2.3.1. Quản lý các thông số môi trường
Hằng ngày xi-phông thay 30 - 50% lượng nước mới, các yếu tố môi trường như nhiệt ựộ, pH, oxy hoà tan, NH3+ và NO2- ựược duy trì ổn ựịnh trong suốt quá trình thắ nghiệm. Kiểm tra tỷ lệ sống và quan sát tình trạng sức khoẻ của cá .
2.3.2. Chế ựộ cho ăn
- Trước khi bố trắ thắ nghiệm, nguồn thức ăn sống gồm luân trùng (mật ựộ 20 con/ml), bổ sung 2 loại vi tảo Isochrysis galbana (50.000 tế bào/ml) và
Nannochloropsis oculata (50.000 tế bào/ml) theo tỉ lệ 1:1 ựược chuẩn bị sẵn ở tất cả
các lô thắ nghiệm. Mật ựộ Artemia khi sử dụng là 2 con/ml.
- Ở thắ nghiệm 2, từ ngày thứ 0 ựến ngày thứ 6 cho ăn toàn bộ luân trùng. đến ngày thứ 7 (thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn tối ưu từ kết quả của thắ nghiệm 1) bắt ựầu chuyển ựổi sang Artemia theo Bảng 2.3.
- Chế ựộ cho ăn ở 2 tuần ựầu tiên là 2 lần 1 ngày (9.00 và 15.00). Sau 2 tuần, chế ựộ cho ăn tăng thêm 1 lần vào lúc 12.00 ựể ựáp ứng nhu cầu ngày càng cao của ấu trùng.
- Trước khi cho ăn, số lượng luân trùng và Artemia còn lại của lần ăn trước ựược ựếm dưới kắnh hiển vi.
2.4. Phương pháp thu thập và xử lý số liệu
2.4.1. Các thông số môi trường trong hệ thống nuôi
Các yếu tố môi trường trong các hệ thống nuôi ựược ựo ựạc hàng ngày vào buổi sáng và chiều.
- Nhiệt ựộ và pH: ựo bằng thiết bị cầm tay pH ISE meter (HACH, sensION6), ựộ chắnh xác 1oC.
- độ muối: ựo bằng khúc xạ kế (Atago model S/Mill-E), ựộ chắnh xác 1Ẹ
- Hàm lượng nitrite và ammonia: xác ựịnh bằng Nitrit Ờ Test (Aqua Nite) và Ammonium Ờ Test (Aqua AM) sản xuất tại Thái Lan.
- Hàm lượng oxy hòa tan: sử dụng máy ựo DO (HACH, sensION6).
- Ammonia tổng số (TAN): ựược xác ựịnh bằng phương pháp phenolhypochlorite (Solórzano, 1969). Soi màu bằng thiết bị ựo ảnh phổ (Spectrophotometer) Hach DR/2000.
- Nitrite (NO2-N): ựược xác ựịnh bằng phương pháp nhuộm Azo (Strickland và Parsons, 1977). Kỹ thuật soi màu như trên.
2.4.2. Xác ựịnh tốc ựộ tăng trưởng
- Chỉ tiêu về chiều dài chuẩn (SL): là chiều dài ựược ựo từ mõm cá ựến gốc vây ựuôi.
- Tốc ựộ sinh trưởng ựặc trưng về chiều dài chuẩn (SGRSL): xác ựịnh theo công thức:
Trong ựó: SGRSL: tốc ựộ tăng trưởng ựặc trưng về chiều dài chuẩn (% ngày).
L1: chiều dài chuẩn của cá ở thời ựiểm t1 (mm). L2: chiều dài chuẩn của cá ở thời ựiểm t2 (mm). Cá ựược ựo bằng thước có ựộ chắnh xác 1mm.
- Chỉ tiêu về khối lượng: là khối lượng của cá ở thời ựiểm kết thúc thắ nghiệm - Tốc ựộ sinh trưởng ựặc trưng về khối lượng: xác ựịnh theo công thức
Trong ựó: SGRw: tốc ựộ tăng trưởng ựặc trưng về khối lượng (% ngày) W1: khối lượng cá ở thời ựiểm t1 (mg).
W2: khối lượng cá ở thời ựiểm t2 (mg). Cá ựược cân bằng cân ựiện tử có ựộ chắnh xác 0,01g.
100 SGR 1 2 1 2 SL x t t LnL LnL − − = 100 SGR 1 2 1 2 w x t t LnW LnW − − =
Phương pháp lấy mẫu cá: gây mê cá bằng dung dịch hóa chất MS-222 10% và dùng giấy thấm ựể loại bỏ hết nước trước khi cân, ựo.
