nhân tạo
Các chủng vi khuẩn ựược nuôi cấy trên môi trường Wakimoto. Thành phần môi trường gồm: Khoai tây 300g; ựường saccarose 15g; pepton 5g; agar 17g; Na2HPO4.12H2O 2g; Ca2(NO3)2.4H2O 0,5g; nước cất 100ml; pH 6,8 - 7,0. Môi trường ựược hấp khử trùng ở nhiệt ựộ 1210C trong ống nghiệm thời gian 20
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 32 phút, tạo mặt thạch nghiêng.
Sau 48h, vi khuẩn nuôi cấy mọc. Sau ựó lấy ba vòng vi khuẩn hoà tan với 10ml nước cất cho ựến khi dung dịch có nồng ựộ 108 -109 tế bào/ ml H2O. đem dung dịch ựó ựi lây nhiễm. Trước khi lây nhiễm, tiến hành lây thử trên dòng nhiễm chuẩn IR24 ựể thử ựộc tắnh của vi khuẩn sau bảo quản.
Lây nhiễm nhân tạo bằng phương pháp cắt ựầu lá khi lúa bắt ựầu có ựòng, ựây là thời kỳ cây lúa mẫn cảm nhất với bệnh. Cắt ựầu lá dài 3-5cm. Cắt toàn bộ lá xanh trên một cây, mỗi cây một chủng.
đánh giá khả năng kháng nhiễm của các mẫu giống nghiên cứu bằng cách ựo chiều dài vết bệnh sau 18 ngày lây nhiễm theo phương pháp của Furuya và cs (2003)
+ Chiều dài vết bệnh < 8cm: kháng (R).
+ Chiều dài vết bệnh 8 - 12cm: Nhiễm vừa (M). + Chiều dài vết bệnh > 12cm: Nhiễm nặng (S).
Danh sách các chủng vi khuẩn lây nhiễm nhân tạo TT Isolate Phân lập từ
giống địa ựiểm thu thập mẫu Chủng
1 HAU01043 TN13-1 Hà Nội 1
2 HAU02036-1 Nếp tân Thuận Châu- Sơn La 2
3 HAU02008-3 Nhị ưu-838 Quỳnh Giang, Quỳnh Lưu, Nghệ An 3
4 HAU01008-1 Tẻ ựỏ Hải Dương 4
5 HAU02013-1 Khang dân Diễn Kỳ, Diễn Châu, Nghệ An 5 6 HAU02034-6 Nhị ưu-838 Cường Thịnh, Yên bình, Yên Bái 6 7 HAU02019-1 Q5 Vinh Hồng, Bình Giang, Hải Dương 7 8 HAU02020-1 Nếp thơm Vinh Hồng, Bình Giang, Hải Dương 8
9 HAU02037-1 IR64 Thuận Châu, Sơn La 9
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp 33