- Kớ hiệu, trỡnh tự và nguồn gốc cỏc cặp mồi sử dụng trong phản ứng PCR
3.2.3Đỏnh giỏ, chọn lọc con lai quy tụ được gen khỏng bạc lỏ, tương hợp rộng bằng chỉ thị phõn tử.
4 Nũi 1 HAU0202-6 Khang dõn Văn Giang – Hưng Yờn
3.2.3Đỏnh giỏ, chọn lọc con lai quy tụ được gen khỏng bạc lỏ, tương hợp rộng bằng chỉ thị phõn tử.
rộng bằng chỉ thị phõn tử.
Đề tài tập trung vào chọn lọc con lai kộp TGMS-VN1 x PA64S/IRBB62, BoS x PA64S/IRBB62, DBoS x PA64S/IRBB62 và PA64S x TGMS-VN1/R62, PA64S x BoS/R62, PA64S x DBoS/R62 với số lượng hạt lai nhiều để tỡm những con lai quy tụ được gen tương hợp rộng, gen khỏng
50
bạc lỏ. Hạt lai tổ hợp PA64S x TGMS-VN1/R62 cú số lượng lớn nhất chắc chắn mang gen bất dục đực và gen tương hợp rộng của PA64S, ngoài ra cú thể mang gen tms4 và đặc tớnh nở hoa tốt của TGMS-VN1 và gen khỏng bệnh bạc lỏ Xa4, Xa7, Xa21 của IRBB62. Những con lai này cú thể đưa vào nuụi cấy bao phấn với hy vọng tạo được dũng đơn bội kộp quy tụđược một số gen cần tuyển chọn.
Kết quả kiểm tra 255 con lai tổ hợp PA64S x TGMS-VN1/R62 bằng lõy nhiễm nhõn tạo cho thấy cú 18 con lai cú khả năng khỏng bệnh bạc lỏ, để
kiểm tra sự cú mặt của từng gen khỏng bệnh bạc lỏ sử dụng chỉ thị phõn tử. Sử dụng chỉ thị phõn tử liờn kết với gen khỏng bệnh bạc lỏ P3, pTA248 sàng lọc trong con lai PA64S x TGMS-VN1/R62 để tỡm được con lai quy tụ được gen khỏng bệnh bạc lỏ Xa7, Xa21, ngoài ra cũn cú thể mang gen tms4 và
đặc tớnh nở hoa tốt của TGMS-VN1.
Để rỳt ngắn ký hiệu, con lai của tổ hợp PA64S x TGMS-VN1/R62 sẽ
viết tắt là 1 TG-PA62, 2 TG-PA62, 3 TG-PA62… theo thứ tự của cỏc con lai theo dừi.
Hỡnh 3.5 : Sản phẩm điờn di đỏnh giỏ đa hỡnh một số con lai quy tụ PA64S x TGMS-VN1/IRBB62 bằng chỉ thị phõn tử P3 liờn kết với gen Xa7.
Thứ tự cỏc băng: Lander; IR 24; R7; TGMS; R 62;
Thứ tự băng của con lai: 1- 10 TG-PA 62; 2-11 TG-PA 62; 3-12 TG-PA62; 4-13 TG-PA62; 5-19 TG-PA62; 6- 20 TG-PA62; 7- 21 TG-PA62; 8- 22 TG- PA62; 9- 23 TG-PA62; 10- 24 TG-PA62; 11- 28 TG-PA62; 12- 35 TG-PA62;
51
13- 62 TG-PA62; 14- 71 TG-PA62; 15- 75 TG-PA62; 16- 83 TG-PA62; 17- 105 TG-PA62; 18- 128TG-PA62. 105 TG-PA62; 18- 128TG-PA62.
Hỡnh 3.6: Sản phẩm điện di đỏnh giỏ đa hỡnh một số con lai quy tụ PA64S x TGMS-VN1/IRBB62 bằng chỉ thị phõn tử pTA 248 liờn kết với gen Xa21.
Thứ tự cỏc băng: Lander; IR 24; R21; TGMS; R 62;
Thứ tự băng của con lai: 1- 10 TG-PA 62;2-11 TG-PA 62; 3-12 TG-PA62; 4-13 TG-PA62; 5-19 TG-PA62; 6- 20 TG-PA62; 7- 21 TG-PA62; 8- 22 TG-PA62; 9- 23 TG-PA62; 10- 24 TG-PA62; 11- 28 TG-PA62; 12- 35 TG-PA62; 13- 62 TG-PA62; 14- 71 TG-PA62; 15- 75 TG-PA62; 16- 83 TG-PA62; 17- 105 TG-PA62; 18- 128TG-PA62.
Kết quả kiểm tra bằng chỉ thị phõn tử trờn hỡnh 3.5 và 3.6 cho thấy cú 8 con lai 10 TG-PA62, 12 TG-PA62, 13 TG-PA62, 24 TG-PA62, 35 TG-PA62, 71 TG-PA62, 75 TG-PA62, 105 TG-PA62 mang hai gen khỏng bệnh bạc lỏ trội Xa7 và Xa21 cú thể sử dụng làm vật liệu đểđưa vào nuụi cấy bao phấn.
Bảng 3.9: Cỏc con lai kộp quy tụ được 2 gen khỏng bệnh bạc lỏ của tổ hợp
PA64S X TGMS-VN1/R62 vụ Mựa 2010 tại Hoàng Đụng, Duy Tiờn, Hà Nam.
Độ dài vết bệnh (cm) Mức độ khỏng bệnh STT Tờn con lai
Theo thứ tự
Nũi 3 Nũi 9 Nũi 19 Nũi 3 Nũi 9 Nũi 19
Gen khỏng
bệnh 1 10 TG-PA62 1,7 2,5 2,8 HR HR HR Xa 7, Xa21
2 11 TG-PA62 8,8 9,2 10,6 MS MS MS Xa 7
3 12 TG-PA62 2,1 3,4 1,9 HR HR HR Xa7, Xa21
4 13 TG-PA62 3,5 1,7 2,2 HR HR HR Xa7, Xa21
52
Vết bệnh <4cm: HR; 4-8cm: R; 8-12cm: MR; 12-18cm: S; >18cm: HS Cỏc con lai quy tụ được 2 gen khỏng bệnh bạc lỏ đưa vào nuụi cấy
(adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});