2.4.3. Xác ựịnh tỷ lệ sống của cá
Tỷ lệ sống ựược xác ựịnh theo công thức sau:
S = (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Sự Scx 100
Trong ựó S: Tỷ lệ sống của cá (%).
Sc: Số cá còn lại khi kết thúc thắ nghiệm (con). Sự: Số cá ban ựầu (con).
Tỷ lệ sống của cá ựược xác ựịnh bằng phương pháp ựếm trực tiếp
2.4.4. Phương pháp xử lắ số liệu
Số liệu thu thập ựược xử lý trên phần mềm MS Excel và SPSS 15.0 for window. Sử dụng phân tắch phương sai một yếu tố (one-way ANOVA) ựể ựánh giá ảnh hưởng của các thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn khác nhau lên tốc ựộ tăng trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng cá khoang cổ cam. So sánh sự sai khác của các giá trị trung bình sau phân tắch phương sai (Post Hoc Test) bằng phương pháp kiểm ựịnh Duncan với ựộ tin cậy 95%.
CHƯƠNG 3 : KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.1. Thắ nghiệm ảnh hưởng của thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn từ luân trùng sang Artemia lên tốc ựộ tăng trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng cá khoang trùng sang Artemia lên tốc ựộ tăng trưởng và tỷ lệ sống của ấu trùng cá khoang cổ cam giai ựoạn mới nở ựến 30 ngày tuổi
3.1.1 Một số yếu tố môi trường trong hệ thống bể thắ nghiệm
Các giá trị môi trường của hệ thống nuôi dao ựộng trong suốt thời gian thắ nghiệm ựược trình bày ở Bảng 3.1.
Bảng 3.1: Một số yếu tố môi trường trong hệ thống bể nuôi Nhiệt ựộ (oC) pH độ mặn Ẹ NH3+ (mg/l) NO2- (mg/l)
Oxy hoà tan (mg/l) 30 Ờ 31 8,1 Ờ 8,3 30 - 32 0 Ờ 0,01 0 Ờ 0,1 5 Ờ 6
Trong quá trình thắ nghiệm, hằng ngày các bể nuôi ựược xi phông, thay nước và vệ sinh nên lượng nước trong bể thường xuyên ựược bổ sung nước mới. Vì vậy, các yếu tố nhiệt ựộ, pH, ựộ mặn luôn luôn thay ựổi. Tuy nhiên, sự dao ựộng của pH và nhiệt ựộ không lớn. pH dao ựộng từ 8,1 Ờ 8,3, nhiệt ựộ dao ựộng từ 30 Ờ 31oC. Hàm lượng oxy hoà tan không có sự dao ựộng lớn, duy trì ở mức 5 Ờ 6 mg/l.
Các chỉ tiêu này tương tự nhau ở tất cả các lô thắ nghiệm do chế ựộ chăm sóc hằng ngày của các lô như nhau. Các yếu tố môi trường trong các bể nuôi tương ựối ổn ựịnh, nằm trong giới hạn thắch hợp cho sự sinh trưởng cá khoang cổ [8, 48, 101, 104]. Trong suốt quá trình nuôi, không có những biến ựộng ựáng kể có thể gây ảnh hưởng ựến kết quả thắ nghiệm.
3.1.2. Ảnh hưởng của thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn khác nhau ựến tăng trưởng của ấu trùng cá khoang cổ cam. trưởng của ấu trùng cá khoang cổ cam.
3.1.2.1. Chỉ tiêu về chiều dài
Ấu trùng với chiều dài ban ựầu là 3,250 ổ 0,189mm, sau 30 ngày ương ựạt chiều dài trung bình: 9,93 ổ 0,24mm.
Kết quả nghiên cứu cho thấy thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn ảnh hưởng rõ rệt lên chiều dài của ấu trùng cá khoang cổ cam (Hình 3.1). Trong ựó, ấu trùng ựược cho ăn Artemia vào ngày thứ 7 cho chiều dài trung bình cao nhất (10,47 ổ 0,23mm) và khác biệt có ý nghĩa (P<0,05) so với thời ựiểm cho ăn ở các ngày thứ 9, 11 và 13 (lần lượt
là 9,86 ổ 0,07; 9,47 ổ 0,13 và 8,85 ổ 0,56 mm). Tuy nhiên, không có sự khác biệt về chiều dài của ấu trùng khi cho ăn vào ngày thứ 5 và 7.
