Xác định tỷ lệ tiêu hoá để đánh giá giá trị dinh dưỡng của thức ăn hay còn gọi là phương pháp thử mức tiêu hoá. Phương pháp này được sử dụng để xác định, tính toán phần có khả năng tiêu hoá được của thức ăn trong cơ thể vật chủ, kết hợp với phương pháp phân tích thành phần hoá học của thức ăn
giúp ta xác định giá trị dinh dưỡng của thức ăn khá chính xác. Có hai phương pháp xác định tỷ lệ tiêu hoá như sau:
2.5.1. Xác định tỷ lệ tiêu hoá trực tiếp trên cơ thể con vật (in vivo)
Theo phương pháp này cần chọn những gia súc khoẻ mạnh có sức sản xuất đại diện chung cho đàn, để đưa vào thí nghiệm. Thời gian thí nghiệm bao gồm thời gian chuẩn bị cho gia súc ăn thức ăn sẽ thí nghiệm để làm quen với thức ăn (khoảng 7- 15 ngày tuỳ từng loại gia súc). Thời gian thí nghiệm chính kéo dài 6 - 7 ngày đối với gia cầm và lợn, 10 - 12 ngày đối với đại gia súc.
Trong thời gian thí nghiệm cần tính toán lượng thức ăn ăn vào và lượng thải ra (phân, nước tiểu) sau đó xác định tỷ lệ tiêu hoá dựa vào công thức:
Tỷ lệ tiêu hóa Chất dinh dưỡng A ăn vào - chất dinh dưỡng A ở phân
chất dinh dưỡng A = Chất dinh dưỡng A ăn vào ×100 2.5.2. Xác định tỷ lệ tiêu hoá in vitro
Phương pháp này thường được áp dụng để tính toán khả năng tiêu hoá của thức ăn thô xanh, thức ăn giàu xơ trong điều kiện phòng thí nghiệm.
Nguyên tắc của phương pháp này là khi lên men yếm khí carbohydrate và thức ăn trong dạ cỏ bởi vi sinh vật sẽ tạo ra các ABBH, CO2, CH4, H2…đồng thời các ABBH sẽ lại phản ứng với đệm Bicacbonat (từ nước bọt hoặc môi trường dung dịch đệm) để giải phóng ra khí CO2, CH4, H2… Quá trình sinh khí xảy ra đồng thời, song hành với quá trình phân giải xơ (Schofield và cộng sự, 1994). Lượng khí sinh ra từ quá trình trên có tương quan chặt chẽ với tỷ lệ tiêu hoá và giá trị năng lượng của thức ăn. Do đó có thể áp dụng để dự đoán tỷ lệ tiêu hoá và giá trị dinh dưỡng của thức ăn.
- Phương pháp sử dụng túi nilon (in situ hay in sacco).
Kỹ thuật in situ hay in sacco hay còn gọi là kỹ thuật túi nilon (Orskov và cộng sự, 1980). Theo phương pháp này các loại túi được sử dụng có đặc tính không tiêu hoá, bền trong môi trường dạ cỏ. Thường dùng túi có cấu tạo bằng sợi hoặc nilon. Các mắt lưới của túi rộng khoảng 30-60 micromet để cho
dịch dạ cỏ có thể xâm nhập vào bên trong túi cũng như chất dinh dưỡng dễ dàng thoát qua bề mặt túi.
- Phương pháp hai giai đoạn ( two- stage method)
Nguyên tắc của phương pháp là sau khi đem ủ với dịch dạ cỏ khoảng 48 giờ, đem thuỷ phân bằng enzym hoặc xử lý bằng nước rửa trung tính. Sau đó các chất dinh dưỡng trong thức ăn được chuyển qua một bộ phân lọc. Sau khi lọc xong các chất dinh dưỡng này đã được coi như tiêu hoá (Tilley và Terry, 1963).
Phương pháp này tính được khả năng tiêu hoá biểu kiến của thức ăn. Tuy nhiên chất cặn bã có thể gồm cả chất cặn bã của vi sinh vật và những chất không hoà tan trong men pepsin do đó ảnh hưởng đến kết quả cuối cùng.
- Phương pháp Gas production (Kỹ thuật sinh khí in vitro):
Kỹ thuật sinh khí sinh khí in vitro hay còn gọi là phương pháp Gas production (Menke và Steigass, 1988). Phương pháp này được sử dụng rộng rãi trong việc đánh giá giá trị dinh dưỡng của thức ăn, do ưu điểm nổi bật so với hai phương pháp thử mức tiêu hoá bằng túi nilon (in sacco hay in situ) và phương pháp hai giai đoạn (two- stage technique) do hai phương pháp đánh giá giá trị dinh dưỡng của thức ăn này còn một số hạn chế về độ chính xác của kết quả.
Kỹ thuật sinh khí in vitro có hiệu quả hơn so với kỹ thuật in sacco trong việc đánh giá ảnh hưởng của tannin hay một số các nhân tố kháng dinh dưỡng khác (Makkar và cộng sự, 1995). Trong phương pháp in sacco có yếu tố không bị phân giải trong dạ cỏ có thể được thoát ra khỏi túi nilon và không được lên men nhưng vẫn được coi như là phần chất hữu cơ bị tiêu hoá. Thêm vào đó kỹ thuật sinh khí in vitro có thể theo dõi được các ảnh hưởng của chất dinh dưỡng, chất kháng dinh dưỡng (Makkar và cộng sự, 1995). Kỹ thuật sinh khí in vitro còn cho phép xác định sinh khối vi sinh vật được tạo ra từ quá trình tiêu hoá thức ăn và nghiên cứu động thái lên men của các loại thức ăn trong dạ cỏ, từ đó xây dựng khẩu phần ăn hợp lý cho con vật. Do vậy phương pháp sinh khí in vitro khá thích hợp cho việc ước tính, xác định tỷ lệ tiêu hoá cũng như giá trị năng
lượng của thức ăn so với các phương pháp khác. Phương pháp này khá phù hợp với các nước đang phát triển vì không đòi hỏi nhiều lao động, trang thiết bị và khá rẻ tiền. Đặc biệt khi kết hợp với phương pháp in vivo có thể mang lại kết quả cao hơn trong việc dự đoán giá trị dinh dưỡng của thức ăn cho gia súc nhai lại.