Phương pháp kiểm tra vi sinh vật

Một phần của tài liệu Đánh giá mức độ ô nhiễm vi sinh vật trên thịt lợn sữa đông lạnh xuất khẩu tại một số cơ sở giết mổ thuộc khu vực thành phố Hải Dương (Trang 76 - 90)

1.1. Xỏc ủịnh tổng số vi sinh vật hiếu khớ trong thịt lợn sữa ủụng lạnh xuất khẩu theo TCVN 4884:2005

Nguyên lý

Trờn mụi trường thạch PCA trong ủiều kiện hiếu khớ ở 30°C sau 24-72h, cỏc vi sinh vật hiếu khí có khả năng phát triển và hình thành những khuẩn lạc riêng rẽ.

Do ủú, cú thể ủếm số khuẩn lạc trờn mụi trường thạch PCA ủể xỏc ủịnh số lượng vi sinh vật cú chứa trong 1g mẫu phõn tớch và ủược biểu diễn dưới dạng số ủơn vị hỡnh thành khuẩn lạc CFU (Colony Forming Unit) trong một ủơn vị khối lượng thực phẩm.

Cách tiến hành

Dựng phương phỏp ủổ ủĩa.

Với mỗi mẫu xột nghiệm phải nuụi cấy ớt nhất ở 3 ủộ pha loóng liờn tiếp, mỗi ủộ pha loóng ủược cấy trờn 2 ủĩa petri vụ trựng.

ðối với mẫu thịt lợn ủụng lạnh thường sử dụng 3 ủộ pha loóng 10-2, 10-3, 10-4 ủể nuụi cấy.

Dựng pipet vụ trựng chuyển 1 ml dung dịch mẫu ở cỏc ủộ pha loóng tương ứng vào giữa cỏc ủĩa petri vụ trựng.

Rút vào mỗi ủĩa khoảng 15 ml mụi trường Plate Count Agar (PCA) ủó ủun tan chảy và ủược làm nguội ủến nhiệt ủộ 44-47°C. Xoay nhẹ ủĩa theo chiều kim ủồng hồ hoặc lắc sang trỏi và phải một cỏch nhẹ nhàng ủể cho mẫu tan ủều vào mụi trường.

ðặt ủĩa trờn mặt phẳng ngang ủể thạch ủụng tự nhiờn ở nhiệt ủộ phũng, lật ỳp cỏc ủĩa và ủặt vào tủ ấm 30°C nuụi ấm trong 24-72h.

Tính kết quả

Chọn tất cả cỏc ủĩa cú khuẩn lạc mọc riờng rẽ và cú số khuẩn lạc nằm trong khoảng từ 15 ủến 300 khuẩn lạc/ủĩa ủể ủếm. ðộ pha loóng càng cao thỡ số khuẩn lạc càng ớt do ủú sự phõn bố khuẩn lạc trờn cỏc ủĩa nuụi cấy phải hợp lý. Nếu kết quả không hợp lý thì phải tiến hành các bước nuôi cấy lại.

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 67

Tổng số vi sinh vật hiếu khớ trong 1g mẫu ủược tớnh theo cụng thức:

∑C X = –––––——

(n1 + 0,1n2)*d Trong ủú:

X: tổng số vi sinh vật hiếu khí trong 1g thịt (CFU/g)

C: tổng số khuẩn lạc ủếm ủược trờn cỏc ủĩa ở 2 ủộ pha loóng liờn tiếp.

n1: là số ủĩa ở ủộ pha loóng thứ nhất ủược ủếm.

n2: là số ủĩa ở ủộ pha loóng thứ 2 ủược ủếm.

d : hệ số pha loóng với ủộ pha loóng thứ nhất ủược ủếm.

Nếu cỏc ủĩa của 2 ủộ pha loóng liờn tiếp cú số khuẩn lạc từ 15-30, tớnh số khuẩn lạc của mỗi ủộ pha loóng và kết quả là trung bỡnh số học của 2 giỏ trị thu ủược.

Nếu 2 ủĩa nuụi cấy ứng với ủộ pha loóng 10-1 cú số khuẩn lạc < 15 thỡ X = m

d

1 với m là trung bỡnh của số khuẩn lạc ở 2 ủĩa.

Nếu 2 ủĩa nuụi cấy ở ủộ pha loóng 10-1 khụng cú khuẩn lạc nào thỡ X <

d

1 với d là ủộ pha loóng của huyễn dịch ban ủầu, d = 10-1.

