất Fel, NIF, AMLO trong methanol
NIF
32
Thời gian lưu của ba chất FEL, NIF và AMLO thu được như sau:
+ Thời gian lưu của FEL (tFEL) : 13,238 phút + Thời gian lưu của NIF(tNIF) : 12,498 phút + Thời gian lưu của AMLO (tAMLO) :15,461 phút Kết quả khảo sát cho ta thấy:
Cả hai chất NIF và AMLO đều không có pic bị trùng với chất phân tích FEL nên đều có thể lựa chọn làm chất chuẩn nội, tuy nhiên do:
- tNIF <tFEL <tAMLO: Do đó nên lựa chọn chất chuẩn nội có thời gian lưu nhỏ hơn thời gian lưu của chất cần phân tích, để sau khi phát hiện ra chất phân tích chúng ta có thể dừng quá trình phân tích lại do đó có thể giảm thiểu thời gian cần thiết để phân tích và tăng tuổi thọ của máy sắc ký.
- Khoảng chênh lệch thời gian lưu của NIF- FEL (0,66 phút) nhỏ hơn nhiều so với AMLO- FEL (2,21 phút) nhưng vẫn đảm bảo pic tách được rõ ràng. Nên việc sử dụng chất chuẩn nội NIF sẽ mang lại kết quả chính xác hơn so với AMLO.
- Pic AMLO: Doãng pic, không sắc nhọn. Do đó, AMLO không phù hợp trong quy trình phân tích này.
Từ những lí do trên, chúng tôi lựa chọn NIF làm chuẩn nội để tiếp tục triển khai nghiên cứu.
Để khẳng định chính xác pic ứng với Felodipin và Nifedipin, tiến hành phân tích các mảnh phổ tương ứng đối với mỗi chất phân tích. Phổ khối của Felodipin và Nifedipin được ghi lại ở hình 3.2 và hình 3.3:
33
Hình 3.2.Phổ khối của Felodipin
34