6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 11.00 12.00 5 NT 7 NT 9 NT 11 NT 13 NT
NGÀY BẮT đẦU CHUYỂN đỔI
C H IỀ U D À I C H U Ẩ N ( m m )
Hình 3.1: Ảnh hưởng của thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn lên chiều dài của ấu trùng.
*
Các chữ cái khác nhau trên ựầu các cột thể hiện sự khác biệt có ý nghĩa (P < 0,05).
3.1.2.2. Khối lượng 0.01 0.025 0.04 0.055 0.07 0.085 5 NT 7 NT 9 NT 11 NT 13 NT
NGÀY BẮT đẦU CHUYỂN đỔI
K H Ố I L Ư Ợ N G ( g )
Hình 3.2: Ảnh hưởng của thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn lên khối lượng của ấu trùng.
* (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Các chữ cái khác nhau trên ựầu các cột thể hiện sự khác biệt có ý nghĩa (P < 0,05).
bc c ab a ab a a a ab b
Ấu trùng với khối lượng ban ựầu là 0,00083 ổ 0,00001g, sau 30 ngày ương ựạt trung bình: 0,044 ổ 0,003g.
Kết quả theo dõi (Hình 3.2) cho thấy: khối lượng của cá sau 30 ngày ương ở các nghiệm thức có xu hướng tương tự với chỉ tiêu về chiều dài, cụ thể là khối lượng trung bình của ấu trùng ựược cho ăn Artemia ựạt cao nhất vào ngày thứ 7 (0,067 ổ 0,006g), giảm dần và ựạt thấp nhất ở ngày thứ 13 (0,044 ổ 0,006g), tuy nhiên không có sự khác biệt có ý nghĩa giữa nghiệm thức cho ăn ngày thứ 7 và 9.
3.1.2.3. Tốc ựộ tăng trưởng ựặc trưng
Ớ Tốc ựộ tăng trưởng ựặc trưng về chiều dài chuẩn (SGRSL)
Tốc ựộ tăng trưởng ựặc trưng về chiều dài của cá 30 ngày tuổi ựạt trung bình 3,71 ổ 0,08 %/ngày. Kết quả nghiên cứu (Hình 3.3) cho thấy ảnh hưởng ựáng kể của các thời ựiểm cho ăn Artemia khác nhau lên tăng trưởng ựặc trưng về chiều dài của ấu trùng. Ấu trùng cho ăn Artemia vào ngày thứ 7 cho tăng trưởng ựặc trưng cao nhất (4,07 ổ 0,07 %/ngày) và khác biệt có ý nghĩa so với ngày thứ 11 (3,56 ổ 0,05 %/ngày) và ngày thứ 13 (3,33ổ0,21 %/ngày) nhưng không khác biệt (P<0,05) so với ngày thứ 5 (3,89 ổ 0,11 %/ngày) và ngày thứ 9 (3,7 ổ 0,02 %/ngày).
0 1 2 3 4 5 5 NT 7 NT 9 NT 11 NT 13 NT
NGÀY BẮT đẦU CHUYỂN đỔI
S G RS L (% /n g à y )
Hình 3.3. Ảnh hưởng của thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn lên tốc ựộ tăng trưởng ựặc trưng về chiều dài của ấu trùng.
*
Các chữ cái khác nhau trên ựầu các cột thể hiện sự khác biệt có ý nghĩa (P < 0,05)
bc
bc
a ab
Ớ Tốc ựộ tăng trưởng ựặc trưng về khối lượng (SGRW)
Tăng trưởng ựặc trưng về khối lượng của ấu trùng cá khoang cổ cam 30 ngày tuổi ựạt trung bình 13,80 ổ 0,17 %/ngày. Sự sai khác có ý nghĩa (P < 0.05) về SGRW giữa các nghiệm thức ựược trình bày cụ thể trong Hình 3.4. SGRW cao nhất ựạt ựược ở nghiệm thức cho ăn Artemia ở ngày thứ 7 (14,62 ổ 0,29 %/ngày) và thấp nhất ở ngày thứ 13 (13,21ổ0,41 %/ngày). Không có sự khác biệt có ý nghĩa giữa 3 nghiệm thức cho ăn ở ngày thứ 5 (13,38 ổ 0,18 %/ngày), 9 (14,12 ổ 0,07 %/ngày) và 11 ngày tuổi (13,69 ổ 0,19 %/ngày). 10.00 11.00 12.00 13.00 14.00 15.00 16.00 5 NT 7 NT 9 NT 11 NT 13 NT
NGÀY BẮT đẦU CHUYỂN đỔI
S G R w ( % /n g à y )
Hình 3.4. Ảnh hưởng của thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn lên tốc ựộ tăng trưởng ựặc trưng về khối lượng của ấu trùng.
