Thử nghiệm trên động vật có cholesterol máu bình thƣờng trong sàng lọc ban đầu [46]
Các động vật bình thƣờng nuôi với chế độ ăn thƣờng quy đƣợc dùng để nghiên cứu sàng lọc ban đầu. Cho uống thuốc qua ống thông hoặc trộn vào thức ăn. Ở chuột cống trắng, cho uống thuốc trong 4 ngày và thực hiện phân tích huyết thanh vào ngày thứ 5 của thí nghiệm. Các hợp chất làm giảm cholesterol huyết thanh với tỷ lệ ít nhất 20% ở liều 400 mg/kg đƣợc coi là có hoạt tính, và tiếp đó, thử nghiệm các hoạt chất này ở liều thấp hơn. Tuy nhiên, một kết quả âm tính không nhất thiết có nghĩa là thuốc sẽ không có tác dụng trên ngƣời (Steinberg, 1962). Thử nghiệm này là một phƣơng pháp đánh gía tác dụng tƣơng đối nhanh và đơn giản, thƣờng dùng để sàng lọc ban đầu.
Thử nghiệm trên động vật có tăng cholesterol máu [46]
Gây tăng cholesterol máu ở nhiều loài động vật bằng cách cho mỡ và cholesterol vào thức ăn. Chứng tăng cholesterol này có tính chất ngoại sinh. Sự sinh tổng hợp cholesterol nội sinh thƣờng diễn ra rất chậm để đền bù cho các nồng độ cao của cholesterol huyết thanh. Nhƣ vậy, các thuốc có tác dụng chống tăng cholesterol máu bởi chế độ ăn tác động do một hoặc nhiều cơ chế có liên quan với sự ức chế hấp thu cholesterol ở ruột, tăng sự thoái biến cholesterol ảnh hƣởng đến sự sản sinh lipoprotein hoặc tăng nhanh sự thải trừ lipoprotein.
Chuột cống trắng mới thôi bú có nồng độ huyết thanh bình thƣờng cao gấp 2-3 lần chuột cống trƣởng thành có thể sử dụng trong thử nghiệm. Chuột cống trắng trƣởng thành đƣợc gây tăng cholesterol máu bằng cách bổ sung thức ăn với cholesterol 1%, mỡ và các acid mật (nhƣ acid cholic) 1%, và chất đối kháng tuyến giáp propyl thiouracil 0,01% trong nƣớc uống (Wissler và cộng sự, 1954; Anderson và Bowman, 1969; Fukushima và Nakatani, 1969; Nakamara và cộng sự, 1969).
Tăng cholesterol máu gây bởi Estrogen ở chim
Tăng cholesterol máu gây bởi tyloxapol (triton WR-1339) Tăng cholesterol máu gây bởi Tween 80
20
Một số nghiên cứu khác: Chuột cống đƣợc cho ăn thức ăn chứa 0,2% cholesterol và 10% dầu dừa trong vòng 10 tuần để gây tăng cholesterol (Mon-Yuan Yang và cộng sự, 2010). Chuột cống dòng Wistar 180-200 g, cho uống cholesterol trong dầu 25 mg/kg trong vòng 30 ngày để gây tăng cholesterol (Pooja C Ochani and Priscilla D’mello, 2009).
Mỗi phƣơng pháp nghiên cứu tác dụng hạ cholesterol có một số hạn chế vốn có. Nhƣ vậy, một thuốc thử nghiệm không thể đƣợc chấp nhận hay bị loại bỏ dựa trên một phƣơng pháp duy nhất. Sẽ dễ dàng hơn nếu nhà nghiên cứu xem xét cơ chế cơ bản chịu trách nhiệm về tình trạng tăng cholesterol máu của động vật thí nghiệm và có thể, nếu đƣợc biết cơ chế hạ cholesterol máu của thuốc thử nghiệm. Ví dụ, tăng cholesterol máu do chế độ ăn chỉ có ích trong việc phát hiện các thuốc có tác dụng trên hấp thu, thoái biến và bài tiết cholesterol. Không phát hiện đƣợc các thuốc có tác dụng trên sự sinh tổng hợp cholesterol và tăng cholesterol máu đƣợc gây do ngoại sinh, và sự tổng hợp cholesterol nội sinh diễn ra với tỉ lệ thấp.
Việc sử dụng các động vật có cholesterol máu bình thƣờng để nghiên cứu sàng lọc sơ bộ có lợi thế về tính chất nhanh và đơn giản, và thƣờng có thể phát hiện các chất ức chế sự hấp thu và sự tổng hợp cholesterol. Phƣơng pháp gây tăng cholesterol máu dùng Triton có lợi thế là nhanh và giúp phát hiện các thuốc có tác dụng trên sự sinh tổng hợp và thải trừ cholesterol. Các thử nghiệm này khá đơn giản và nhanh, do đó, thích hợp cho việc nghiên cứu sàng lọc ban đầu.