Từ dịch chiết enzyme của 10 chủng nấm mốc nuôi trên 3 loại cơ chất khác nhau, chúng tôi tiến hành điện di SDS – PAGE để phân tích protein tổng số và điện di Zymogram để kiểm tra hệ enzyme xylanase và cellulase.
Từ 1000 µl dịch enzyme chúng tôi cô xuống 100 µl bằng máy cô chân không ở
300 C trong vòng 3h – 3h30. Tiến hành điện di SDS – PAGE và Zymogram trên hai cơ
chất CMC (cacbon methyl cellulose) và xylan theo các bước đã nêu ở trong phần phương pháp, thu được kết quả như sau:
48
8
Hình 3.1. Phổ điện di SDS – PAGE và Zymogram của các chủng 1 – FEC 514*, 2 – FEC 514A, 3 – FEC 514W, 4 – FEC 515*, 5 - FEC 515A, 6 - FEC 515W, 7 – FEC 516*, 8 – FEC 516A, 9 – FEC 516W, M – Marker
Từ kết quả điện di SDS – PAGE ở hình 3.1, chúng tôi nhận thấy rằng cả ba chủng FEC 514, FEC 515 và FEC 516 đều có số lượng băng nhiều và rõ nét (ở cả ba cơ chất carbon) điều này chứng tỏ thành phần protein ở cả ba chủng này là khá phong phú. Điện di Zymogram trên cơ chất CMC, cả ba chủng đều có số băng và vị trí băng trùng nhau điều đó chứng tỏ chúng có hệ enzyme celluase giống nhau. Trên cơ chất xylan, FEC 514 xuất hiện các băng trùng với FEC 515, trong khi FEC 516 chỉ xuất hiện 1 băng có vị trí trùng với 1 trong số các băng của 2 chủng còn lại. 116 kDa 66.2 25.5 35.5 45.0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9
49
Hình 3.2. Phổ điện di SDS – PAGE và Zymogram của các chủng 1 – FEC 519*, 2 – FEC 519A, 3 – FEC 519W, 4 – FEC 523*, 5 - FEC 523A, 6 - FEC 523W, 7 – FEC 534*, 8 – FEC 534A, 9 – FEC 534W, M – Marker
Từ kết quả điện di SDS ở hình 3.2, chúng tôi nhận thấy hai chủng FEC 519 và FEC 534 thành phần protein nhiều hơn so với chủng FEC 523 (ở trên cả ba cơ chất carbon). Tuy nhiên, hệ enzyme cellulase của FEC 523 lại nhiều hơn là hai chủng còn lại.
116 kDa 66.2 45.0 35.5 25.5 1 2 3 4 5 6 7 8 9 M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 2 3 4 5 6 7 8 9
50
Hình 3.3. Phổ điện di SDS – PAGE và Zymogram của các chủng 1 – FEC 544*, 2 – FEC 544A, 3 – FEC 544W, 4 – FEC 550*, 5 - FEC 550A, 6 - FEC 550W
Cả hai chủng FEC 544 và FEC 550 có số lượng băng tương đối ít, tương ứng với hệ protein nghèo nàn. Tuy nhiên chúng lại có hệ xylanase tương đối giống nhau với số băng có vị trị giống nhau. Ngược lại trên cơ chất CMC, thì chúng có số băng và vị trí khác nhau.
Điện di SDS - PAGE Cơ chất CMC Cơ chất Xylan
1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 116 kDa 66.2 45.0 35.5 25.5
51
Hình 3.4. Phổ điện di SDS – PAGE và Zymogram của các chủng 1 – FEC 551*, 2 – FEC 551A, 3 – FEC 551W, 4 – FEC 552*, 5 - FEC 552A, 6 - FEC 552W
Chúng tôi nhận thấy trên cơ chất xylan, hai chủng này đều có một băng nhưng có kích thước khác nhau. Trong khi trên cơ chất CMC thì chủng FEC 551 cho số lượng băng nhiều hơn. Điều đó chứng tỏ hệ cellulase của FEC 551 phong phú hơn FEC 552.
Điện di SDS - PAGE Cơ chất CMC Cơ chất Xylan
1 2 3 4 5 6 116 kDa 66.2 45.0 35.5 25.5
52