1.7.1 Triệu chứng nhiễm độc chì [6, 16]
a) Nhiễm độc chì cấp tính
Nhiễm độc chì cấp tính chủ yếu do nhầm lẫn như uống nhầm phải acetat chì (khơng cịn thấy trong cơng nghiệp). Nhiễm độc chì cấp cĩ những biểu hiện như sau:
- Rối loạn tiêu hĩa: Đau thượng vị, đau bụng, nơn mửa. - Tổn thương thận: Đái ra albumin, trụ niệu, đái ít. - Đơi khi cĩ tổn thương gan.
- Co giật và hơn mê dẫn đến chết sau 2 – 3 ngày.
b) Nhiễm độc chì mãn tính
Chì vào cơ thể được giữ lại ở gan, phần lớn thải qua mật, theo phân ra ngồi. Nhưng nếu xâm nhập nhiều và kéo dài, chì sẽ tràn vào máu, rồi lại được thải ra qua thận, nước bọt…
Nhiễm độc chì biểu hiện như sau:
- Giai đoạn thấm nhiễm chì: Giai đoạn này chưa phải là một bệnh, mà chỉ cĩ dấu hiệu sinh học là chính, cho phép ta kết luận là cĩ hiện tượng hấp thu chì quá mức. Ở giai đoạn này (chì huyết dưới mức 70μg/100ml) cĩ những dấu hiệu chủ quan mơ hồ (như đau dạ dày – ruột, mệt mỏi, thay đổi tính, đau cơ khớp và thực hiện một số test tâm lý – vận động kết quả giảm). Cĩ một số tỷ lệ cao viền lợi chì hay viền Burton là những đường lấm tấm màu xanh sẫm nằm
trong lợi ở cách bờ lợi độ 1 mm, đường này xuất hiện ở chỗ khơng cĩ răng. Hiện tượng này do kết tủa sunfat chì gây ra bởi tác dụng của H2S trên các muối chì lưu động.
- Giai đoạn nhiễm độc chì thực sự: Giai đoạn này cĩ rất nhiều dấu hiệu bệnh lý ở nhiều cơ quan của cơ thể, tuy nhiên tùy các cá thể khác nhau mà các dấu hiệu thể hiện ở các hình thái hoặc mức độ khác nhau. Một số biểu hiện bệnh lý thường gặp được mơ tả như sau:
+ Rối loạn tồn thân: Nhức đầu, ăn kém ngon, gầy xọp, da tái nhợt, mệt mỏi, thường hay đau cơ.
+ Thiếu máu: Thiếu máu do nhiễm độc chì khơng nặng lắm. Tỷ lệ huyết sắc tố ít khi tụt quá 60% và hồng cầu dưới 3,5 triệu mm3. Thiếu máu cĩ thể đẳng sắc hay nhược sắc.
+ Cơn đau bụng chì: Đây là biểu hiện hay gặp nhất của nhiễm độc chì. Trước cơn đau bụng thường cĩ táo bĩn vài ngày. Đặc điểm là đau bụng ở quanh rốn dữ dội, làm bệnh nhân phải cúi gập người làm đơi. Bệnh nhân tốt mồ hơi nhiều, và thường nơn lúc mới bắt đầu đau bụng, bụng vẫn mềm cĩ thể kèm theo ỉa lỏng.
+ Viêm đa dây thần kinh vận động: Thường hay gặp nhất là thể liệt thần kinh quay với triệu chứng tay cổ cị, lúc đầu ở tay phải, rồi sang cả hai tay. Trước tiên, các cơ duỗi dài ngĩn giữa và ngĩn nhẫn bị bại liệt. Rồi đến các ngĩn khác và đến các cơ duỗi cổ tay. Nhiễm độc chì cĩ thể gây liệt cả hai chi dưới, thường liệt các cơ mác và các cơ duỗi ngĩn chân làm bàn chân bị thõng xuống.
+ Cơn cao huyết áp: Hiện tượng này xảy ra do co thắt các động mạch thận, cơn cao huyết áp thường đi đơi với cơn đau bụng chì.
