- Khảo sát độ lặp lại: tiến hành đo mẫu nhiều lần trên cùng một mẫu để kiểm tra độ lặp lại cũng như mức độđồng nhất của vial đựng mẫu Một ống mẫu chuẩn sau khi phức
6.4.4. So sánh với kết quả theo phương pháp AOAC, AOCS
Tiến hành xác định PV trên cùng một mẫu bằng phương pháp sử dụng bộ kít và phương pháp AOAC, AOCS.
¾ Kết quả: Mẫu AOCS PP quang Dầu đậu nành 1 105,1 ± 3,1 102,14 ± 0,63 Dầu đậu nành 2 102,7 ± 2,8 101,93 ± 0,63 Dầu cooking oil 1 53,0 ± 4,7 50,2 ± 1,6 Dầu cooking oil 2 55,0 ± 4,4 51,2 ± 1,8 Dầu kiddy 69,4 ± 3,4 68,7 ± 1,4
Bảng 6.6: kết quả đo mẫu thật bằng phương pháp dùng bộ kit trắc quang và AOAC, AOCS
Biểu diễn độ tương quan của 2 phương pháp:
GVHD: TS. Nguyễn Thị Thanh Mai Khóa Luận Cao Học
Đồ thị 6.1: Đồ thị phân bố giá trị PV theo AOAC, AOCS và PP dùng dùng bộ kit trắc quang
Nhận xét
Phương pháp dùng bộ kit đo màu bằng máy có độ tương quan cao với phương pháp chuẩn AOAC, AOCS; r = 0,998, SDD =1,57
Khoảng tuyến tính hẹp hơn so với phương pháp dùng máy đo quang Shimazu. Nguyên nhân là do đèn sử dụng không phát bước sóng cực đại tại 491nm.
Phải sử dụng hệ số hiệu chỉnh cho mỗi lần đo bằng cách sử dụng mẫu chuẩn.
PV theo PP PV theo PP AOAC,
GVHD: TS. Nguyễn Thị Thanh Mai Khóa Luận Cao Học
Trong đề tài này chúng tôi đã giải quyết được các vấn đề sau:
¾ Đã cải tiến phương pháp trắc quang xác định peroxid trong dầu ăn và các thực phẩm chế biến từ dầu bằng việc sử dụng muối amoni tứ cấp CTMA ghép cặp với phức màu giữa Fe3+ với SCN- và chiết phức hình thành bằng dung môi etylacetat. Phương pháp này có LOD, LOQ nhỏ hơn 24 lần so với phương pháp không ghép cặp ion, do đó có độ nhạy cao, phức hình thành bền, phản ứng giữa peroxid trong pha dầu với Fe2+ xảy ra dễ dàng hơn. Bước đầu áp dụng qui trình này để xác định peroxid trong các mẫu dầu ăn và so sánh với phương pháp tiêu chuẩn AOAC, AOCS (chuẩn độ iod) cho thấy hai phương pháp có độ tương quan cao.
¾ Đã chế tạo bộ kit so màu bằng mắt để xác định PV trong dầu ăn dựa trên phương pháp trắc quang cải tiến trên. Bộ kít so màu có 3 khoảng màu PV bán định lượng thay đổi rõ ràng theo tiêu chuẩn đánh giá PV trong dầu ăn. Ưu điểm của bộ kít này là có thể bán định lượng nhanh PV tại hiện trường, thao tác đơn giản. Tuy nhiên bộ
kít này chỉ phù hợp với các mẫu dầu mỡ lỏng, đối với mẫu thực phẩm rắn chỉ xác
định được khi đã qua xử lý mẫu.
¾ Đã chế tạo bộ kit đo màu bằng máy cầm tay để xác định PV trong dầu ăn dựa trên phương pháp trắc quang cải tiến trên. Máy đo có độ tương quan cao với phương pháp chuẩn AOAC, AOCS. Tuy nhiên, khoảng tuyến tính đo trên máy cầm tay hẹp hơn.
Chi phí cho hai bộ kit này rẽ, gọn nhẹđáp ứng được nhu cầu cần xác định nhanh mẫu tại hiện trường. Ngoài ra không yêu cầu nhiều kỹ thuật phức tạp, hộ gia đình cũng có thể trang bị để sử dụng tại nhà. Thêm một lựa chọn để xác định PV bên cạnh một số bộ
kit tương tựđã có mặt trên thị trường.
Tuy nhiên, một số vấn đề kỹ thuật cần phải nghiên cứu thêm để có thể thương mại hóa được 2 bộ kit này như vấn đề bảo quản chất chuẩn, dùng đèn chuyên dụng (bước sóng 491nm, dùng cho bộ kit dùng máy) để tăng độ nhạy.
GVHD: TS. Nguyễn Thị Thanh Mai Khóa Luận Cao Học
[1] AOCS (2000), Peroxide Value, acetic acid - chloroform method Cd 8 -53,
American oils chemist’s society, 5th edition.
[2] Anna Grau, Rafael Codony, Macda Rafacas, Ana C. Barroeta, and Francesc Guardiola (2000), lipid hydroperoxide determination in dark chicken meat through a ferrous oxidation – xylenol orange method, Journal Agritical food Chemistry, 48(9), 4136-4143.
