0
Tải bản đầy đủ (.pdf) (148 trang)

Phương phỏp sắc ký khớ

Một phần của tài liệu NGHIÊN CỨU TỐI ƯU HOÁ CÁC ĐIỀU KIỆN ĐỂ TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ AXIT AMIN TRONG THỰC PHẨM BẰNG SẮC KHÍ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (Trang 31 -31 )

Cụng thức tổng quỏt của một axớt amin như sau:

1.4.5.2. Phương phỏp sắc ký khớ

Sắc ký khớ (Gas chromatography: GC) là một kỹ thuật tỏch và phõn tớch đồng thời cỏc chất trong một hỗn hợp mẫu ở trạng thỏi khớ, phương phỏp này rất phỏt triển trong những năm gần đõy sử dụng để phõn tớch định tớnh và định lượng cỏc chất hữu cơ trong một hỗn hợp mẫu phức tạp.

Tỏc giả Y. C. Fiamegos, C. D. Stalikas [82] đó tỏch và xỏc định được 19 axit amin trong nước tiểu, nước hoa quả và bột mỡ bằng phương phỏp sắc ký khớ với detectơ khối phổ (GC/MS) và detectơ ion húa ngọn lửa (GC/FID). Theo phương phỏp này, cỏc axớt amin tự do được chuyển thành dạng pentaflorobenzyl nhờ xỳc tỏc chuyển pha tetrabutylamoni bromua, được dẫn xuất húa thành dạng dễ bay hơi với pentaflorobenzyl bromid, chiết bằng diclormetan rồi phõn tớch bằng phương phỏp GC/MS và GC/FID. Cũn đối với cỏc axớt amin liờn kết với protein sẽ được phõn tớch sau bước thủy phõn bằng NaOH 5M. Giới hạn phỏt hiện của phương phỏp nằm trong khoảng 0,7 - 2,3 pM với GC/MS và từ 1,7 - 6,9 pM với GC/FID.

Cũng với detectơ khối phổ nối tiếp, nhưng tỏch bằng hệ thống sắc ký lỏng mao quản, tỏc giả Y. Song và cộng sự [81] đó tỏch và xỏc định được 12 axớt amin được dẫn xuất với 7-floro-4-nitrobenzoxadiazol trong cỏc mẫu sinh học. Quỏ trỡnh dẫn xuất được thực hiện ở nhiệt độ cao, nồng độ axớt amin đem dẫn xuất cú thể thấp tới 2,5 ì 10-7 M. Độ thu hồi của phương phỏp này đạt trờn 97%.

Tỏc giả H. Ali và cộng sự [36] đó tỏch và định lượng được cỏc đồng phõn hỡnh học D, L của cỏc axớt amin trong thuốc lỏ và cỏc sản phẩm thuốc lỏ sử dụng sắc ký khớ khối phổ (GC-SIM-MS). Cỏc axớt amin được tỏch ra khỏi cỏc mẫu thuốc lỏ bằng dung dịch metanol 70% và được làm sạch qua cột trao đổi cation. Sau đú, chỳng được chuyển thành dạng este N(O)-pentafloropropionyl axớt amin (2)-propyl và cỏc đồng phõn hỡnh học được tỏch và định lượng bằng GC-SIM-MS trờn cột mao quản Chirasil-L-Val.

Phương phỏp sắc ký khớ là một phương phỏp tỏch rất phỏt triển và cũng đó được nhiều tỏc giả trờn thế giới ỏp dụng để tỏch và xỏc định axớt amin trong một số đối tượng khỏc nhau, nhưng để ỏp dụng phõn tớch axớt amin thụng dụng là rất phức tạp và giỏ thành cao do axớt amin là hợp chất khụng dễ bay hơi và khụng tan tốt trong cỏc dung mụi hữu cơ nờn quỏ trỡnh thực hiện khỏ phức tạp và tốn dung mụi. Ngoài ra khớ mang là Heli là rất tốn kộm nờn phương phỏp sắc ký khớ khụng được ỏp dụng rộng rói trong tỏch và xỏc định axớt amin.

Một phần của tài liệu NGHIÊN CỨU TỐI ƯU HOÁ CÁC ĐIỀU KIỆN ĐỂ TÁCH VÀ XÁC ĐỊNH MỘT SỐ AXIT AMIN TRONG THỰC PHẨM BẰNG SẮC KHÍ LỎNG HIỆU NĂNG CAO (Trang 31 -31 )

×