Để chiết metyl thủy ngân ra khỏi nền mẫu là thịt ngao chúng tôi đã tiến hành chiết với hai loại dung môi khác nhau là benzen và toluen.
Quy trình chiết đƣợc thực hiện nhƣ sau: Cân 10 g mẫu thịt ngao đã nghiền cho vào cốc 250 mL, thêm chất chuẩn metyl thủy ngân clorua vào mẫu sao cho nồng độ metyl thủy ngân trong mẫu đạt 0,1 µg/g, cho thêm 50 mL nƣớc cất, đồng hóa mẫu khoảng 5 phút (8000 đến 9000 v/phút) để phá vỡ tế bào và tăng khả năng tiếp xúc của mẫu với dung môi chiết, tạo khả năng chiết chất phân tích đạt hiệu quả cao nhất.
Tiếp đó mẫu đƣợc chuyển toàn bộ từ cốc sang phễu chiết thủy tinh 300 mL đã có sẵn 10 g muối NaCl khan. Cho vào phễu chiết 20 mL HCl 37%, và dung môi chiết toluen hoặc benzen, tiến hành lắc mẫu trên máy lắc đứng 5 phút, để yên 10 phút cho đến khi các lớp dung môi đƣợc phân tách hoàn toàn.
Trong trƣờng hợp không phân tách lớp, chuyển toàn bộ dịch chiết từ phễu chiết sang bình ly tâm dung tích 300 mL, ly tâm với tốc độ 4000 vòng/ phút trong 5 phút. Lấy chính xác 40 mL dịch chiết lớp trên chuyển vào phễu chiết 100 mL để tiếp tục công đoạn làm sạch và làm giàu mẫu bằng dung dịch L - cysteine.
Trong bƣớc này, trƣớc tiên dịch chiết trong phễu chiết 100 mL đƣợc rửa 3 lần với dung dịch muối NaCl 20% để loại axit, dùng tay lắc nhẹ, loại bỏ lớp dƣới. Sau đó dịch chiết đƣợc chiết lỏng – lỏng với dung dịch L – Cysteine, lắc mẫu trên máy lắc đứng trong 5 phút. Lớp L – Cysteine đƣợc chuyển sang ống nghiệm thủy tinh.
Dùng pipet bầu thủy tinh, lấy chính xác 3 mL dung dịch từ ống thủy tinh nêu trên, cho vào ống nghiệm thủy tinh 10 mL có nắp kín và cổ nhám. Thêm vào ống
nghiệm 1,2 mL dung dịch HCL 6N để chuyển hóa metyl thủy ngân thành dạng metyl thủy ngân clorua, chiết dung dịch này với 4 mL dung môi chiết (toluen hoặc benzen). Lắc mạnh, lấy lớp dung môi bên trên cho vào ống nghiệm thủy tinh chứa 2 g muối Na2SO4 khan để loại nƣớc nếu có. Dung dịch thu đƣợc dùng để phân tích trên GC/ECD.
Quy trình trên cũng đƣợc thực hiện tƣơng tự với các mẫu trắng (không thêm chuẩn metyl thủy ngân), phân tích trên GC/ECD.