+ Bệnh não do nhiễm độc chì: Đây là một biểu hiện nặng nhất của nhiễm độc chì. Những triệu chứng cấp tính cĩ thể thay đổi: Hơn mê, mê man, co giật bệnh tâm thần do nhiễm độc. Những biểu hiện mãn tính thường cĩ là giảm khả năng suy nghĩ, trí nhớ kém, đau đầu, điếc, nĩi ngọng nhất thời.
+ Tổn thương tuyến giáp: Trước tiên là hiện tượng giảm khả năng thu nhận tốt các tuyến giáp được thấy ở xúc vật, và rồi đã được chứng minh trên các cơng nhân nhiễm độc chì.
+ Tổn thương tinh hồn: Những cơng nhân bị nhiễm độc chì hay bị thấm nhiễm (chì huyết > 50 μg/100ml) khơng cĩ biểu hiện lâm sàng, cĩ trạng thái giảm tinh dịch (hypospermie). Hiện tượng này là do tác dụng trực tiếp của chì đối với tuyến sinh dục.
1.7.2 Cách chuẩn đốn bệnh nhiễm độc chì [5, 6, 16]
Chuẩn đốn bệnh nhiễm độc chì người ta dựa vào các tiêu chuẩn sau:
Dấu hiệu cận lâm sàng
Tiêu chuẩn này bao gồm các kết quả xét nghiệm cận lâm sàng, với các chỉ tiêu theo giới hạn quy định như sau:
- Delta ALA niệu (lấy nước tiểu 24 giờ) ≥ 10 m/l
- Số lượng hồng cầu hạt kiềm (so sánh với hồng cầu thường) ≥ 10 0/000
- Huyết sắc tố (tính bằng gam trong 100 ml máu) ≤ 11g % - Chì huyết ≥ 70 μg/100ml
- Chì niệu ≥ 80 μg/100ml
Dấu hiệu lâm sàng
Nếu cĩ các dấu hiệu lâm sàng sau (thường xuất hiện muộn) thì việc khẳng định bệnh càng vững chắc:
- Hội chứng đau bụng cơn, khơng sốt, cĩ tình trạng bán tắc ruột (cơn đau bụng chì) tường kèm theo cơn tăng huyết áp và đường viền chì Burton.
- Liệt cơ duỗi ngĩn tay và cơ nhỏ bàn tay. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
1.8 Cách điều trị bệnh nhiễm độc chì 1.8.1 Điều trị nhiễm độc chì vơ cơ 1.8.1 Điều trị nhiễm độc chì vơ cơ
Điều tiên quyết trong việc chữa trị nhiễm độc chì là phải chấm dứt tiếp cận với nguồn phát sinh ra kim loại chì để giảm nồng độ chì trong máu. Nếu ngộ độc trầm trọng được điều trị với một số loại thuốc đặc biệt mà khi vào cơ thể thuốc sẽ bám vào chì để thải ra ngồi theo nước tiểu.
a) Điều trị nhiễm độc chì cấp tính
+ Nhanh chĩng đưa bệnh nhân ra khỏi mơi trường ơ nhiễm chì cao.
+ Rửa dạ dày bằng các loại dung dịch cĩ khả năng kết tủa với chì dưới dạng sunfat khơng hịa tan như Na2SO4 và MgSO4.
+ Chống chống bằng tiếp nước qua tiêm truyền. - Tuyến trên:
+ Tiêm các thuốc cĩ khả năng đào thải chì nhanh chĩng như EDTA Na2Ca.
+ Tiếp tục chống chống bằng tiếp nước qua tiêm truyền. + Điều trị triệu chứng.
b) Điều trị nhiễm độc chì mãn tính
- Tuyến cơ sở:
+ Delta ALA niệu từ 5 – 9 mg/l: Giai đoạn tiếp xúc chưa đến mức độ rối loạn sinh học. Chỉ cần theo dõi. Delta ALA nếu từ 10 mẫu trở lên cĩ thấm nhiễm chì, ở giai đoạn này chưa cần điều trị thải chì, chỉ cần cách ly với mơi trường lao động trong 2 tháng, cĩ thể hết tình trạng thấm nhiễm, delta ALA niệu trở về bình thường.
