Hóa chất và thiết bị

Một phần của tài liệu Nghiên cứu đặc điểm sinh học của một số chủng Bacillus thuringiensis sinh protein tinh thể diệt côn trùng cánh vảy (Trang 31 - 33)

Hóa chất:

- Hóa chất sử dụng trong phân lập và nuôi cấy Bt: agar, cao thịt, cao nấm men, peptone, NaCl….

- Hóa chất sử dụng nhuộm bào tử và tinh thể: fuchsin base

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

- Hóa chất sử dụng trong phản ứng PCR: dNTPs, Taq polymease, đệm, nước khử ion…

Thiết bị:

Các thiết bị nghiên cứu gồm: Máy li tâm (Fresco, Đức), máy PCR (PTC- 100, Mỹ), máy vortex (IKA, Đức), máy lắc (Gerharat, Đức), máy soi gel (Vilber Lourmat, Đức), máy chụp gel (Gen Doc), kính hiển vi (Olympus, Nhật), tủ lạnh sâu (Frigo, Đan Mạch)

Ngoài ra chúng tôi cũng sử dụng một số dụng cụ khác phục vụ cho quá trình nghiên cứu như: đĩa petri, bình tam giác, pipet

Môi trƣờng:

Các loại môi trường đã sử dụng trong quá trình thực hiện thí nghiệm:

Môi trƣờng MPA- MT1 (g/l)

Agar: 20g Pepton: 10g Nước cất: 1l NaCl: 5g Cao thịt: 4g pH: 7

Môi trƣờng MPB- MT2 (g/l)

Pepton: 10g Nước cất: 1l pH: 7 NaCl: 5g Cao thịt: 4g

Môi trƣờng Craige- MT3 (g/l)

Bacto agar: 8g Pepton: 10g Nước cất: 1l NaCl: 5g Cao thịt: 4g pH: 7

Môi trƣờng LB- MT4 (g/l)

Trypton: 10g Nước cất: 1l pH: 7 NaCl: 5g Cao men: 4g

Môi trƣờng LBA- MT5 (g/l)

Agar: 20g Trypton: 10g Nước: 1l NaCl: 5g Cao men: 4g pH: 7

Các loại dung dịch:

Các dung dịch dùng trong tách chiết DNA plasmid

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

EDTA, pH = 8.0: 10mM Glucose: 50mM

 Dung dịch Sol II: NaOH: 20mM. SDS: 1%

 Dung dịch Sol III: CH3COOK: 60ml CH3COOH: 11,5ml H2O: 28,5ml

Các dung dịch dung trong điện di trên gel agarose

 Dung dịch TE: Tris HCl 10mM, pH= 8.0 EDTA 1mM, pH= 8.0

 Dung dịch đệm điện di TAE 50X: Tris base 121g

Acid acetic 5M: 28.6 ml EDTA 0.5M pH=8.0: 50ml Nước khử ion đủ 500ml

 Dung dịch đệm tra mẫu DNA (loading buffer) 5X: Tris HCl 1M pH= 8.0: 1ml EDTA 0.5M pH=8.0: 2ml Glycerol: 2ml

Bromphenol blue 1%: 2ml

 Gel điện di agarose 1%: agarose 1g, TAE 1X: 100ml

Một phần của tài liệu Nghiên cứu đặc điểm sinh học của một số chủng Bacillus thuringiensis sinh protein tinh thể diệt côn trùng cánh vảy (Trang 31 - 33)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(57 trang)