*
Các chữ cái khác nhau trên ựầu các cột thể hiện sự khác biệt có ý nghĩa (P < 0,05).
Từ các kết quả phân tắch trên, có thể kết luận rằng: thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn khác nhau có ảnh hưởng rõ rệt ựến chiều dài, khối lượng và tốc ựộ tăng trưởng ựặc trưng của ấu trùng cá khoang cổ cam.
Thời ựiểm cho ăn bằng Artemia tốt nhất cho sinh trưởng của ấu trùng cá khoang cổ cam bắt ựầu từ ngày thứ 7 sau khi nở, và chuyển hoàn toàn sang nauplii của Artemia vào ngày thứ 9. Kết quả này tương tự với nghiên cứu của Onal et al., (2008) [79] kết luận rằng: ấu trùng của Amphiprion percula trước khi nở ựã có ống tiêu hóa khá hoàn thiện, do ựó sẵn sàng tiếp nhận và tiêu hóa luân trùng ngay sau khi nở, và
ab
bc
a ab
chuyển sang sử dụng hoàn toàn nauplii của Artemia 10 ngày sau khi nở mà vẫn ựảm bảo ựược nhu cầu dinh dưỡng cho tăng trưởng của ấu trùng.
Thời ựiểm chuyển ựổi càng muộn (ngày thứ 9, 11 và 13 sau khi nở) thì tốc ựộ tăng trưởng của ấu trùng càng giảm. Theo Hoff (1996) [48], cỡ miệng của ấu trùng càng lớn theo sự tăng trưởng của ấu trùng, có lẽ vì vậy mà luân trùng trở nên quá nhỏ bé và không còn phù hợp so với cỡ miệng của ấu trùng ở 9, 11 và 13 ngày tuổi. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Theo Nguyễn Văn Triều và cộng sự (2008) [106], sự chọn lựa thức ăn là một trong những ựặc ựiểm rất quan trọng của tập tắnh ăn của cá. Sự chọn lựa thức ăn ở ấu trùng cá chịu ảnh hưởng bởi rất nhiều nhân tố có liên quan ựến các ựặc ựiểm của ấu trùng và cả con mồi. Mối liên hệ giữa kắch thước con mồi và cỡ miệng ựược xem là yếu tố quyết ựịnh khả năng bắt mồi của cá [54, 83, 96, 98]. Cỡ miệng xác ựịnh kắch cỡ tối ựa và thuận lợi nhất cho việc bắt mồi.
Trong suốt giai ựoạn ấu trùng, tốc ựộ tăng trưởng của chúng rất cao vì thế việc ựiều chỉnh con mồi phù hợp với cỡ miệng ngày càng lớn của ấu trùng là cần thiết [16]. để xác ựịnh cỡ mồi phù hợp với cỡ miệng của ấu trùng (chiều cao của miệng), người ta quan tâm ựến chiều rộng hơn là chiều dài của con mồi, bởi vì ấu trùng cá thường nuốt phần ựầu con mồi trước tiên [52].
Theo Dabrowski và Bardega (1984) [18], kắch cỡ con mồi (chiều rộng của cơ thể) không nên vượt quá 20% chiều cao của miệng cá. Trong khi ựó, Hoff (1996) [48] lại cho rằng kắch cỡ có thể chiếm ựến 50% vẫn chấp nhận ựược. Nghiên cứu của Cunha và Planas (1999) [16] trên ấu trùng cá hồi kết luận rằng: kắch cỡ con mồi thắch hợp nhất cho tốc ựộ tăng trưởng của ấu trùng cá hồi chiếm 36ổ1% so với chiều cao miệng ấu trùng.
Trong thắ nghiệm này, tác giả ựã xác ựịnh cỡ miệng của ấu trùng cá khoang cổ cam mới nở theo công thức toán học của Shirota (1970) [83] là 368 ổ 42ộm (n=30) (tương ứng với chiều dài chuẩn là 3.250mm), do ựó dễ dàng tiếp nhận luân trùng (B.
plicatilis) với chiều cao thân chiều rộng là 100 ổ 5ộm chiếm khoảng 28% so với cỡ
miệng của ấu trùng. Kết quả này tương tự với nghiên cứu của Cunha và Planas (1999) [16] trên ấu trùng cá hồi với chiều cao miệng là 394ộm tương ứng với chiều dài tiêu chuẩn là 3,8mm rất ưa thắch con mồi có kắch cỡ 140ộm (chiếm 36% cỡ miệng).