- Tuyến trên:
+ Delta ALA nếu từ 10mg/l trở lên, kết hợp một số triệu chứng như thiếu máu, Hb giảm, suy nhược, ăn kém ngon… hoặc là sau khi ngừng tiếp xúc trên hai tháng mà mức delta ALA niệu chưa trở về dưới giới hạn bệnh lý, cần phải dùng thuốc thải chì loại nhẹ là ethambutol. Liều lượng hàng ngày là 20mg/kg cơ thể, dùng viên nén 400mg.
+ Dùng thuốc thải chì EDTA: Chỉ dùng khi nhiễm độc chì thực sự. EDTA là thuốc thải chì, cĩ khả năng cố định Pb, Ca và các cation khác, hình thành một phức hợp khơng cịn ở dạng ion. Để tránh giảm calci huyết, người ta dùng EDTA ở dạng muối EDTA CaNa2.
+ Tiêm tĩnh mạch, EDTA phân tán nhanh chĩng khắp cơ thể và loại qua thận. Gần một nửa liều tiêm vào loại ngay ra trong giờ đầu và sau 7 giờ loại hết 90%. Chì cũng bị loại ra theo tỷ lệ như vậy.
đa mỗi ngày khơng quá 50mg/kg/thể trọng. Điều trị như vậy trong 5 ngày. Nếu chì niệu cịn cao cĩ thể điều trị tiếp một đợt nữa sau ít nhất là hai ngày nghỉ.
D.Penicillamin cũng được dùng nhưng kết quả kém hơn - Điều trị triệu chứng:
Cơn đau bụng chì: Dùng các thuốc chống co thắt. Chlorpromazin cĩ tác dụng giảm đau, an thần tốt. Cĩ thể dùng Predmsolon, uống 20 – 30mg/ngày giảm đau nhanh.
Tai biến não: Dùng các thuốc barbitunic và chống tăng áp lực nội sọ bằng huyết thanh ưu trương.
Huyết áp cao: Dùng các thuốc hạ huyết áp.
Liệt do chì: Tiêm strychnine nếu tăng dần, kém các loại vitamin B1, C, BG châm cứu, vật lý trị liệu.
1.8.2 Điều trị nhiễm độc chì hữu cơ
Các thuốc thải chì như EDTA Na2, EDTA Ca2 khơng cĩ tác dụng nên khơng được sử dụng.
Phương pháp điều trị tốt là tập trung điều trị thải độc và điều trị triệu chứng. Chủ yếu dùng các loại thuốc an thần cĩ tác dụng ngắn, nhưng kéo dài như barbituric, khơng dùng thuốc phiện. Cần duy trì cân bằng dịch, chất điện giải và tăng cường chất dinh dưỡng, phối hợp các loại thuốc trợ tim, trợ sức các loại vitamin.
1.9 Các phương pháp phân tích chì trong mẫu sinh học
Hiện nay cĩ nhiều phương pháp nhạy và chọn lọc để phân tích hàm lượng chì trong các mẫu sinh học như: Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử, phương pháp phổ khối lượng kết hợp nguồn cảm ứng cao tần plasma (ICP- MS), quang phổ phát xạ plasma (AES-ICP), phương pháp cực phổ, phương pháp cực phổ xung vi phân, phương pháp cực phổ sĩng vuơng… Sau đây là một số phương pháp để cĩ thể xác định được hàm lượng chì trong mẫu sinh học.
1.9.1 Phương pháp phổ khối lượng kết hợp nguồn cảm ứng cao tần plasma (ICP-MS) (ICP-MS)
Hiện nay phương pháp ICP-MS là phương pháp hiện đại để phân tích chì trong các mẫu sinh học [22] . Theo [22], mẫu máu phân tích được pha lỗng tỷ lệ 1:9 với dung dịch pha lỗng gồm: TritonX-100 0,05% , 1mg/l Au trong HNO3 0,5% theo tiêu chuẩn nội bộ, 25μg/l Ir và 25μg/l Rh. Giới hạn phát hiện của chì là 0,05μg/l. Phương pháp này cĩ độ nhạy, độ chính xác và chọn lọc cao. Tuy nhiên giá thành thiết bị cao, cùng với quy trình vận hành phức tạp.
