tumefaciens
* Thớ nghiệm 6: Lựa chọn chủng vi khuẩn thớch hợp cho việc chuyển gen vào khoai tõy
CTTN CT1 CT4 CT5 CT6
Chủng VK Đối chứng C58 EHA105 AGL-1
- Sử dụng cỏc chủng C58, EHA105, AGL-1 mang vector pCAMBIA1301 cú mật độ vi khuẩn OD600 = 0,8-1,0
- Mẫu thớ nghiệm : lỏ, đoạn thõn - 20 đoạn thõn/ 20 mẫu lỏ / CTTN - Nhuộm gus sau 3 ngày đồng nuụi cấy - Quan sỏt, ghi kết quả, chụp ảnh cỏc CTTN.
CTTN CT1 CT2 CT3 Chủng VK Đối chứng AA43 AA39 -
- Sử dụng cỏc chủng AA43: pCAMBIA1301; AA39: p6d35S-GUS cú OD600 = 0,8-1,0
- Mẫu thớ nghiệm : lỏ , đoạn thõn - 20 đoạn thõn/ 20 mẫu lỏ / CTTN - Nhuộm gus sau 3 ngày đồng nuụi cấy. - Quan sỏt, ghi kết quả, chụp ảnh cỏc CTTN.
*Thớ nghiệm 8: Đỏnh giỏ ảnh hưởng của mật độ vi khuẩn (OD600) lờn tỉ lệ biểu hiện tạm thời của gen gus
CTTN CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6
OD600 Đối chứng 0,5 0,8 1,0 1,5 2,0 Sử dụng chủng Agrobacterium (kết quả của TN 6, 7) làm vật liệu chuyển gen.
- Mẫu thớ nghiệm : lỏ , đoạn thõn - 20 đoạn thõn/ 20 mẫu lỏ / CTTN - Nhuộm gus sau 3 ngày đồng nuụi cấy - Quan sỏt, ghi kết quả, chụp ảnh cỏc CTTN.
*Thớ nghiệm 9: Nghiờn cứu ảnh hưởng của hàm lượng Acetosyringone (AS) lờn tỷ lệ biểu hiện tạm thời của gen gus
CTTN CT1 CT2 CT3 CT4 CT5
AS (uM) 0 50 100 200 400
- Sử dụng chủng Agrobacterium (kết quả của TN 6, 7 và 8) - Mẫu thớ nghiệm: lỏ , đoạn thõn
- 20 đoạn thõn/ 20 mẫu lỏ / CTTN.
- Mụi trường lõy nhiễm và đồng nuụi cấy cú bổ sung AS với cỏc nồng độ khỏc nhau (CT1-CT5)
- Quan sỏt , ghi kết quả, chụp ảnh cỏc CTTN.