Cỏch biểu thị kết quả: Số thập phõn từ 1.00 ủến 9.99 nhõn với số mũ tương ứng, ví dụ 1.56*104CFU/g.

1.2. Xỏc ủịnh E. coli trong thịt lợn sữa ủụng lạnh xuất khẩu theo TCVN 7924:

2/2008 Nguyên lý

E. coli dương tớnh β- glucuronidaza. Vi khuẩn ở nhiệt ủộ 440 hỡnh thành cỏc khuẩn lạc màu xanh ủiển hỡnh trờn mụi trường trypton- mật- glucuronid (TBX).

Dựa vào ủặc tớnh này ta cú thể phỏt hiện và ủịnh lượng ủược vi khuẩn E. coli.

Cách tiến hành

Cấy ở 3 ủộ pha loóng 10-1; 10-2;10-3, mỗi ủộ pha loóng nuụi cấy trờn 2 ủĩa môi trường.

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 68

Dựng pipet vụ trựng chuyển 1 ml dung dịch mẫu ở cỏc ủộ pha loóng tương ứng vào giữa cỏc ủĩa petri vụ trựng.

Rút vào mỗi ủĩa khoảng 15 ml mụi trường TBX ủó ủun tan chảy và ủược làm nguội ủến nhiệt ủộ 44-47°C. Xoay nhẹ ủĩa theo chiều kim ủồng hồ hoặc lắc sang hai bờn ủể cho mẫu tan ủều vào mụi trường, ủể ủụng tự nhiờn ở nhiệt ủộ phũng trờn mặt phẳng nằm ngang. Lật ngược cỏc ủĩa , nếu cần ủ ấm cỏc ủĩa này ở 370 C/4h sau ủú chuyển sang ủ ấm ở 44°C/18- 24h.

Tính kết quả

Chọn cỏc ủĩa cú chứa ớt hơn 150 khuẩn lạc ủiển hỡnh của E.coli dương tớnh β- glucuronidaza và ớt hơn 300 khuẩn lạc tổng số trờn mỗi ủĩa thạch

Số lượng khuẩn lạc E. coli trong 1 g mẫu thử ủược tớnh theo cụng thức:

d n n V N a

* ) 1 , 0 (

* 1+ 2

= ∑

Trong ủú:

N: Số khuẩn lạc E. coli trong 1g thịt (CFU/g )

∑a: là tổng số cỏc khuẩn lạc ủếm ủược trờn tất cả cỏc ủĩa ủược giữ lại sau 2 ủộ pha loóng liờn tiếp, cú ớt nhất 1 ủĩa chứa tối thiểu 15 CFU màu xanh.

n1: Số ủĩa ủược giữ lại ở ủộ pha loóng thứ nhất n2: Số ủĩa ủược giữ lại ở ủộ pha loóng thứ hai

V: Thể tớch mẫu cấy ủó dựng trờn mỗi ủĩa, tớnh bằng ml

d: Hệ số pha loóng tương ứng với ủộ pha loóng thứ nhất ủược giữ lại (d = 1 trong trường hợp cỏc mẫu ở dạng lỏng khi mẫu thử ủược cấy trực tiếp).

Nếu ủĩa chứa ớt hơn 10 khuẩn lạc, nhưng cú ớt nhất 4 khuẩn lạc, thỡ tớnh kết quả theo trường hợp chung ở trên và báo cáo kết quả là số ước tính x vi sinh vật trong 1ml hoặc 1g sản phẩm.

Nếu tổng số khuẩn lạc từ 3 ủến 1, thỡ ủộ chụm của kết quả là quỏ thấp và kết quả phải ủược ghi như sau: “ Cú mặt vi sinh vật nhưng nhỏ hơn (4 x d) trờn 1g hoặc 1ml.

Trong trường hợp ở nồng ủộ ủầu tiờn khụng cú khuẩn lạc ủặc trưng nào mọc lờn thỡ tổng số E. coli ủược biểu thị kết quả như sau: “ớt hơn 1/d vi sinh vật trong

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 69

1ml (sản phẩm dạng lỏng)” hoặc “ ít hơn 1/d vi sinh vật trong gam (sản phẩm dạng khác).