1.9.2 Phương pháp cực phổ xung vi phân (DPP)
Ở phương pháp này, tác giả Christie và Osteryoung đã tính tốn cho trường hợp xác định chì, trong điều kiện tối ưu cĩ thể đạt độ nhạy khoảng 10- (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
8
M khi dùng biên độ xung 100mv trong nền NaF 1M [3] . Hiện nay phương pháp này được ứng dụng để phân tích chì trong máu [2,12] . Ưu điểm nổi bật của phương pháp DPP so với các phương pháp khác là ở độ nhạy cao kể cả hợp chất vơ cơ và hữu cơ, các quá trình thuận nghịch và khơng thuận nghịch. Quan trọng hơn là đương I-E cĩ dạng đỉnh cực đại, sau mỗi một đỉnh dịng điện lại trở về trạng thái đường nền, do đĩ phương pháp cĩ độ phân giải rất cao, cĩ thể đạt đến 50.000. Ngồi ra cực phổ xung vi phân cịn cho ta những thơng tin về dạng tồn tại của chất được phân tích, tính oxi hĩa khử, tính axit bazơ, sự tạo phức… Nhược điểm của phương pháp này là trong các hệ phức tạp cĩ độ phân giải kém [3, 7].
1.9.3 Phương pháp Von – Ampe hịa tan anot
Phương pháp Von – Ampe hịa tan anot được ứng dụng để phân tích chì trong các mẫu máu và nước tiểu [20,32]. Phương pháp này địi hỏi lượng mẫu ít nhất là 5μl đối với mẫu máu. Ưu điểm của phương pháp này là độ nhạy cao, chi phí thấp hơn phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử. Tuy nhiên phương pháp này chỉ thích hợp để phân tích ít hơn 25 mẫu trên ngày, cịn phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử phân tích được lượng mẫu nhiều hơn.
1.10 Phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử
Hiện nay phương pháp này được dùng phổ biến để phân tích hàm lượng chì trong các mẫu máu [18,28,29,30,31]. Phương pháp này cĩ ưu điểm là quy trình xử lý mẫu đơn giản, độ nhạy và độ chọn lọc cao. Các kỹ thuật nguyên tử
hĩa thường được sử dụng là kỹ thuật nguyên tử hĩa bằng ngọn lửa và bằng lị graphit.
Trong nghiên cứu này, chúng tơi sử dụng phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử với kỹ thuật nguyên tử hĩa bằng lị graphit để phân tích hàm lượng chì trong mẫu máu.
1.10.1 Lược sử phát triển phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tử AAS
Sự phát hiện hiệu ứng hấp thụ nguyên tử được cơng bố lần đầu iên vào năm 1802 khi Wollaston nhận thấy những vạch tối trong phổ ánh sáng mặt trời. Năm 1961 người ta đã sản xuất hàng loạt máy quang phổ hấp thụ nguyên tử cĩ ứng dụng phân tích. Trong những thập niên gần phương pháp phổ hấp thụ nguyên tử được sử dụng rộng rãi để xác định kim loại trong các mẫu quặng, đất đá, nước, các mẫu sinh học, y học….
1.10.2 Nguyên tắc của phép đo
Ở điều kiện bình thường nguyên tử khơng thu và cũng khơng phát năng lượng. Nhưng khi nguyên tử tồn tại ở trạng thái tự do, bị kích thích bằng chùm tia đơn sắc cĩ năng lượng và bước sĩng phù hợp (được tạo bởi một loại đèn riêng cho từng nguyên tố kim loại) thì chúng sẽ hấp thụ năng lượng của bức xạ đĩ và sinh ra một loại phổ là phổ hấp thụ nguyên tử của nguyên tố đĩ.
