1.3. Tổng quan về tinh hình sử dụng kháng sinh và hormon
1.3.2. Nghiên cứu ở Việt Nam
Ở Việt Nam tồn dƣ KS, HM trong sản phẩm thịt của ngành chăn nuôi đã đƣợc phát hiện từ những năm 2004 và gây đƣợc sự quan tâm của giới khoa học.
Tồn dƣ này cũng đồng nghĩa với ô nhiễm thực phẩm và là vấn đề luôn mang tính thời sự. Tồn dƣ KS, HM trong thịt lợn, thịt gà cũng đƣợc xem nhƣ là một dạng ô nhiễm thực phẩm về mặt hoá học.
Những nghiên cứu về tồn dƣ KS, HM tại Việt Nam, đặc biệt gây đƣợc sự quan tâm của các nhà khoa học nhiều hơn từ khi Việt Nam ra nhập WTO. Tháng 5 năm 2007, FDA Mỹ đã công bố danh sách 28 nhà xuất khẩu thuỷ hải sản của Việt Nam có 30 mặt hàng vi phạm các tiêu chuẩn vi sinh, KS. Riêng tại Nhật Bản, Việt Nam là một trong 31 nước bán thuỷ sản sang Nhật bị phát hiện có dư lƣợng KS. Đây cũng là hồi chuông cảnh báo cho các sản phẩm có nguồn gốc động vật có tồn dƣ KS, HM. Tiếp sau đó các nhà khoa học tiến hành phân tích dƣ lƣợng KS tập trung nhiều vào các mẫu thực phẩm có nguồn gốc động vật khác nhau như thịt lợn, mật ong, sữa, cá...để có cơ sở khuyến cáo cho người tiêu dùng cũng nhƣ các biện pháp nhằm giảm sự xuất hiện dƣ lƣợng này [8], [11].
Ở Việt Nam đã có một số ít nghiên cứu về ảnh hưởng của KS, chất kích thích tăng trọng trong TĂ chăn nuôi chế biến sẵn ảnh hưởng đến chất lượng vệ sinh an toàn thực phẩm. Một số nghiên cứu trong những năm gần đây đã đề cập đến dƣ lƣợng KS nhóm TC trong thịt và phủ tạng [5], [20].
Một số loại HM và dẫn xuất của nó đã đƣợc bổ sung vào TĂ chăn nuôi nhằm kích thích tăng trưởng cho gia cầm, gia súc. Khi trộn thyroxin vào TĂ với lượng nhỏ 40 – 60 ppm có tác dụng tăng trưởng rõ rệt đối với gia cầm, gia súc đang ở trong tình trạng thiếu hụt iod hoặc khẩu phần ăn hàng ngày không cân đối các chất dinh dƣỡng [7]. Nếu kéo dài thời gian sử dụng TĂ chăn nuôi có bổ xung thyroxin và không đủ thời gian cách ly trước khi giết mổ 10 ngày thì lượng tồn dƣ thyroxin có thể vƣợt mức cho phép, vi phạm các qui định về chất lƣợng vệ sinh an toàn thực phẩm [14].
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/
Nguyễn Văn Hoà (2006) nghiên cứu khảo sát tình hình sử dụng KS trong chăn nuôi cho thấy: Đa số người chăn nuôi sử dụng KS không hợp lý như liều lƣợng cao, sử dụng liên tục để phòng ngừa bệnh cho gia súc đến khi xuất bán.
Xét nghiệm các mẫu thịt đƣợc lấy trực tiếp tại các chợ cho thấy có 26 loại KS đƣợc phát hiện. Trong đó loại đƣợc sử dụng nhiều nhất là chloramphenicol (chiếm 15,35%), tylosine (15%), colistine (13,24%), norfloxacine (10%), gentamycine (8,35%), nhóm TC (7,95%), ampicilline (7,24%)... trong đó, chloramphenicol là KS hiện đã bị cấm sử dụng trên nhiều quốc gia [8].
Trần Quang Thủy (2007) đã tiến hành phân tích 150 mẫu thịt và gan của gia súc, gia cầm tại Hà Nội, kết quả phân tích cho thấy có 12% số mẫu dương tính với KS nhóm TC. Trong đó, KS loại TC chiếm 6%; OTC chiếm 8%. Cũng trong nghiên cứu này tác giả đã bổ sung 220 ppm KS loại CTC vào thức ăn thì dƣ lƣợng tồn dƣ ở gan là 0,66 ppm, ở thận là 0,42 ppm [23].
Nguyễn Quang Tuyên (2008) đã xác định tồn dƣ KS trong thịt, gan và trứng gà tại Thái Nguyên cho biết tồn dƣ KS loại OTC chiếm 33%, TC chiếm 33%. Số lƣợng mẫu có dƣ lƣợng kháng sinh vƣợt quá tiêu chuẩn cho phép từ 1,05 – 1,27 lần [30].
