L ỜI CẢM ƠN
2.3.2. Phân lập ấu trùng sán lá trên 1 loài cá tự nhiên
Vật liệu:
Nghiên cứu ựược tiến hành từ 4/2012 Ờ 11/2012 ở hai tỉnh Nam định, Ninh Bình. Trong thời gian thực hiện ựề tài tiến hành thu mẫu ựược 6 loài cá
tự nhiên.
Tại Nam định thu ựược tổng số 370 mẫu cá của 4 loài cá tự nhiên. Ninh Bình thu ựược 482 mẫu cá của 5 loài cá tự nhiên ựược sử dụng làm vật liệu của nghiên cứu này (Bảng 2.1 ). Bảng 2.1: Thành phần loài cá và số mẫu kiểm trạ Số mẫu kiểm tra (con) STT Loài cá Nam định Ninh Bình Tổng số mẫu 1 Cá mương Hemiculter leucisculus 171 268 449
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp
ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 28
2 Chày mắt ựỏSqualiobarbus curriculus 28 25 53 3 Cá diếc Carassius auratus 124 112 236 4 Cá rô ựồng Anabas testudineus 47 47 5 Cálành canh Parachela oxygastroides 45 45 6 Cá thiểu Culter flavipinnis 32 32
Tổng số mẫu 370 482
Phương pháp tiêu cơ:
Áp dụng theo Sổ tay phòng thắ nghiệm dự án FIBOZOPA - FIBOZOPA Lab manual, 2005
Pha dung dịch tiêu cơ gồm 6 gam pepsin và 8 ml HCl ựặc pha trong 1 lắt nước cất.
Phân loại loài cá
Cân, ựo kắch thước từng cá thể cá. Nghiền nhỏ từng cá thể cá.
Trộn phần ựã nghiền với dung dịch tiêu cơ sau ựó khuấy ựềụ
đặt trong tủấm 37oC trong 2-3 giờ.
Khi cơ tan hết tiến hành lọc: ựổ sản phẩm tiêu cơ qua lưới lọc có mắt lưới (1 x1) mm và rửa bằng nước muối sinh lý 0,86%.
để lắng hỗn hợp trong vài phút, các bào nang metacercariae nặng sẽ
lắng chìm xuống dưới, loại bỏ phần nước nổi bên trên, giữ lại phần lắng cặn.
đưa phần lắng cặn vào ựĩa petri chứa nước muối sinh lý 0,86%, xoay nhẹ ựĩa cho các chất lắng cặn tập trung vào giữa ựĩa petri, dùng pipet loại bỏ
phần nhẹ nổi trên mặt.
Quan sát trên kắnh hiển vi soi nổi ựểựếm số lượng metacercariaẹ
Chuyển metacercariae sang lam kắnh, nhỏ một giọt nước muối sinh lý, quan sát hình thái chi tiết dưới kắnh hiển vi 4x10, 10x10, 40x10.
Trường đại học Nông nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp
ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ 29