thực nghiệm
2.4.3.1. Thiết kế nghiên cứu: thử nghiệm mở, so sánh trước sau, có đối chứng.
* 40 chuột được chia thành 2 lô, ngẫu nhiên:
- Lô 1: gồm 20 con bôi kem “LX1” - Lô 2: gồm 20 con bôi kem tá dược.
2.4.3.2. Quy trình thực nghiệm được tiến hành qua các bước sau:
* Gây mô hình gãy kín xương đùi trên thực nghiệm (được giám sát bởi 01 Thạc sỹ chuyên khoa Chấn thương Chỉnh hình và tiến hành bởi 01 BS chuyên ngành Ngoại khoa) (Phụ lục)
* Tiến hành bôi thuốc, theo dõi kết quả:
Lô nghiên cứu (lô 1): bôi kem “LX1” toàn bộ chu vi đùi chuột bằng 1g thuốc/chuột/lần. Ngày bôi 2 lần sáng (8h00), chiều (15h00).
Lô chứng (lô 2): bôi kem tá dược toàn bộ chu vi đùi chuột bằng 1g thuốc/chuột/lần. Ngày bôi 2 lần sáng (8h00), chiều (15h00).
Sau khi bôi thuốc băng ngoài bằng 1 lớp gạc mỏng. Bôi thuốc liên tục trong 4 tuần. Cạo lông vùng đùi có tổn thương trước khi bôi kem.
* Các chỉ tiêu nghiên cứu:
Theo dõi, quan sát chuột hàng ngày đểđánh giá tình trạng ăn uống, vận động của chi gãy, mức độ sưng nề (so sánh hai bên), các bất thường toàn thân và tại chỗ bôi kem.
- Nhiệt độ da tại vùng gãy: theo dõi ở thời điểm ngay trước mổ, ngay sau mổ và hàng ngày sau mổ. Sử dụng nhiệt kế hồng ngoại Rossmax của hãng Rossmax International Ltd. Switzerland.
- Cân nặng: theo dõi ở thời điểm ngay trước mổ, ngay sau mổ, sau mổ ngày thứ 1, 2, 3, 4 và sau 1 tuần. Sử dụng cân đồng hồ của công ty TNHH Nhơn Hòa, thành phố Hồ Chí Minh sản xuất, cân nặng tính bằng gram (g).
- Độsưng nề: theo dõi ở các thời điểm sau mổ, sau mổ 1 ngày, 2 ngày, 4 ngày, 1 tuần. Sử dụng thước dây chia nhỏđơn vị milimet (mm).
- Độ hoạt động: theo dõi hoạt động hàng ngày. Đánh giá mức độ vận động chi gãy:
+ Mức độ 1: vận động như bên lành + Mức độ 2: vận động gần như bên lành
Sơ đồ 2.1. Quy trình nghiên cứu trên thực nghiệm
Nhiệt độ
Bôi kem “LX1” Bôi kem tá dược
40 chuột
- Chụp X quang đùi phải sau điều trị 1 tuần, 2 tuần, 3 tuần, 4 tuần. (Thời gian tính số tuần: nếu số ngày theo dõi vượt quá 3 ngày thì tính vào tuần tiếp theo, nếu số ngày theo dõi vượt quá ≤ 3 ngày thì tính vào tuần trước). Chụp X quang bên tổn thương ở thời điểm ngay sau mổ, sau mổ 1 tuần, 2 tuần, 3 tuần.
Đánh giá can xương:
+ Can vân vũ: can dạng đám mây, chưa đồng đều, còn khe gãy + Can đồng nhất: can xương đều hoàn toàn, khe gãy mờ.
- Xét nghiệm mô bệnh học: tiến hành ở thời điểm sau mổ 1 tuần, 2 tuần, 3 tuần. Sau điều trị mỗi tuần, chọn ngẫu nhiên mỗi nhóm 5 con chuột: lấy mẫu đùi có vùng xương gãy gửi xét nghiệm mô bệnh học đểđánh giá đậm độ chất khoáng, mô xơ, mô sụn, tế bào (tế bào xương, tế bào sụn, nguyên bào sụn, nguyên bào xương, chất căn bản, tế bào viêm), mạch tân tạo... Xét nghiệm mô bệnh học được tiến hành tại Trung tâm nghiên cứu và phát hiện sớm ung thư, địa chỉ 58 phố Nguyễn Quyền, Hai Bà Trưng, Hà Nội. Kết quảđược đọc bởi Chuyên gia Giải phẫu bệnh (PGS.TS. Lê Đình Roanh).
- Quan sát tình trạng nhiễm trùng tại chỗ: + Loét, chảy dịch, chảy mủ, xuất hiện giả mạc ? + Ban chẩn, nốt sẩn, mẩn đỏ ? ...