Chúng tôi tiến hành khảo sát thời gian bơm mẫu tại ba gía trị là 3s, 5s và 7s với điều kiện khảo sát nhƣ sau:
- Hỗn hợp mẫu chuẩn tƣơng ứng với nồng độ của Lamivudin 150µg/ml, Nevirapin 200 µg/ml và Zidovudin 300 µg/ml trên dung dịch điện li nền là dung dịch Na2B4O7 10mM + SDS 50mM, pH = 9,30.
44
Hình 3.6.Điện di đồ tại thời gian bơm mẫu 3s, 5s và 7s
Khi nạp mẫu vào mao quản, lƣợng mẫu hay vùng mẫu nạp phải nhỏ hơn giới hạn cho phép (2% ≤ chiều dài l). Nếu vùng mẫu nạp vào quá lớn thì sự phân tán (mở rộng của vùng mẫu sẽ xuất hiện mạnh, do hiện tƣợng khuếch tán. Vùng mẫu càng lớn thì sự phân tán càng lớn. Lúc này độ phân giải và hiệu suất tách (Nef ) sẽ bị khử (bị giảm mạnh) theo sự phân tán mở rộng của vũng mẫu của chất phân tích trong mao quản.
Ta có công thức [8]: ()2 = (Winj)2/12 Với σ : Độ biến động hay độ lệch chuẩn của sự tách trong CE
Bơm mẫu 3s
Bơm mẫu 5s
45
Winj : Độ rộng củamẫu đƣợc nạp vào đầu ống mao quản
Từ công thức trên cho thấy, khi vùng mẫu Winj lớn, thì độ lệch chuẩn σ cũng lớn theo. Nghĩa là số đĩa lý thuyết của cột tách sẽ giảm.
Hình 3.6 thể hiện mối quan hệ giữa chiều cao pic và thời gian bơm mẫu, khi tăng thời gian bơm mẫu, chiều cao pic tăng lên nhƣng không đáng kể. Trong cùng một điều kiện, khi tăng thời gian bơm mẫu, thời gian lƣu các chất hầu nhƣ không thay đổi hoặc thay đổi rất ít, chỉ có chiều cao các pic thay đổi. Vì vậy chúng tôi chọn thời gian bơm mẫu 5s là điều kiện tối ƣu.