Nguyễn Duy Hoan (2009) cho biết có 7 trong tổng số 17 loại KS đƣợc sử dụng tại TP. Thái Nguyên trong đó có OTC và CTC. Có 25% mẫu thịt gà có tồn lưu KS, trong đó KS loại OTC chiếm 28,13%. Có 18,75% mẫu phát hiện có tồn dƣ HM [9].
Nguyễn Đức Thi và cộng sự (2009) cho thấy kết quả nghiên cứu về dƣ lƣợng KS trong thịt gà, gan gà và trứng gà chiếm 20,78%; gan gà 33,33%; tiếp đến là mẫu thịt 29,17%; thấp nhất là mẫu trứng 20,80%; có hàm lƣợng các loại KS vƣợt tiêu chuẩn cho phép từ 1,06 đến 2,80 lần. Loại KS phát hiện tồn dƣ là TC và OTC, trong đó OTC chiếm 25% số mẫu vƣợt tiêu chuẩn cho phép cao hơn TC 16,67%. Từ những kết quả thu đƣợc trong nghiên cứu các tác giả cho biết 2 loại KS trên đƣợc sử dụng rộng rãi trong chăn nuôi gia cầm tại Thành phố Thái Nguyên và các vùng xung quanh, chƣa tuân thủ đúng nguyên tắc, điều này đã làm cho sản phẩm từ gia cầm tiêu thụ trên thị trường thành phố không đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm [19].
Bùi Thị Mai Hương (2010) cho thấy có 5,5% số mẫu trong 290 mẫu thịt
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/
lợn trên thị trường Hà Nội có tồn dư KS TC. Trong nghiên cứu chỉ ra yếu tố vùng đóng vai trò chủ yếu trong nguy cơ liên quan đến tồn dƣ KS. Tại các khu vực chăn nuôi ở Miền Nam cũng nhận thấy có 4 cơ sở chiếm 22,2% các mẫu thịt gà có tồn dƣ các loại KS TC, amoxyline, erofloxacine với hàm lƣợng cao gấp từ 1,4 - 30,9 lần so với ngƣỡng cho phép [31].
Theo nghiên cứu của Nguyễn Thị Thu Thủy (2011), nếu bổ sung 200 g clenbuterol vào 1 kg thức ăn thì chưa phát hiện sự tồn lưu của chúng trong sản phẩm thịt. Nếu bổ sung từ 300 g đến 500 g vào 1kg thức ăn thì lƣợng tồn dƣ trong sản phẩm thịt ở khoảng 78,05 ppb đến 215,45 ppb [21].
Nguyễn Thị Thu Thủy (2011) cho biết ở các tỉnh Đồng bằng sông Cửu Long từ năm 2007 đến năm 2009 có 26,97% số mẫu thức ăn chăn nuôi phát hiện có sử dụng clenbuterol với hàm lƣợng dao động từ 112 -1257 ppb. Ở các tỉnh Cần thơ, Hậu Giang, Vĩnh Long năm 2008 trong các mẫu thịt gà, thịt lợn phân tích có 266 trong số 758 mẫu có tồn dƣ clenbuterol; năm 2009 trong các mẫu thịt gà, thịt lợn thu thập có 50 trong 519 mẫu có tồn dƣ clenbuterol [21].
Vi Thị Thanh Thủy (2011) cho biết từ năm 2008 đến năm 2011 ở tỉnh Thái Nguyên mức độ tồn dƣ kháng sinh, hormone trong sản phẩm thịt lợn, thận lợn, gan lợn còn khá cao: 27,45% số mẫu. Trong đó số mẫu gan lợn có tồn dƣ kháng sinh chiếm tỷ lệ cao nhất: 39,71%, tiếp đó là thận lợn 32,35% và thịt lợn 10,29%. Loại kháng sinh tồn dƣ cao nhất là OTC chiếm 20,09%. Hàm lƣợng OTC tồn dƣ trung bình vƣợt quá TCCP từ 2,30 đến 3,06 lần. Mức tồn dƣ HM trong sản phẩm thịt lợn, thận lợn, gan lợn chiếm 18,63% số mẫu. Trong đó số mẫu gan có tồn dƣ HM chiếm tỷ lệ cao nhất: 26,47%, thận lợn: 16,18% và thịt lợn: 13,23%. Loại HM tồn dƣ là 17ò-estradiol vƣợt cho TCCP từ 1,04 lần đến 6,03 lần [22].
Hoá chất tồn dƣ trong sản phẩm chăn nuôi là nguy cơ tiềm ẩn đe dọa tới sức khoẻ của con người. Phần lớn các lò mổ tập trung thiếu mặt bằng cho giết mổ, các công đoạn giết mổ không được phân chia riêng rẽ; nguồn nước sử dụng, đặc biệt là nước thải không bảo đảm vệ sinh thú y. Công tác kiểm dịch động vật còn kém hiệu quả, trang thiết bị cho các chi cục thú y, trạm, chốt kiểm dịch còn hạn chế.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/
Để giảm giá thành sản xuất, một số nhà chăn nuôi dùng chất cấm để tạo nạc và dùng KS để ngừa bệnh và tăng trọng trong giai đoạn cuối (xuất chuồng).