Trong ủú:

d : hệ số pha loóng mẫu của huyền phự ban ủầu hoặc ủộ pha loóng thứ nhất ủó cấy hoặc giữ lại.

1.3. ðịnh tớnh vi khuẩn Salmonella trong thịt lợn sữa ủụng lạnh xuất khẩu theo TCVN 4829:2005

Nguyên lý

Quỏ trỡnh phỏt hiện Salmonella trong thực phẩm cần qua 4 giai ủoạn kế tiếp nhau: (1) Tăng sinh sơ bộ mẫu ủó ủược ủồng nhất ủể ủảm bảo phỏt hiện một lượng nhỏ hoặc Salmonella ủó bị suy giảm hoạt tớnh → (2) Tăng sinh chọn lọc ở mụi trường lỏng → (3) Phân lập nhằm tách và nhận dạng Salmonella khỏi các quần thể vi sinh vật khỏc trong mẫu → (4) khẳng ủịnh ủặc tớnh sinh húa, huyết thanh học .

Một số mụi trường ủặc ủổ ủĩa sử dụng ủể phõn lập Salmonella như: thạch XLD, BGA, ... Mỗi môi trường giúp nhận dạng các loài thuộc giống này dựa trên cỏc ủặc tớnh sinh hoỏ ủặc trưng tương ứng.

Cách tiến hành Tăng sinh sơ bộ:

Ủ huyễn dịch mẫu ủó ủồng nhất ở ủộ pha loóng 10-1 trong tủ ấm 37°C/18±2h.

(2) Tăng sinh chọn lọc:tiến hành trên 2 môi trường RSV và MKTTn (Mulerr kauffman) .

Chuyển 0,1ml dung dịch tiền tăng sinh vào ống nghiệm chứa 10 ml môi trường RSV, ủ ở 41,5°C/24h.

Chuyển 1ml dung dịch tiền tăng sinh vào ống chứa 10ml môi trường MKTTn, ủ 37°C/24h.

Phõn lập trờn mụi trường ủặc chọn lọc và nhận dạng:

Sau khi ủ, sử dụng dịch tăng sinh chọn lọc trờn ria cấy lờn bề mặt thạch ủĩa XLD và BGA (HE).

Lật ỳp cỏc ủĩa ủặt trong tủ ấm 37°C/24h.

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 70

Khẳng ủịnh:

Nếu trên môi trường XLD hình thành khuẩn lạc màu hồng, trung tâm khuẩn lạc màu ủen thỡ nghi là Salmonella.

Nếu trờn mụi trường BGA hỡnh thành khuẩn lạc màu ủỏ hồng ủục ủược bao quanh bởi một vựng màu ủỏ sỏng thỡ nghi là Salmonella.

đánh dấu các khuẩn lạc Salmonella nghi trên mỗi ựĩa. Ria cấy khuẩn lạc ựiển hỡnh trờn lờn bề mặt ủĩa thạch mỏu. Ủ ấm ở 37°C/24h ủể thu ủược khuẩn lạc thuần nhất. Cỏc khuẩn lạc thuần này ủược dựng ủể ủể khẳng ủịnh cỏc tớnh chất sinh vật hoỏ học trờn hệ thống ủịnh danh API 20 E và làm phản ứng huyết thanh học.

Nếu kết quả ủịnh danh kết luận là Salmonella thỡ ta tiến hành làm phản ứng huyết thanh học với khỏng huyết thanh ủa giỏ O và khỏng huyết thanh ủa giỏ H (Phản ứng ngưng kết trên phiến kính). Trước khi làm phăn ứng HTH cần kiểm tra khả năng tự ngưng kết của vi khuẩn. Nếu phản ứng tự ngưng kết âm tính ta tiếp tục tiến hành phản ứng ngưng kết với KHT O, H, Vi. Nếu phản ứng huyết thanh học dương tính (có hiện tượng ngưng kết) thì kết luận có sự hiện diện của vi khuẩn Salmonella trong mẫu thử.

Phương phỏp ủịnh danh vi khuẩn bằng hệ thống API 20 E - ðịnh danh trực khuẩn ủường ruột và cỏc trực khuẩn Gram (–) khỏc

Nguyên lý

API 20 E là một hệ thống chuẩn ủể ủịnh danh những trực khuẩn ủường ruột và các trực khuẩn Gram (-) khác, sử dụng thanh bao gồm 21 test tiểu sinh hóa và một cơ sở dữ liệu. Danh sách hoàn chỉnh của những tổ chức vi khuẩn trên có thể xỏc ủịnh bằng hệ thống này ủược ủưa ra trong Bảng ủịnh danh ở cuối của bản hướng dẫn sử dụng.

