2.3.3.1. Lựa chọn đồng dung môi chiết xuất
Nhằm tìm ra đồng dung môi kết hợp với sCO2 cho hàm lượng diosgenin trong dịch chiết cao nhất, cũng như tính chọn lọc của đồng dung môi thông qua hàm lượng diosgenin trong cắn.
Tiến hành
Cân 50g dược liệu đã xử lí cho vào cốc có mỏ 500ml, thêm 50ml đồng dung môi trộn sao cho thấm đều dược liệu, đậy kín ( ≥ 0,5 giờ). Tiến hành chiết xuất dược liệu bằng sCO2 kết hợp với các đồng dung môi trong 2 giờ, tiến hành với 3 mẫu :
Mẫu 1 : Chỉ chiết bằng sCO2
Mẫu 2 : Chiết bằng sCO2 kết hợp với đồng dung môi aceton.
Mẫu 3 : Chiết bằng sCO2 kết hợp với đồng dung môi ethyl acetat.
Tiến hành xử lí dịch chiết và định lượng diosgenin theo mục 2.2.2a.
Xác định tính chọn lọc của các đồng dung môi: Tiến hành lấy dịch chiết của 2 đồng dung môi, cất thu hồi dung môi, xác định khối lượng cắn toàn phần. Xác định hàm lượng diosgenin trong cắn.
2.3.3.2. Áp suất chiết xuất
Tiến hành chiết xuất với đồng dung môi đã lựa chọn dưới các áp suất chiết khác nhau với mục đích tìm ra được áp suất chiết tối ưu mà tại đó tổng lượng diosgenin chiết xuất được là nhiều nhất.
Tiến hành
Cân 50g dược liệu đã xử lí cho vào cốc có mỏ 500ml, thêm 50ml đồng dung môi đã lựa chọn ở trên, trộn sao cho đồng dung môi thấm đều dược liệu, đậy kín (≥ 0,5 giờ). Tiến hành chiết xuất dược liệu bằng sCO2 kết hợp với đồng dung môi ở các áp suất chiết khác nhau trong 2 giờ, tiến hành chiết 5 mẫu ở :
100 ± 10bar, 150 ± 10bar, 200 ± 10bar, 250 ± 10bar, 300 ± 10bar. Tiến hành xử lí dịch chiết và định lượng diosgenin theo mục 2.2.2a.
2.3.3.3. Nhiệt độ chiết xuất
Sử dụng đồng dung môi (đã lựa chọn) ở áp suất tối ưu, tiến hành chiết xuất ở nhiệt độ khác nhau nhằm tìm ra nhiệt độ tại đó nồng độ diosgenin trong dịch chiết là cao nhất.
Tiến hành
Cân 50g dược liệu đã xử lí cho vào cốc có mỏ 500ml, thêm 50ml đồng dung môi đã lựa chọn ở trên, trộn sao cho đồng dung môi thấm đều dược liệu, đậy kín ( ≥ 0,5 giờ). Tiến hành chiết xuất dược liệu bằng sCO2 kết hợp với đồng dung môi dưới áp suất tối ưu tại các nhiệt độ khác nhau trong 2 giờ, tiến hành 3 mẫu tại : 40oC, 50oC, 60oC.
Tiến hành xử lí dịch chiết và định lượng diosgenin theo mục 2.2.2a.
2.3.3.4. Thời gian chiết xuất
Tiến hành chiết xuất dược liệu bằng sCO2 với các điều kiện đã tối ưu (đồng dung môi, áp suất chiết xuất, nhiệt độ chiết xuất), thời gian chiết xuất thay đổi, ứng với mỗi thời gian thực hiện 1 mẫu, để đưa ra được những khảo sát cơ bản về sự ảnh hưởng của thời gian chiết xuất đến hiệu suất chiết xuất.
Tiến hành
Cân 50g dược liệu đã xử lí cho vào cốc có mỏ 500ml, thêm 50ml đồng dung môi đã lựa chọn ở trên, trộn sao cho đồng dung môi thấm đều dược liệu, đậy kín ( ≥ 0,5 giờ). Chiết xuất dược liệu bằng sCO2 kết hợp với đồng dung môi tại điều kiện áp suất, nhiệt độ tối ưu, tiến hành 5 mẫu: 1 giờ, 2 giờ, 3 giờ, 4 giờ, 5giờ.
CHƯƠNG 3: THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN