phát hiện kháng thể)?
Phản ứng Elisa cạnh tranh gồm 2 loại: để phát hiện kháng nguyên và để phát hiện kháng thể. a. Elisa cạnh tranh phát hiện kháng thể:
-Các bước tiến hành:
+Gắn kháng thể đã biết lên giá thể, ủ 1 thời gian, rửa nước ^ loại bỏ kháng nguyên thừa. +Cho kháng thể nghi vào, để 1 thời gian, rửa nước.
+Cho kháng thể chuẩn đặc hiệu với kháng nguyên đã gắn enzyme, để 1 thời gian, rửa nc. +Cho cơ chất đặc hiệu với enzyme, cho chất dừng phản ứng vào.
-Đoc kết quả:
+Phản ứng dương tính: Phức hợp ko xuất hiện màu do kháng thể nghi phù hợp với kháng nguyên đã biết nên cạnh tranh sự kết hợp của kháng thể chuẩn có gắn enzyme.
+Phản ứng âm tính: phức hợp xuất hiện màu đăc trưng do kháng thể nghi ko phù hợp với kháng nguyên chuẩn nên bị rửa trôi. Kháng thể đã biết có gắn enzyme trực tiếp kết hợp với kháng nguyên đã biết khi cho cơ chất phù hợp vào sẽ tạo màu.
b. Elisa canh tranh phát hiện kháng nguyên:
-Các bước tiến hành:
+Gắn kháng thể đã biết lên giá thể, ủ 1 thời gian, rửa nước.
+Cho kháng thể nghi vào, để 1 thời gian, rửa nc nhằm loại bỏ kháng nguyên thừa. +Cho kháng nguyên đã biết có gắn enzyme vào, để 1 thời gian, rửa nước.
+Cho cơ chất đặc hiệu với enzyme, để 1 thời gian. Cho chất dừng phản ứng vào.
-Đoc kết quả trên quang phổ kế:
+Phản ứng dương tính: Phức hợp ko xuất hiện màu do kháng nguyên nghi phù hợp với kháng thể đã biết nên cạnh tranh sự kết hợp của kháng nguyên chuẩn có gắn enzyme.
38
thể nên bị rửa trôi. Kháng nguyên đã biết có gắn enzyme trực tiếp kết hợp với kháng thể gắn trên kit. Khi cho cơ chất phù hợp vào sẽ tạo màu.