Trong bản luận văn này, do điều kiện còn hạn chế nên chúng tôi chỉ xây dựng đƣợc phƣơng pháp định lƣợng đồng thời một số hoạt chất kháng HIV trong mẫu chế phẩm thuốc. Phƣơng pháp còn có thể đƣợc mở rộng phân tích trong những dạng nền mẫu khác nhau ví dụ nhƣ: mẫu máu, mẫu nƣớc tiểu,...Vì vậy rất cần có những nghiên cứu tiếp theo để phát triển phƣơng pháp áp dụng vào thực tiễn hơn. Việt Nam đang tiến hành nghiên cứu sản xuất các thuốc HIV trong phối hợp điều trị.Hiện nay, nƣớc ta đã sản xuất đƣợc thuốc chống HIV là Lamididrir (Lamivudine 150mg + Zidovudine 300mg). Đây là một phƣơng pháp đóng góp cho công tác kiểm tra chất lƣợng thuốc đang lƣu hành và sử dụng.
65
KẾT LUẬN
Qua cơ sở nghiên cứu các điều kiện thực nghiệm, với mục đích ứng dụng phƣơng pháp điện di mao quản điện động học kiểu Mixen (MEKC) để tách và định lƣợng một số hoạt chất kháng HIV sử dụng phối hợp điều trị trong chế phẩm thuốc, chúng tôi thu đƣợc kết quả nhƣ sau:
1. Đã chọn đƣợc phƣơng pháp phân tích một số hoạt chất kháng HIV với yêu cầu chuẩn bị mẫu đơn giản, dung môi sử dụng là các muối vô cơ, chất hoạt động bề mặt đơn giản là SDS nên rất đơn giản, ít tốn kém và ít độc hại. Chuẩn bị mẫu bằng hòa tan trực tiếp nên tiến hành nhanh chóng và ít sai số.
2. Khảo sát và chọn đƣợc thông số tối ƣu cho quá trình điện di Detector: DAD
Số đo bƣớc sóng chung: Lamivudin 270nm, Zidovudine 264,5 nm và Nevirapin 268,5nm
Kích thƣớc mao quản : Mao quản silica trần, tổng chiều dài 64,5cm, chiều dài hiệu dụng 60 cm, đƣờng kính trong 75µm, loại bubble cell.
Chất tạo mixen : SDS.
Phƣơng pháp bơm mẫu : Thủy động học 50mbar/5s. Thế điện di: 20kV
Dung dịch điện ly nền : Na2B4O7 10mM + SDS 50mM, pH = 9,30. Nhiệt độ : 250C
3. Đánh giá phƣơng pháp phân tích
- Phƣơng pháp đạt tính tƣơng thích hệ thống với RSD <2% và Rs >1,5.
- Phƣơng pháp có tính đặc hiệu ( tính chọn lọc) cao.
- Khoảng tuyến tính của chất phân tích rộng : 3TC (77,25- 231,7 µg/ml) với r=0,996 ; NVP (99,25- 297,7 µg/ml) với r= 0,998 ; AZT (149,0- 447,0 µg/ml) với r= 0,998 ; đã xử lý thống kê để khẳng định không có sai số hệ thống.
- Xác định LOD, LOQ dựa vào đƣờng chuẩn : 3TC có LOD= 10,02µg/ml và LOQ= 33,41µg/ml ; AZT có LOD= 14,55 µg/ml và LOQ= 48,52 µg/ml ; NVP có LOD= 9,85 µg/ml và LOQ= 32,83 µg/ml.
66 - Phƣơng pháp có độ lặp lại cao RSD < 2%.
- Phƣơng pháp có độ đúng cao, độ thu hồi nằm trong khoảng 98%- 102% 4.Phân tích hàm lƣợng trong viên nén
-Với viên nén 3 thành phần dƣợc chất, hàm lƣợng 3TC từ 98,87%- 102,87% ; NVP từ 100,4%- 102,5% ; AZT từ 95,47%- 99,43% so với hàm lƣợng trên nhãn, nằm trong giới hạn cho phép 95% → 105% (Theo Dƣợc điển Việt Nam IV).
-Với viên nén 2 thành phần dƣợc chất, hàm lƣợng 3TC từ 99,0%- 102,4% ; AZT từ 99,13%- 101,57% so với hàm lƣợng trên nhãn, nằm trong giới hạn cho phép 95%- 105% ( Theo Dƣợc điển Việt Nam IV).
67
TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VIỆT
1. Nguyễn Thị Kiều Anh (2004), Một số đặc điểm và ứng dụng của điện di mao quản, Chuyên đề chuyên sâu 3 của nghiên cứu sinh, Trƣờng Đại học Dƣợc Hà Nội.
2. Bộ Y Tế (2007), Hóa dược, tập 2, NXB Y học, Hà Nội.
3. Bộ Y Tế (2004), Dược thư quốc gia Việt Nam, xuất bản lần thứ ba, nhà xuất bản Y học.
4. Bộ Y Tế (2007), Dược thư quốc gia Việt Nam bản bổ sung, xuất bản lần thứ nhất, nhà xuất bản Y học.
5. Bộ Y Tế (2009), Dược điển Việt Nam 4, nhà xuất bản Y học. 6. Bộ Y Tế (2007), Kiểm nghiệm thuốc, nhà xuất bản Y học. 7. Bộ Y Tế (2007), Hóa phân tích 1, nhà xuất bản Y học. 8. Bộ Y Tế (2007), Hóa phân tích 2, nhà xuất bản Y học. 9. Bộ Y Tế (2008) , Tạp chí Dược học, số 385 năm 48, tr 38-42.
