Để phân lập được các hợp chất trong bất kỳ một thực vật nào mà khơng làm ảnh hưởng tới thành phần hố học cĩ trong nĩ thì trước khi ngâm chiết bằng dung mơi hữu cơ, mẫu thực vật phải được đưa đi khử men ngay sau khi thu mẫu và sấy khơ ở điều kiện thích hợp. Về nguyên tắc, việc ngâm chiết mẫu thực vật cĩ thể tiến hành theo 2 cách phổ biến sau:
1. Chiết và phân lập các hợp chất từ mẫu thực vật bằng các loại dung mơi cĩ độ phân cực tăng dần: ete dầu hoả hoặc n-hexan, clorofom, etyl axetat, metanol hoặc etanol v.v....
2. Chiết tổng bằng các ancol (metanol, etanol) hay hệ dung mơi ancol- nước. Sau đĩ, tiến hành ngâm chiết bằng các loại dung mơi cĩ độ phân cực tăng dần như phương pháp 1 để thu được các dịch chiết cĩ chứa các hợp chất cĩ độ phân cực tương đối giống nhau.
Quá trình ngâm chiết thân cây Ngũ vị vảy chồi (Schisandra perulata) được thực hiện theo phương án 2 (Sơ đồ 2.1).
3.2. Phân lập và nhận dạng các hợp chất cĩ trong các dịch chiết khác nhau của cây Ngũ vị vảy chồi
Các dịch chiết từ thân cây Schisandra perulata đều là những hỗn hợp
phức tạp chứa các hợp chất khác nhau. Để phân lập từng chất ra khỏi hỗn hợp, chúng tơi đã sử dụng các phương pháp sắc ký cột như: Cột nhồi silica gel, với các hệ dung mơi rửa giải thích hợp và thường phải lặp lại nhiều lần. Việc tinh chế các chất hay dùng phương pháp kết tinh lại trong dung mơi hoặc hệ dung mơi thích hợp. Nhờ đĩ, sẽ thu được các đơn chất cĩ độ tinh khiết cao, đáp ứng các nhu cầu để khảo sát tính chất hĩa lý và quang phổ của chúng. Đĩ là những yếu tố quan trọng trong quá trình nhận dạng và xác định cấu trúc hĩa học của các chất đã phân lập được từ các đối tượng nghiên cứu nĩi trên.
Việc phân lập các thành phần hĩa học của cây Ngũ vị vảy chồi (Schisandra perulata) đã thu được các hợp chất sạch gồm hai hợp chất steroit:
β-sitosterol (SPH1) và β-sitosterol 3-O-β-D-glucopyranozit (SPE1); hai hợp chất glycerit : 2,3-dihydroxypropyl 28-hydroxyoctacosanoat (SPD2) và 2,3- dihydroxypropyl hexacosanoat (SPH4); ba hợp chất lignan: (7S,8R,8’R,7’R)- 3,4,3’,4’-dimethylene dioxy-7,7’-epoxylignan (SPH2), 3,4-dimetoxy-3’,4’- metylendioxi-7,7’-epoxilignan (SPH3) và axit meso-dihydroguaiaretic
(SPD1); một hợp chất flavonoit : 3,5,7,3’,4’-pentahydroxy-flavan (SPE2).