Thanh API 20 E gồm cú 20 giếng nhỏ chứa cỏc mụi trường ủụng khụ. Cỏc test ủược gõy chủng bằng huyền dịch vi khuẩn. Trong khi ủ, quỏ trỡnh trao ủổi chất làm thay ủổi màu theo hướng tự phỏt hoặc là biểu hiện ra khi thờm cỏc thuốc thử. Phản ứng ủược ủọc dựa vào bảng cú sẵn và kết quả ủịnh danh dựa vào Bản liệt kờ phõn tớch sơ lược hoặc sử dụng phần mềm ủịnh danh.

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 71

Cách tiến hành Test Oxidase

Test Oxidase phải ủược tiến hành theo chỉ dẫn sử dụng của nhà sản xuất ủưa ra. Kết quả nờn ủược ghi chộp lại trờn hồ sơ lưu vỡ nú là một phần quan trọng của bản túm lược cuối cựng (test ủịnh danh thứ 21).

Chuẩn bị thanh

Chuẩn bị một hộp ủ, khay và nắp, cho khoảng 5ml nước ủó chưng cất hoặc nước khử khoáng (hoặc bất kỳ loại nước nào không có chất phụ gia hoặc hoá chất tạo khớ (vớ dụ như Cl2, CO2, vv...) vào ủỏy của khay ủể tạo ra ủộ ẩm.

Ghi mã số bệnh phẩm trên vành có hình thon dài của khay. (ðừng ghi số trên nắp vì có thể sẽ bị xoá mất trong suốt quá trình tiến hành thí nghiệm).

Lấy thanh ra khỏi bao gói riêng của nó.

ðặt thanh vào tủ ấm.

Chuẩn bị chủng

Mở một ống API NaCl 0.85% Medium(5ml) hoặc ống API suspension Medium (5ml) ủó ủược chỉ ra trong ủoạn “Chỳ ý và ðề phũng” của bản hướng dẫn sử dụng, hoặc sử dụng bất cứ ống nào chứa 5ml dung dịch muối sinh lý không có chất phụ gia.

Sử dụng một pipet hoặc PSIpet, lấy 1 khuẩn lạc thuần từ một ủĩa thạch. Nờn chọn mụi trường mới ủể sử dụng (18 - 24 giờ).

Nhũ húa cẩn thận ủể ủạt ủược hỗn dịch vi khuẩn ủồng nhất. Hỗn dịch này phải ủược sử dụng ngay lập tức sau khi pha chế.

Cho hỗn dịch vào giếng

Với giếng cựng 1 loại pipet giống nhau, ủưa hỗn dịch vi khuẩn vào trong cỏc giếng của thanh (trỏnh sủi bọt khớ ở thành giếng, nghiờng nhẹ thanh và ủặt mỏm của pipet hoặc PSIpet ngược lại với phía hình chén.

+ Với cỏc test |CIT|, |VP| và |GEL| hỗn dịch ủược ủưa vào ủầy cả phần hỡnh giếng lẫn hình chén

+ Với cỏc test khỏc, hỗn dịch chỉ ủưa vào phần hỡnh giếng (khụng ủưa vào phần hình chén)

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 72

+ ðối với các test ADH, LDC, ODC, H2S và URE, tạo ra môi trường kỵ khí bằng cách phủ lên một lớp dầu khoáng

đóng hộp ủ

Cho vào hộp ủ và ủ ở 36°C ± 2°C trong 18 - 24 giờ.

Biện luận kết quả ðọc thanh API

Sau giai ủoạn ủ, ủọc kết quả dựa vào Bảng ủọc.

+ Nếu 3 hoặc nhiều hơn 3 test (test GLU + hoặc -) là dương tính, ghi tất cả cỏc phản ứng tự phỏt trờn bảng kết quả và sau ủú tỡm cỏc test cú yờu cầu cần thờm thuốc thử.

Test TDA: thờm một giọt thuốc thử TDA. Nếu hiện màu nõu hơi ủỏ chỉ ra rằng phản ứng Dương tớnh và ủược ghi lại trờn bảng kết quả.