Iglesias et al., (1994) [53] ựề xuất kắch cỡ con mồi phù hợp 60-100ộm cho giai ựoạn ăn ựầu tiên của ấu trùng cá hồi. Các tác giả này cho rằng ấu trùng với chiều dài toàn
thân từ 4,3Ờ5,0mm, con mồi thắch hợp nhất là luân trùng (B. plicatilis), từ 5,0Ờ6,0mm kắch cỡ con mồi sẽ là trung bình giữa luân trùng và nauplii của Artemia. Trong khi ựó, ấu trùng cá hanh Pagrus auratus [55] với chiều dài toàn thân 4,2-4,9mm sẽ lựa chọn luân trùng, ở kắch thước 5,3mm sẽ chọn lựa nauplii của Artemia [55]. Có lẽ ở thời ựiểm 7 ngày tuổi, kắch cỡ nauplii của Artemia (480 ổ 20ộm) là thắch hợp nhất với cỡ miệng của ấu trùng cá khoang cổ cam, do ựó mà tốc ựộ tăng trưởng của chúng ựạt cao nhất so với các nghiệm thức ở 5, 9, 11 và 13 ngày tuổi.
Một khi ấu trùng có thể tiếp nhận Artemia hay nói cách khác là chuyển sang sử dụng con mồi có kắch cỡ lớn hơn, chúng sẽ nhanh chóng sử dụng hoàn toàn con mồi có kắch cỡ lớn hơn ựể thỏa mãn nhu cầu năng lượng ngày càng lớn của ấu trùng. Qua quan sát, theo dõi ở thắ nghiệm tác giả thấy rằng ấu trùng cá khoang cổ cam cần 2 ngày ựể chuyển ựổi hoàn toàn sang nauplii của Artemia. Trong khi ựó, ấu trùng cá hanh cần 3 ngày ựể chuyển ựổi hoàn toàn sang nauplii của Artemia [55].
Trong tự nhiên, ấu trùng thường tiêu hóa một số lượng lớn những sinh vật với kắch cỡ rất bé so với kắch cỡ mà khả năng chúng có thể tiêu hóa ựược theo lý thuyết [61]. đây là một trong những nguyên nhân dẫn ựến tốc ựộ tăng trưởng của ấu trùng ngoài tự nhiên thấp hơn so với trong ương nuôi nhân tạo, mặc dù lượng thức ăn tiêu thụ hàng ngày của các ấu trùng ngoài tự nhiên này lên ựến 28,4 - 39,3% so với khối lượng cơ thể [61]. đây cũng là cơ sở ựể giải thắch tại sao tốc ựộ tăng trưởng ngày càng giảm của ấu trùng cá khoang cổ cam khi kéo dài thời gian sử dụng luân trùng ựến ngày thứ 9, 11 và 13 ngày tuổi. Lúc này, kắch cỡ luân trùng trở nên quá nhỏ bé so với cỡ miệng của ấu trùng nên không kắch thắch ựược khả năng bắt mồi của ấu trùng. Mặt khác ấu trùng phải tiêu tốn năng lượng lớn hơn rất nhiều ựể bắt giữ một số lượng lớn con mồi nhỏ bé này [16].
3.1.2.4. Tỷ lệ sống
Không có sự khác biệt có ý nghĩa về tỷ lệ sống giữa các nghiệm thức khi cho ấu trùng ăn Artemia (Hình 3.5). Tỷ lệ sống trung bình ựạt ựược là 68,78 ổ 2,15 %.
0.00 20.00 40.00 60.00 80.00 100.00 5 NT 7 NT 9 NT 11 NT 13 NT
NGÀY BẮT đẦU CHUYỂN đỔI
T Ỉ L Ệ S Ố N G ( % )
Hình 3.5. Ảnh hưởng của thời ựiểm chuyển ựổi thức ăn lên tỉ lệ sống của ấu trùng
*
Các chữ cái giống nhau trên ựầu các cột thể hiện sự khác biệt không có ý nghĩa (P < 0,05)
Giai ựoạn bắt ựầu dinh dưỡng ngoài và thời ựiểm chuyển ựổi giữa các loại thức