Catalase và protease là hai enzym thuộc nhóm thủy phân. Catalase là enzym xúc tác cho phản ứng chuyển hóa H2O2 thành O2 và H2O. Trong khi đó , protease xúc tác cho phản ứng thủy phân các liên kết peptit trong phân tử polypeptitvà protein đến sản phẩm cuối cùng là các axit amin.
Hình 14. Hoạt độ catalase và protease của chủng vi khuẩn T2 sau 20 ngày
Kết quả cho thấy chủng T2 có hoạt tính catalase và protease (hình 14). Tuy nhiên, sau 20 ngày nuôi lắc, hoạt độ catalase của chủng T2 rất thấp 0,23 U/ml. Trong khi đó hoa ̣t đô ̣ prot ease của T2 cao hơn rất nhiều : 71,11 U/ml. Kết quả này cho chúng tôi nhâ ̣n đi ̣nh, enzym phân hủy PLA (PLA depolymerase) của vi khuẩn T 2 có thể nằm trong nhóm protease. Tuy nhiên vẫn cần phải nghiên cứu sâu hơn, đặc biệt là việc tách chiết và tinh sạch enzym phân hủy PLA từ chủng T2.
Pranamuda và cộng sự đã tiến hành tinh sạch enzym phân hủy PLA từ chủng
Amycolatopsis sp 41. Hoạt tính của enzym được thử nghiệm nên các loại polymer sinh
học khác nhau và thấy rằng: Enzym có hoạt tính proteolytic thấp hơn so với Proteinase K khi thử nghiệm trên casein nhưng lại cao hơn khi phân hủy PLA. Enzym này không có khả năng phân hủy PHB và PCL do vậy nó khác so với lipase và PHB depolymerase (do lipase và PHB depolymerase đều có khả năng phân hủy PHB và PCL) [42]. Enzyme phân hủy PHB có hoa ̣t tính cao ở nhiê ̣t đô ̣ và pH lần lượt là 50oC và pH trong
dải từ 6,5–7,5 trong khi đối với enzyme phân hủy PCL tương ứng là 30oC và 3,5–4,5 [39].
Hình 15. Hoạt độ protease của vi khuẩn T2
Kết quả trên hình 15 cho thấy tại thời điểm 10 ngày, hoạt độ protease của T2 là 35,67 U/ml, đến 30 ngày hoạt độ protease tăng lên 81,06 U/ml. Chứng tỏ hoạt độ protease của chủng T2 tăng lên theo thời gian nuôi cấy. Điều này cho thấy khả năng phân hủy PLA của chủng T2 cũng tăng dần theo thời gian. Tất cả các PLA depolymerases được biết đến hiện nay đều thuộc lớp hydrolases như là esterase hoặc protease [36]. Chúng xúc tác cho phản ứng thủy phân cắt đứt các liên kết ester trong mạch polymer và giải phóng ra các phân tử có mạch polymer ngắn hơn. Quá trình này tiếp tục đến khi mạch polymer bị phân giải thành các monomer là axit lactic.