Test IND: Thêm một giọt thuốc thử JAMES. Nếu có màu hồng lan ra toà n bộ giếng hình chén thì là phản ứng Dương tính và ghi lại kết quả trên bảng kết quả.

Test VP: thêm mỗi loại thuốc thử VP 1 và VP 2 một giọt. ðợi ít nhất 10 phỳt.Nếu hiện màu ủỏ hoặc màu hồng cho ta phản ứng Dương tớnh và ghi lại kết quả trờn bảng kết quả.Nếu hiện ra màu phớt hồng sau 10 phỳt, phản ứng ủược xem

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 73

là Âm tính.

* Chỳ ý: Test sản xuất indol ủược tiến hành sau cựng vỡ phản ứng này xảy ra sẽ giải phóng các sản phẩm khí cản trở việc dịch kết quả các test khác trên thanh.

Nắp ủ nhựa nờn ủược thay thế sau khi thờm thuốc thử.

+Nếu số lượng test dương tính (gồm cả test GLU) trước khi thêm thuốc thử ít hơn 3:

- Ủ lại thanh hơn 24 giờ (± 2 giờ) không thêm bất kỳ một thuốc thử nào.

- Tỡm ra những test cần thờm thuốc thử (xem ủoạn trước).

- Hoàn thành việc ủịnh danh, nờn tiến hành cỏc test bổ sung (tham khảo ủoạn ðịnh danh).

Giải thích kết quả

Việc ủịnh danh ủược thực hiện bằng việc mụ tả túm lược bằng số.

+Sự xỏc ủịnh túm tắt bằng số:

Trờn bảng kết quả, cỏc test ủược chia làm 3 nhúm với cỏc giỏ trị là 1,2 hoặc 4 ủược ủưa ra cho mỗi kết quả tương ứng. Bằng việc cộng cỏc giỏ trị tương ứng với các kết quả của phản ứng dương tính trong mỗi nhóm, ta có 1 dãy số gồm 7 số cho 20 test trên thanh API 20 E. Phản ứng Oxidase ở test thứ 21 và có giá trị là 4 nếu Dương tính.

+ Xỏc ủịnh: Việc này cần sử dụng cỏc dữ liệu cơ sở * Bảng liệt kê phân tích tóm lược:

- Tra cứu theo số ở danh sách tóm tắt.

* Phần mềm ủịnh danh APIwebTM:

ðiền 7 số tỡm ủược bằng bàn phớm lờn màn vi tớnh.

Trong một số trường hợp, dóy số gồm 7 số khụng ủủ khẳng ủịnh một cỏch rừ ràng và cỏc test bổ sung dưới ủõy cần ủược thực hiện:

Chỳ ý: Vỡ cỏc lý do tương tự với phản ứng indol (xem chỳ ý trong ủoạn

“ðọc thanh”), test khử Nitrat phải ủược tiến hành sau cựng.

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 74

1.4. Xỏc ủịnh Staphylococcus aureus trong thịt lợn sữa ủụng lạnh theo TCVN 4830 –1 /2005

Nguyên lý

Vi khuẩn Staphylococci phát triển tốt trên môi trường Baird–Parker tạo khuẩn lạc màu ủen, trũn, lồi, bờ ủều, búng và cú vũng trong suốt ở xung quanh do sự chuyển húa của muối telorite de potassium và sự dung giải protein lũng ủỏ trứng.

Qua ủú cú thể ủếm số lượng vi khuẩn dựa trờn số khuẩn lạc mọc trờn mụi trường nuôi cấy.

Việc khẳng ủịnh vi khuẩn Staphylococci (Staphylococcus aureus và cỏc loài khỏc) dựa trờn phản ứng ủụng huyết tương thỏ (Coagulase).

Cách tiến hành

Phân lập (cấy láng trên bề mặt thạch)

Sử dụng 6 ủĩa mụi trường Baird-Parker ủể nuụi cấy ở 3 ủậm ủộ pha loóng 10-

1; 10-2;10-3, mỗi ủộ pha loóng nuụi cấy trờn 2 ủĩa mụi trường.

Hỳt 0.1ml dung dịch mẫu ở mỗi ủộ pha loóng khỏc nhau lờn bề mặt của cỏc ủĩa thạch. Sử dụng dụng cụ dàn mẫu dàn chất cấy trờn bề mặt cỏc ủĩa thạch, ủể khụ trong 15 phỳt ở nhiệt ủộ phũng.