[3] Astrid Gojmerac Ivsic and Biserka Tamhina (2003), Extraction and formation of Iron(III) Thiocyanate complexes: Application for Spectrophotometric determination of Iron, Croatica chemical acta, 76 (4), 323-328.
[4] Cibele C Osawa, Lireny A Goncalves, Sidnei Ragazzi (2007), Determination of hydroperoxid in oils and fats using kits, Journal of the science of food and agriculture, (87), 1659-1666.
[5] Eunok Choe and David B.Min (2006), Mechanisms and factors for Edible oil oxidtion, Comprehensive review in Food Science and Food safety, (5), 169- 184.
[6] Gülgün Yildiz, Randy L. Wehling, Susan L. Cuppett (2003), Comparison of four analytical methods of the determination of peroxid value in oxidized soybean oils, the journal of the American oil chemists’ society, 80 (2), 103- 107.
[7] N.P. Analytical laboratory, Measuring rancidity in fats and oils. (http://www.npal.com/docs/npal_document_71.pdf)
[8] R.A. Chapman and K. Mackay (1949), The estimation of peroxides in fats and oils by the Ferric thiocyanate method, the journal of the American oil chemists’ society, 360-363.
GVHD: TS. Nguyễn Thị Thanh Mai Khóa Luận Cao Học
http://lipidlibrary.aocs.org/Lipids/tag2/index.htm
[10] Warner K., E.N. Frankel, and T.L. Mount (1998), Flovor and oxidative stability of soyabean, sunflower and low erucic acid rapeseed oils, the journal of the American oil chemists’ society, (66), 558-564.
[11] Yoo S., H., Min D., B. (1987), Analyses of phospholipids in soybean oils by HPLC, Korean Journal of Food and Science Technology, 19 (1), 66-68 [12] Cù Thành Long, Vũ Đức Vinh (2002), Hướng Dẫn Thực Hành Phân Tích
Định Lượng bằng Các phương Pháp hóa học kết hợp với phương pháp xử lý thống kê hiện đại,Nhà xuất bản ĐHQG-TPHCM,TP.HCM.
GVHD: TS. Nguyễn Thị Thanh Mai Khóa Luận Cao Học
Nguyên tắc và hoạt động của máy đo quang tự chế
Mạch nhận tín hiệu được thiết kế với một khuếch đại thuật toán TL081CN. Sơ đồ
mạch điện này được cho như hình dưới (hình 6.8). LED phát quang 2SYG560 được sử
dụng có khoảng phát xạ 490 - 600nm. Photodiod được sử dụng là loại BPW21 có cường
độ hấp xạ cực đại 550nm. Nguồn cho LED được lấy trực tiếp từ modun chuyển đổi tương tự/số USB1208LS (cổng 13). Nhờ vậy cường độ phát xạ của LED được điều khiển trực tiếp từ phần mềm qua USB1208LS.
¾ Nguyên tắc hoạt động của mạch:
Khi LED phát sáng, cường độ ánh sáng phát ra được photodiode chuyển thành dòng diện ip, dòng điện này được biến đổi tương ứng thành điện thế Ep qua TL081CN: Ep
= -R1ip. Điện thế này được biến đổi thành tín hiệu số qua USB1208LS và hiển thị trên máy tính. Cường độ ánh sáng phát ra bị giảm bớt khi có một chất hấp thụ đặt chính giữa LED và photodiode. Theo định luật Lamber – Beer, độ hấp thu tỉ lệ với nồng độ của chất hấp thu.
Để giảm nhiễu từ nguồn điện bên ngoài, nguồn cấp cho mạch khuếch đại được lấy trực tiếp từ cổng USB của máy tính (+5VDC) được chuyển đổi thành ±12VDC với IC đảo
điện áp DC/DC TRACO TEL 3 – 1222. Công suất tối đa của nguồn là 3W.
GVHD: TS. Nguyễn Thị Thanh Mai Khóa Luận Cao Học
Hình 6.8: Sồ đồ mạch điện khuếch đại tín hiệu.
SB1208LS là một board tích hợp 4 tính chất: tín hiệu số I/O, tín hiệu analog I/O.
Hình 6.8 là sơ đồ các chân của modun USB1208LS. Độ phân giải của thiết bị này là 12 bit, có thể cho giá trị độ hấp thu quang chính xác > 0.03 amu, phù hợp cho những phân tích thông thường.
Hình 6.9: sơ đồ các chân của modun USB1208LS
GVHD: TS. Nguyễn Thị Thanh Mai Khóa Luận Cao Học
dễ dàng và tiện ích. Phần mềm thu nhận tín hiệu và xử lý tín hiệu được viết bằng ngôn ngữ lập trình Delphi 7.0. Phần mềm được viết với mục tiêu chính xác, đơn giản, dễ sử
dụng. Giao diện chính của phần mềm thu nhận tín hiệu có thể thấy trên hình 6.10, 6.11…
GVHD: TS. Nguyễn Thị Thanh Mai Khóa Luận Cao Học
Hình 6.10: Giao diện chính