CHƯƠNG III SẢN PHẨM
3.1.2.5 Cách đếm Shigella [3] •Nguyên lý
• Nguyên lý
- Phương pháp này dựa vào môi trường thạch XLD (thạch xylose lysine desoxy cholate agar). Môi trường chứa xylose là tác nhân phân biệt, vì hầu hết shigella không lên men xylose, vi khuẩn xuất hiện những khuẩn lạc kiềm trên mặt đĩa thạch (khả nghi shigella). Tất cả các test sinh hóa sử dụng cho salmonella đều được tiến hành và những đặc tính điển hình
•Cách làm
Chuẩn bị đồng nhất mẫu thực phẩm
Pha loãng
Nuối cấy: lấy 0.25ml thực phẩm đồng nhất pha loãng cho bề mặt của đĩa thạch XLD khô và tran bằng que thủy tinh vô khuẩn.
Ủ ấm: 370C trong 24h
Đếm khuẩn lạc (nghi là Shigella): chọn tất cả các đĩa có 30 – 300 khuẩn lạc và đếm những khuẩn lạc màu đỏ giống nhau. Những khuẩn lạc đó đều nghi là Shigella.
Nhận dạng
Xác định tính chất sinh vật hóa học
- Như qui trình Salmonella với những test sau:
- TSI : mặt nghiêng đỏ, đáy vàng, không sinh hơi, không sinh H2S - Ure : âm tính ( không đổi màu)
- Di động : không di động - KCN : không mọc - Indole : dương hoặc âm - VP: âm tính
- Carbohydrate : không có hơi - Citrate : không mọc
Nhận dạng bằng phản ứng huyết thanh
Xét nghiệm những khuẩn lạc thuần khiết không tự ngưng kết từ thạch dinh dưỡng hoặc thạch TSI trên mặt nghiêng bằng ngưng kết với huyết thanh Shigella đa và đơn giá. Vi khuẩn thể hiện là Shigella dựa trên cơ sở phản ứng sinh hóa, nhưng ngưng kết kém hoặc không có ngưng kết, cần phải xử lý nhiệt bằng cách đun sôi vi khuẩn thể sữa 15 -30 phút. Sau khi xử lý như vậy thì vi khuẩn thể sữa phải được để nguội rồi làm phản ứng ngưng kết lại.