a) Chuẩn bị dược liệu
Thân rễ Nần vàng sau khi thu hoạch, rửa bằng nước cho sạch, loại bỏ rễ con, thái thành lát mỏng, sấy tới khô trong tủ sấy ở nhiệt độ 60oC (chú ý: Tránh sấy ở nhiệt độ trên 70oC vì sẽ khiến hàm lượng diosgenin bị giảm mạnh [12]). Xay nhỏ dược liệu khô ta thu được bột dược liệu Nần vàng.
Thủy phân bột dược liệu Nần vàng:
. Cân 1kg bột dược liệu Nần vàng vừa thu được, cho vào bình cầu cỡ lớn, có gắn ống sinh hàn, thêm vừa đủ dung dịch acid H2SO4 10% qua ống sinh hàn cho ngập dược liệu, đun hồi lưu trong 4 giờ. Để nguội bình phản ứng, lấy bột dược liệu sau thủy phân rửa qua bằng nước để loại bớt acid H2SO4, kiềm hóa bột dược liệu bằng dung dịch Na2CO3 bão hòa tới trung tính, thử bằng giấy quì tím. Sấy khô bột dược liệu vừa thu được, ta thu được bột dược liệu đã xử lý, là nguyên liệu để chiết xuất diosgenin.
b) Chiết xuất bằng Soxhlet
Cân 1 lượng dược liệu đã xử lý, gói lại bằng giấy lọc. Chuyển gói dược liệu vào trong Soxhlet, tiến hành chiết xuất diosgenin. Sử dụng dung môi n-hexan để chiết xuất.
c) Chiết xuất bằng dung môi siêu tới hạn
Cân 1 lượng dược liệu đã xử lý, ngâm trương nở dược liệu trong 1 lượng đồng dung môi (tùy theo điều kiện khảo sát) trong khoảng 30 phút – 1 giờ.
Tiến hành chiết xuất bằng dung môi siêu tới hạn trong các điều kiện khảo sát cụ thể về đồng dung môi, áp suất, nhiệt độ, thời gian … Dịch chiết thu vào bình nón có nút. Cất quay loại dung môi ta thu được cắn chiết.