Tiến hành tinh chế diosgenin trong dịch chiết của đồng dung môi khảo sát, gồm 3 bước:
Bước 1: Loại tạp chất béo
Dịch chiết được cất thu hồi dung môi và cô đến cắn. Thêm một lượng n-hexan lạnh vừa đủ ngập cắn chiết, lọc hút trên phễu lọc Buchner, ta thu được cắn chiết đã được loại sơ bộ một số tạp chất tan trong n-hexan lạnh.
Bước 2: Kết tinh sản phẩm trong aceton.
Thêm aceton ngập cắn vừa thu được, hòa tan cắn bằng cách siêu âm 15 phút. Làm lạnh 24 giờ ở nhiệt độ 0oC, tinh thể diosgenin sẽ kết tinh lại, lọc thu tinh thể qua phễu lọc Buchner, rửa tinh thể diosgenin bằng aceton lạnh. Sấy khô tinh thể thu được ở nhiệt độ 60oC.
Lấy lượng tinh thể vừa thu được ở bước 2, thêm methanol vừa đủ ngập, siêu âm trong 15 phút, làm lạnh 24 giờ ở nhiệt độ 0oC sẽ thu được tinh thể diosgenin hình kim màu trắng. Thu tinh thể bằng cách lọc trên phễu lọc Buchner, rửa tinh thể bằng methanol, sấy khô ở nhiệt độ 60oC, ta thu được tinh thể diosgenin.
Bảng 3.10: Khối lượng diosgenin thu được và hiệu suất của quá trình tinh chế dịch chiết
Khối lượng dược liệu (g) 100
Khối lượng cắn chiết (g) 4,9
Khối lượng sản phẩm diosgenin (g) 0,4122
Nhiệt độ nóng chảy (°C) 204
Hiệu suất tinh chế (%) 51,29
Đánh giá chất lượng của sản phẩm diosgenin:
Cảm quan: Sản phẩm diosgenin có dạng bột kết tinh, màu trắng.
Nhiệt độ nóng chảy: 204 – 208°C.
Nhận xét: Sản phẩm diosgenin thu được đạt yêu cầu về cảm quan, nhiệt độ nóng chảy.
Hình 3.12: Diosgenin kết tinh trong aceton
Hình 3.13: Diosgenin kết tinh trong methanol
CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN