KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU
4.3.2. Kết quả nghiên cứu ảnh hƣởng của nồng độ và thời gian xử lý cholchicine đến khả năng tạo thể đa bội ở mầm hạt cam quýt
cholchicine đến khả năng tạo thể đa bội ở mầm hạt cam quýt
Bảng 4.22: Ảnh hƣởng của thời gian và nồng độ xử lý cholchicine đến khả năng đa bội hoá của chồi sau xử lý ở dòng bƣởi TN4
Chỉ tiêu Công thức ∑số mẫu kiểm tra
Số cây nhị bội Số cây tứ bội Số cây không xác định
Thời gian
Nồng độ
(%) Số cây (%) Số cây (%) Số cây (%)
6h 0,005 10 10 100 0 0 0 0 0,01 10 9 90 1 10 0 0 0,02 10 9 90 1 10 0 0 0,05 7 5 71,4 2 28,6 0 0 0,1 6 5 83,3 1 16,7 0 0 0,2 2 1 50 1 50 0 0 12h 0,005 10 10 100 0 0 0 0 0,01 10 10 100 0 0 0 0 0,02 10 10 100 0 0 0 0 0,05 7 6 85,7 1 14,3 0 0 0,1 7 2 28,6 5 71,4 0 0 0,2 4 2 50 2 50 0 0 24h 0,05 2 2 100 0 0 0 0 0,1 2 0 0 2 100 0 0 0,2 0 0 0 0 0 0 0 48h 0,05 2 1 50 1 50 0 0 0,1 2 1 50 1 50 0 0 0,2 0 0 0 0 0 0 0
Chúng tôi tiến hành xử lí hàng loạt hạt với các thời gian khác nhau 6h, 12h, 24h, 48h; và nồng độ chochicine 0,005%, 0,01%, 0,02%, 0,05%, 0,1%, 0.2%. Hạt sau khi xử lí được quan sát để xác định ảnh hưởng của thời gian và nồng độ chochicine đến khả năng đa bội hóa của chồi sau xử lí. Kết quả quan sát bảng 4.22 cho thấy:
Với thời gian xử lí 6h, 12h ở nồng độ 0.005%, 0,01%, 0,02%, 0,05%, 0,1%, 0,2% khả năng đa bội hoá của chồi tương đối lớn.
Với thời gian xử lí 6h, 12h ở nồng độ 0,005%, 0,01%, 0,02% số cây nhị bội nhiều đạt 90 -100%. Ở nồng độ 0,05%, 0,1% số cây nhị bội đạt 71 – 86%. Ở nồng độ 0,2% số cây nhị bội chỉ đạt 50%
Với thời gian xử lí 24h ở nồng độ 0,05%, số cây nhị bội đạt 100%, còn với nồng độ 0,1%, 0,2% không có mẫu kiểm tra. Với thời gian xử lí 48h ở nồng độ 0,05%, 0,1%số cây nhị bội đạt 50%, còn với nồng độ 0,2% không có mẫu kiểm tra. Như vậy khi nồng độ và thời gian xử lí tăng lên thì tác động của chochicine tăng đối với mẫu xử lí, tỉ lệ số cây nhị bội giảm.
Ở nồng độ 0,05%, thời gian xử lí 6h số cây tứ bội được phát hiện thấy đạt 28.6%; với nồng độ 0.1% cây tứ bội phát hiện thấy đạt 16,7%, Đến thời gian xử lí 12h, ở nồng độ 0,1% số cây tứ bội quan sát được đạt 71,4% - 100% (bảng 4.22). Thời gian xử lí 6h,12h, 24h, 48h ở các nồng độ khác số cây tứ bội quan sát được trung bình đạt 50%.
Qua bảng 4.22 nghiên cứu ảnh hưởng của thời gian và xử lí chochicine đến khả năng đa bội hoá của chồi ở dòng TN4 cho thấy: tỉ lệ cây nhị bội quan sát được giảm dần khi tăng nồng độ và thời gian xử lí mẫu lên. Tổng số cây tứ bội thể nhận được ở dòng TN4 là 18 cây. Trong đó 5 cây trên tổng số mẫu kiểm tra là 7 (đạt 71.4%) thu được ở nồng độ chochicine 0,1% và thời gian xử lí 12h, 2 cây trên tổng số mẫu kiểm tra là 2 (đạt 100%), số các cây tứ bội thể nhận được còn lại đạt từ 10% - 50%.
Hiện nay các cây này đang được tiếp tục chăm sóc và theo dõi tính ổn định về mức bội thể.