Về nguyên tắc, kỹ thuật nguyên tử hĩa khơng ngọn lửa là quá trình nguyên tử hĩa tức khắc trong thời gian rất ngắn nhờ năng lượng của dịng điện cơng suất lớn và trong mơi trường khí trơ. Quá trình nguyên tử hĩa diễn ra theo các giai đoạn kế tiếp nhau: Sấy khơ mẫu, tro hĩa luyện mẫu, nguyên tử hĩa mẫu để đo phổ hấp thụ và cuối cùng là làm sạch cuvet. Trong đĩ hai giai đoạn đầu là chuẩn bị cho giai đoạn nguyên tử hĩa để đạt kết quả tốt. Nhiệt độ trong cuvet graphit là yếu tố chính quyết định mọi sự diễn biến của quá trình nguyên tử hĩa mẫu.
Do đĩ, muốn thực hiện phép đo phổ hấp thụ nguyên tử của một nguyên tố cần thực hiện các quá trình sau:
1. Chọn các điều kiện và loại trang bị phù hợp để chuyển mẫu phân tích từ trạng thái ban đầu (rắn hay dung dịch) thành trạng thái hơi của các nguyên tử tự do.
2. Chiếu chùm tia bức xạ đặc trưng của nguyên tố cần phân tích qua đám hơi nguyên tử tự do vừa tạo ở trên. Các nguyên tử của nguyên tố cần xác định trong đám hơi sẽ hấp thụ những tia bức xạ nhất định và tạo ra phổ hấp thụ của nĩ.
3. Nhờ hệ thống máy quang phổ người ta thu tồn bộ chùm sáng, phân ly và chọn một vạch phổ hấp thụ của nguyên tố cần phân tích để đo cường độ của nĩ. Cường độ đĩ chính là tín hiệu hấp thụ. Trong một giới hạn nhất định của nồng độ [C], giá trị cường độ này phụ thuộc tuyến tính vào nồng độ [C] của nguyên tố ở trong mẫu phân tích. Theo định luật Buger – Lamber – Beer: Khi chùm sáng đơn sắc cĩ cường độ I0 được chiếu vào mơi trường hấp thụ cĩ độ dài l (cm) chứa N0 nguyên tử, sau khi ra khỏi mơi trường cịn lại cường độ I, thì cường độ của một vạch phổ hấp thụ là:
D = log (I0/I) = 2,303Kg.l.N0 (a) Trong đĩ: - D là cường độ hấp thụ của một vạch phổ.
- Kg là hằng số, được gọi là hệ số hấp thụ, phụ thuộc l. Số nguyên tử N0 cĩ quan hệ với nồng độ [C] của nguyên tố trong mẫu theo biểu thức:
N0 = ki.Cb (b)
Với ki là hằng số thực nghiệm, phụ thuộc vào tất cả các điều kiện hĩa hơi và nguyên tử hĩa mẫu nhất định đối với một hệ thống máy AAS và với các điều kiện đã chọn cho mỗi phép đo.
Bb: là hằng số bản chất được quyết định bởi bản chất mỗi loại nguyên tử và nồng độ của nĩ trong mẫu. Trong mọi điều kiện ta đều cĩ:
0 < b ≤ 1 Từ (a) và (b) suy ra: D = a.Cb (c)
Đây là phương trình cơ sở của phép định lượng các nguyên tố theo phổ hấp thụ nguyên tử. Đường quan hệ D – C theo phương trình (c) cĩ hai miền ứng với b = 1 và b < 1. Khi b = 1 quan hệ D – C là tuyến tính, trong phân tích người ta sử dụng đoạn này làm đường chuẩn, nồng độ chất nghiên cứu cần nằm trong khoảng này [11].
CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG, PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU VÀ THỰC NGHIỆM
2.1 Đối tượng, mục đính nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu
Đối tượng nghiên cứu chúng tơi lựa chọn đĩ là mẫu sinh học mà cụ thể là mẫu máu của người.
Trước hết cần phải hiểu mẫu máu là gì? Trong cơ thể người lượng máu là bao nhiêu? Thành phần của máu gồm cĩ những gì? Chức năng và đặc tính của mẫu máu cĩ đặc điểm gì?