bằng phản ứng PCR
Sau khi kiểm tra hình thái chất nuôi cấy và một số đặc tính sinh vật hoá học, các chủng vi khuẩn phân lập đƣợc khẳng định là vi khuẩn
Cl. perfringens. Chúng tôi tiến hành xác định typ của chủng này bằng phƣơng pháp multipipex PCR, kết quả đƣợc trình bày ở bảng 3.14.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Bảng 3.14. Kết quả xác định serotype của các chủng vi khuẩn Cl. perfringens bằng phản ứng PCR Ngày tuổi Số chủng (n) Serotype A C (n) (%) (n) (%) SS - 15 14 1 7,14 13 92,86 16 - 30 10 1 10,00 9 90,00 31 - 45 8 1 12,50 7 87,50 46 - 60 7 1 14,29 6 85,71 Tính chung 39 4 10,26 35 89,74
Kết quả bảng 3.14 cho thấy: Trong 39 chủng Cl. perfringens phân lập
đƣợc từ bệnh phẩm của lợn tiêu chảy từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi, có 15 chủng
Cl. perfringens phân lập đƣợc ở lợn con từ sơ sinh đến 15 ngày tuổi, 14 chủng
Cl. perfringens phân lập đƣợc ở lợn từ 16 đến 30 ngày tuổi, 10 chủng Cl. perfringens phân lập đƣợc lợn 31 - 45 ngày tuổi 8 chủng và 7 chủng Cl. perfringens phân lập đƣợc ở lợn 46-60 ngày tuổi cho kết quả giống với
chủng tham chiếu Cl. perfringens typ C dùng làm đối chứng dƣơng,
chứng tỏ có 35 chủng phân lập là Cl. perfringens typ C chiếm tỷ lệ (89,74%).
Có 4 chủng Cl. perfringens phân lập đƣợc không cho vạch ADN giống
nhƣ đối chứng, do đó không phải vi khuẩn Cl. perfringens typ C, cần phải tiếp tục tiến hành chạy PCR thêm với chủng tham chiếu Cl. perfringens typ A dùng làm đối chứng dƣơng.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Qua kết quả phân tích ở bảng 3.14 cho thấy: Cả 4/4 chủng Cl. perfringens ở lợn độ tuổi từ sơ sinh đến 60 ngày tuổi đều cho vạch ADN giống đối chứng dƣơng với chủng tham chiếu Cl. perfringens typ A.
Vi khuẩn Cl. perfringens phân lập đƣợc từ bệnh phẩm của lợn con bị tiêu chảy thuộc typ A và typ C. Trong đó typ C chiếm tỷ lệ cao (89,74%), typ A
chiếm tỷ lệ thấp (10,26%). Nhƣ vậy, bệnh tiêu chảy do vi khuẩn Cl. perfringens
gây ra ở lợn rất nguy hiểm, điều này đã đƣợc nhiều tác giả nghiên cứu cảnh báo, nếu không có biện pháp can thiệp kịp thời sẽ ảnh hƣởng lớn đến kết quả chăn nuôi lợn ở Thái Nguyên trong những năm tiếp theo.