Bảng 4.23: Ảnh hƣởng của thời gian và nồng độ xử lý cholchicine đến khả năng đa bội hoá của chồi sau xử lý ở dòng bƣởi TN9
Chỉ tiêu Công thức ∑ số mẫu kiểm tra
Số cây nhị bội Số cây tứ bội Số cây không xác định
Thời gian
Nồng độ
(%) Số cây (%) Số cây (%) Số cây (%)
6h 0,005 10 10 100 0 0 0 0 0,01 10 10 100 0 0 0 0 0,02 10 9 90 1 10 0 0 0,05 5 5 100 0 0 0 0 0,1 10 7 70 3 30 0 0 0,2 8 6 75 1 12,5 1 12,5 12h 0,005 10 10 100 0 0 0 0 0,01 10 10 100 0 0 0 0 0,02 5 5 100 0 0 0 0 0,05 8 7 87,5 0 0 1 12,5 0,1 9 9 100 0 0 0 0 0,2 5 3 60 1 20 1 20 24h 0,005 7 6 85,7 1 14,3 0 0 0,01 6 5 83,3 1 17,7 0 0 0,02 5 3 60 2 40 0 0 0,05 0 0 0 0 0 0 0 0,1 3 0 0 3 100 0 0 0,2 0 0 0 0 0 0 0 48h 0,05 2 2 100 0 0 0 0 0,1 0 0 0 0 0 0 0 0,2 2 2 100 0 0 0 0 Tổng số 125 109 87,2 10 10,4 3 2,4
Ở dòng bưởi TN9 với tổng số 125 mẫu đem kiểm tra mức bội thể thì có 109 mẫu ở thể nhị bội chiếm 87,2%, 13 mẫu ở thể tứ bội chiếm 10,4%, 3 mẫu ở thể không xác định (thể khảm). Kết quả thu được thể hiện ở bảng 4.23:
Trong thời gian xử lý cholchicine 6 giờ:
Ở nồng độ 0,02% thu được 1 cây tứ bội chiếm 10% trên tổng số 10 mẫu đem kiểm tra mức bội thể. Với nồng độ 0,1% thu được 3 cây tứ bội chiếm 30% trên tổng số 10 mẫu. Nồng độ 0,2% thu được 1 cây tứ bội chiếm 12,5% trên tổng số 8 mẫu đem kiểm tra mức bội thể, và 1 cây không xác định được mức bội thể chiếm tỷ lệ 12,5% . Không thu được cây tứ bội nào ở nồng độ 0,005%; 0,01%; 0,05%.
Trong thời gian xử lý cholchicine 12 giờ duy nhất ở nồng độ 0,2% thu được 1 cây tứ bội và 1 cây không xác định mức bội thể chiếm 20% trên tổng số 5 mẫu đem kiểm tra. Ở nồng độ 0,05% thu được 1 cây thể khảm chiếm 12,5% trên tổng số 8 mẫu kiểm tra. Các công thức còn lại thu được 100% cây nhị bội.
Trong thời gian xử lý cholchicine 24 giờ:
Ở nồng độ 0,005% thu được 1 cây tứ bội chiếm tỷ lệ 14,3% trên tổng số 7 mẫu đem kiểm tra. Nồng độ 0,01% thu được 1 cây tứ bội chiếm tỷ lệ 17,7% trên tổng số 6 mẫu đem kiểm tra. Thu được 2 cây tứ bội chiếm tỷ lệ 40% trên tổng số 5 mẫu đem kiểm tra ở nồng độ 0,02%. Ở nồng độ 0,1% thu được 3 cây tứ bội chiếm tỷ lệ 100% trên tổng số 3 mẫu đem kiểm tra.
Với thời gian xử lý cholchicine trong 48 giờ không thu được cây tứ bội nào. Qua phần 4.23 (Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ và thời gian xử lý cholchicine đến khả năng tạo thể đa bội ở mầm hạt cam quýt) có một số nhận xét như sau:
Sức bật mầm của hạt chịu ảnh hưởng của nồng độ và thời gian xử lý cholchicine. Nồng độ càng cao, thời gian xử lý càng cao thì tỷ lệ nảy mầm của hạt càng giảm.
Liều lượng gây chết 100% có khác nhau đối với hai dòng tham gia thí
nghiệm: đối với TN4 100% mẫu xử lý chết ở nồng độ 0,2%, thời gian xử lý từ
24 đến 48giờ. Trong khi đó, ở nồng độ 0,2% thời gian xử lý 48 giờ thì tỷ lệ
nảy mầm của dòng TN9 là 10%.
Công thức thí nghiệm đạt hiệu quả cao nhất với tạo cây tứ bội từ hạt là xử lý cholchicine ở nồng độ 0,1%, thời gian xử lý 24 giờ. Ở công thức này thu được 100% số cây đem kiểm tra mức bội thể đều là cây tứ bội.
a b
Đồ thị 4.9: Đồ thị phân tích đa bội thể của cây đƣợc xử lý cholchicine
a- Ở nồng độ 0,1% trong thời gian 12 giờ (cây nhị bội) b- Ở nồng độ 0,1% trong thời gian 24 giờ (cây tứ bội)