10. Bộ Y Tế (2012), Báo cáo tổng kết công tác phòng, chống HIV- AIDS 6 tháng đầu năm và định hướng kế hoạch 6 tháng cuối năm 2012, số 612/BC- BYT. 11.Bộ Y Tế (2011), Chiến lược quốc gia phòng chống HIV/AIDS đến năm 2020 và
tầm nhìn 2030, Ủy ban quốc gia phòng chống HIV/AIDS và phòng chống tệ nạn ma túy, mại dâm
12.Nguyễn Hữu Chí (2006), Hiệu quả và dung nạp của Stavidine, Lamivudine, Nevirapin ở bệnh nhân nhiễm HIV/ AIDS điều trị tại bệnh viện nhiệt đới thành phố Hồ Chí Minh, Bệnh viện nhiệt đới thành phố Hồ Chí Minh.
13.Phạm Luận (2004), Cơ sở lý thuyết điện di mao quản hiệu năng cao, Sách chuyên đề cho sinh viên chuyên ngành hóa phân tích, ĐH Quốc Gia Hà Nội. 14.Tạ Thị Thảo (2005), Bài giảng chuyên đề thống kê trong hóa phân tích, ĐH
Quốc gia Hà Nội.
15.Nguyễn Văn Ri (2011), Các kỹ thuật Phân tích Điện di , Sách chuyên đề cao học). Đại học Khoa học Tự nhiên- Đại học Quốc gia Hà Nội.
68
16.Nguyễn Văn Ri (2007), Các phương pháp tách sắc ký, chuyên đề cao học trƣờng ĐH KHTN - ĐHQG Hà Nội.
TIẾNG ANH
17. A.K. Hemanth Kumar, V.Sudha, Soumya Swaminathan & Geetha Ramachandran (2010), „‟Comparison of HPLC & spectrophotometric method for estimation of antiretroviral drug content in pharmaceutical products‟‟, Indian J Med Res, 132, pp. 390- 394.
18. Arthur L.L. Silva (2012), Journal of pharmaceutical sciences, vol.101 (1), pp.12.
19. Hammer S. M. (2006), “Treatment for Adults HIV infection 2006 Recommendations of the international AIDS Society - USA Panel”, The journal of American medical Association, pp.827-843.
20. Heifer D. (2000), High performance capillary electrophoresis, Agilent Technologies, pp.61-77.
21. Hiren.N.Mistri, ArvindG.Jangid, Ashutosh Pudage, Noel Gomes, Mallika, Sanyal, Pranav, Shrivastav(2007), “High throughput LC-MS/MS method for simultaneous quantification of Lamivudine, stavudine and Nevirapine in human plasma”, Journal of Chromatography B, volum 853, p320-332.
22. Namita Kapoor, Sateesh Khandavilli, Ramesh Panchagnula(2006); Anylytica Chimica Acta;Volum 570, Issue1,p. 41- 45.
23.Mikaela Malm(2008), Drug Analysis Bioanalytical Method Development and Validation; p.23- 25.
24. Ramaiya Sekar, Srinivasan Azhaguvel (2008), “MEKC Determination of Antiretroviral Reverse Transcriptase Inhibitors Lamivudine, Stavudine and Nevirapine in Pharmaceutical Formulations‟‟, Chromatographia, (67), pp.389- 398.
25. Shintani H.; Pholonsky J. (1997), Handbook of capillary electrophoresis application, Blackie academic & professional, p.158.
69
26.SekarR, Azahaguvels (2005), “Simultaneous determination of HIV- protase inhibitors lamivudin and zidovudin in pharmaceutical formulations by micellar electrokinetic chromatography”, Journal of Pharmaceutical and biomedical analysis, India, p.653-660.
27. Sokalingam Anbazhagan (2005), “Simultaneous quantification of Stavudine, Lamivudine and Nevirapine by UV spectroscopy, reverse phase HPLC and HPTLC in tablets”, Journal of Pharmacy and Biomedical Analysis, Volum 39, Issues 3-4, Pages 801-804.
28.Weerasak Samee, Paron Srilamai, Sasithorn Ongart, Ritthichai Suwannaratana, Chayanid Sornchaithawatwong, Suwanna Vorarat (2007), „‟Simultaneous Determination of Lamivudine, Stavudine and Nevirapine in the Presence of Their Acid- Induced Degradation Products by HPLC‟‟, Thai Pharmaceutical and Science Journal, ‘Vol. 2, No. 1‟ , pp. 39-45.
29.Interscience Dublication Johnwiley & sons,inc, Cappilary Electrophoresis method for A wiley , Newyork/ Chichester/ Weinheim/ Brisbane/ Singapore/Toronto. Tr 792, 1297.
30. Laboratory for Analytical Chemistry University of Amsterdam (1996), CE Amsterdam Summercourse.
31.Norbert to A Guzman, Capillary Electrophoresis Technology, Tập 1,2,3. The R.W Johnson Pharmaceutical Reseach Institute Raritan, New Jersey.
32.UNAIDS ( 2002 ) Report on the global HIV/ AIDS Epidemic.