Tình trạng dƣ thừa KS trong thực phẩm là một điều đáng quan ngại tại Việt Nam. Sử dụng KS và chất kích thích tăng trưởng vô tội vạ càng ngày càng tăng khó khăn cho những nhà chăn nuôi làm ăn chân chính.
1.4. Các phương pháp phát hiện kháng sinh, hormone.
Có nhiều phương pháp phát hiện dư lượng các chất KS trong thịt lợn [16] và trong thức ăn chăn nuôi như phương pháp Elisa, phương pháp test vi sinh vật...
Phương pháp Elisa là một phương pháp đơn giản, nhanh gọn nhưng độ đặc hiệu bị giới hạn vì thường thì kháng nguyên có ít nhất là 2 epitope (trình diện kháng nguyên) mà phương pháp này chỉ sử dụng 1 kháng thể gắn vào một epitope.
và phải đánh dấu cho từng kháng thể chuyên biệt với từng đối tượng. Phương pháp test nhanh bằng vi sinh vật chỉ định tính hoặc bán định lƣợng đƣợc kháng sinh. Phương pháp phổ biến nhất hiện nay thường được sử dụng là phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (high performance liquice chromatography- HPLC).
Phương pháp này xác định chất tồn dư ưu việt hơn các phương pháp khác là do có độ nhạy với một giới hạn phát hiện thấp nhất của chất bị cấm. Phân tích HPLC có độ tin cậy và chắc chắn không có dương tính giả và âm tính giả [5], [19].
Theo G. Maghuin-Rogister (2000), có hàng loạt các chất cần nghiên cứu, ở bước phát hiện sàng lọc người ta sử dụng phương pháp có thể phát hiện nhiều chất tồn dư. Phương pháp này chỉ cần một phân tích có thể chứng minh được sự có mặt của nhiều chất thuộc cùng họ thuốc. Phương pháp phát hiện đặc hiệu chỉ có thể xác định một chất, không cho kết quả dương tính giả, dùng để phát hiện các chất đặc biệt nguy hiểm cho sức khoẻ cộng đồng nhƣ: Xác định dƣ lƣợng KS chloramphenicol hay HM đồng hoá diethylbestrol [32].
Trên thế giới, hiện nay có một số phương pháp như: Phương pháp miễn dịch emzym (ELISA); Phương pháp vi sinh vật (test vi sinh vật học), phương pháp lý hoá để xác định các chất tồn dƣ trong mô của động vật [6]. Mỗi một phương pháp có những ưu nhược điểm khác nhau nhưng hiện nay phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (High performance liquice chromatography - HPLC)
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn/
đang đƣợc chú ý sử dụng, do ƣu điểm có độ chính xác cao, phát hiện đƣợc hàm lƣợng rất nhỏ các KS và HM tồn dƣ trong thực phẩm.
Phương pháp HPLC được bắt nguồn từ nhiều thí nghiệm phân tích thực vật trên cột chứa một chất hấp phụ của nhà hóa học tasvet năm 1903. Ra đời năm 1967-1968 trên cơ sở phát triển và cải tiến từ phương pháp sắc ký cột cổ điển. HPLC là một phương pháp chia tách trong đó pha động là chất lỏng và pha tĩnh chứa trong cột là chất rắn đã được phân chia dưới dạng tiểu phân hoặc một chất lỏng phủ lên một chất mang rắn, hay một chất mang đã đƣợc biến bằng liên kết hóa học với các nhóm chức hữu cơ. Phương pháp này ngày càng được sử dụng rộng rãi và phổ biến vì nhiều lý do: Có độ nhạy cao, khả năng định lƣợng tốt, thích hợp tách các hợp chất khó bay hơi hoặc dễ phân hủy nhiệt. Nguyên tắc cơ bản của sự chia tách trong sắc ký là một pha động di chuyển qua một pha tĩnh và kéo dài các chất tan trong hỗn hợp phân tích di chuyển theo với những tốc độ khác nhau [5]. Hiện nay các phương pháp sắc ký cổ điển như là phương pháp sắc ký lớp mỏng nhƣ Kieselguhr, Silicagel và Celluloza ít đƣợc sử dụng trong thực tế để phân tích dư lượng KS và HM vì độ nhạy thấp. Phương pháp sắc ký giấy có một số ƣu điểm so với sắc ký lỏng nhƣ sử dụng rất ít dung môi, thời gian phân tích ngắn, hiệu lực tách cao thường dùng để phân tích các mẫu là sữa, mật ong và cá [40], [41].