Lật ngược cỏc ủĩa và ủ ở 37°C/24h, ủếm số lượng khuẩn lạc ủiển hỡnh trờn mỗi ủĩa thạch, ủỏnh dấu vị trớ cỏc khuẩn lạc ủiển hỡnh.

Ủ tiếp ở 37°C/24h, sau ủ ủỏnh dấu vị trớ cỏc khuẩn lạc ủiển hỡnh mới và cỏc khuẩn lạc khụng ủiển hỡnh.

Phép thử catalase

Dựng que cấy lấy 1-2 khuẩn lạc nghi ngờ ủó ủỏnh dấu di lờn phiến kớnh sạch ủó nhỏ dung dịch H2O2 3% lờn trờn. Nếu cú hiện tượng sủi bọt là phản ứng dương tính, không có hiện tượng sủi bọt phản ứng âm tính. Nếu phản ứng catalase dương tính thì làm phép thử coagulase.

Nếu phản ứng catalase õm tớnh thỡ theo dừi dạng dung huyết bờta (ò- hemolysis).

Phép thử coagulase

Chọn cỏc ủĩa cú số khuẩn lạc từ 15 ủến 300 khuẩn lạc. Từ mỗi ủĩa chọn 5

Học viện Nông nghiệp Việt Nam – Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 75

khuẩn lạc ủiển hỡnh hoặc 5 khuẩn lạc khụng ủiển hỡnh (nếu chỉ cú một loại khuẩn lạc) hoặc 5 khuẩn lạc ủiển hỡnh và 5 khuẩn lạc khụng ủiển hỡnh (nếu chứa cả 2 loại khuẩn lạc).

Từ mỗi khuẩn lạc ủó chọn dựng que cấy vụ trựng lấy 1 phần chuyển vào mụi trường canh thang nóo-tim (BHI), ủem ủ ở 37°C/24h.

Sau ủ lấy 0,1ml mỗi dịch cấy vô trùng cho vào 0,3ml huyết tương thỏ, ủ ở 37°C, sau 4-6h kiểm tra sự ủụng huyết tương. Nếu phản ứng õm tớnh, kiểm tra lại sau ủ 24h. Phản ứng dương tính khi thể tích kết dính chiếm hơn một nửa thể tích ban ủầu của chất lỏng.

Lấy khuẩn lạc ủiển hỡnh cú phản ứng catalase (+), coagulase (+) cấy trờn mụi trường thạch mỏu ủể thu ủược khuẩn lạc thuần nhất.

Tính kết quả:

Tính số lượng vi khuẩn S. aureus/gam sản phẩm như sau:

- ðối với cỏc ủĩa cú chứa tối ủa 300 khuẩn lạc, cú 150 khuẩn lạc ủiển hỡnh và/hoặc khụng ủiển hỡnh, trờn mỗi ủĩa thạch ủó chọn ở 2 ủộ pha loóng liờn tiếp thỡ số lượng vi khuẩn S. aureus ủược tớnh theo cụng thức:

bc * cc bnc * cnc a = +

Ac Anc Trong ủú:

a : Số lượng vi khuẩn S. aureus ở 2 nồng ủộ pha loóng liờn tiếp ủược chọn.

Ac :là số lượng khuẩn lạc ủiển hỡnh ủó qua phộp thử coagulase.

Anc: là số lượng khuẩn lạc khụng ủiển hỡnh ủó qua phộp thử coagulase.

bc : là số lượng khuẩn lạc ủiển hỡnh cho thấy cú phản ứng dương tớnh với coagulase.

bnc : là số khuẩn lạc khụng ủiển hỡnh cho thấy cú phản ứng dương tớnh với coagulase.

cc : là tổng số khuẩn lạc ủiển hỡnh nhỡn thấy trờn ủĩa.

cnc : là tổng số khuẩn lạc khụng ủiển hỡnh nhỡn thấy trờn ủĩa.

Số lượng vi khuẩn Staphylococcus aureus/1g sản phẩm ủược tớnh theo cụng

Một phần của tài liệu Đánh giá mức độ ô nhiễm vi sinh vật trên thịt lợn sữa đông lạnh xuất khẩu tại một số cơ sở giết mổ thuộc khu vực thành phố Hải Dương (Trang 76 - 90)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(92 trang)