Chương 2 đỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.2. Nội dung 2: Nghiên cứu khả năng sinh trưởng, phát triển và sự biến dị của các dòng Dừa cạn sau xử lý EMS in vitro
các dòng Dừa cạn sau xử lý EMS in vitro
* Thắ nghiệm 7: Nghiên cứu khả năng sinh trưởng phát triển và sự biến dị của các dòng Dừa cạn sau xử lý EMS in vitro
- Thắ nghiệm 7a: Nghiên cứu khả năng sinh trưởng phát triển và sự biến dị của ựoạn thân mang mắt ngủ Dừa cạn xử lý trong môi trường EMS với nồng ựộ và thời gian khác nhau
+ Vật liệu : đoạn thân mang mắt ngủ + Công thức trong thắ nghiệm:
Nồng ựộ EMS Thời gian 0% 0,05% 0,1% 0,15% 0,2% 1h CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 2h CT6 CT7 CT8 CT9 C10 3h CT11 CT12 CT13 CT14 CT15
Thắ nghiệm 7b: Nghiên cứu khả năng sinh trưởng phát triển và sự biến dị của ựoạn thân mang mắt ngủ Dừa cạn ựược nuôi cấy 4 tuần trong môi trường nhân nhanh tốt nhất ựược bổ sung nồng ựộ thấp EMS.
+ Vật liệu : đoạn thân mang mắt ngủ + Công thức trong thắ nghiệm:
CT1: MT1
CT2: MT1 + 0,005% EMS CT3: MT1 + 0,01% EMS CT4: MT1 + 0,015% EMS CT5: MT1 + 0,02% EMS
( MT1: Là môi trường ựoạn thân mang mắt ngủ sinh trưởng phát triển tốt nhất tìm ra ựược sau khi tiến hành thắ nghiệm 4)
Thắ nghiệm 7c: Nghiên cứu khả năng phát sinh hình thái và sự biến dị của ựoạn thân không mang mắt ngủ Dừa cạn ựược nuôi cấy 6 tuần trong môi trường
phát sinh hình thái tốt nhất có bổ sung nồng ựộ thấp EMS.
+ Vật liệu : đoạn thân không mang mắt ngủ của cây Dừa cạn + Công thức trong thắ nghiệm:
CT1: MT2
CT2: MT2 + 0.005% EMS CT3: MT2 + 0.01% EMS CT4: MT2 + 0.015% EMS CT5: MT2 + 0.02% EMS
( MT2: Là môi trường phát sinh hình thái tốt nhất tìm ra ựược sau khi tiến hành thắ nghiệm 3)
*Thắ nghiệm 8: Phân tắch hàm lượng alkaloid tổng số của cây Dừa cạn ựã xử lý EMS và cây Dừa cạn không xử lý EMS
+ Vật liệu: Cây Dừa cạn in vitro hoàn chỉnh (cả rễ, thân và lá) ựược xử lý và không ựược xử lý EMS, cây Dừa cạn gieo từ hạt in vivo
+ Công thức thắ nghiệm:
CT1: Hạt Dừa cạn gieo in vivo trong 6 tuần
CT2: Chồi Dừa cạn in vitro nuôi trong môi trường tạo rễ (MS+ 1,5mg/l IBA) trong 6 tuần.
CT3: Chồi Dừa cạn phát sinh từ ựoạn thân ựượcxử lý in vitro EMS nồng ựộ 0,05%-1h và nuôi trong môi trường tạo rễ (MS+ 1,5mg/l IBA) trong 6 tuần.
CT4: Chồi Dừa cạn phát sinh từ ựoạn thân ựượcxử lý in vitro EMS nồng ựộ 0,1%-1h và nuôi trong môi trường tạo rễ (MS+ 1,5mg/l IBA) trong 6 tuần.
CT5: Chồi Dừa cạn phát sinh từ ựoạn thân ựượcxử lý in vitro EMS nồng ựộ 0,15%-1h và nuôi trong môi trường tạo rễ (MS+ 1,5mg/l IBA) trong 6 tuần.
CT6: Chồi Dừa cạn phát sinh từ ựoạn thân ựượcxử lý in vitro EMS nồng ựộ 0,2%-1h và nuôi trong môi trường tạo rễ (MS+ 1,5mg/l IBA) trong 6 tuần.