CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.8. TÍNH TOÁN SƠ BỘ CHI PHÍ GIÁ THÀNH SẢN PHẨM TRONG PHÒNG THÍ NGHIỆM
Trong sản xuất kinh doanh, bên cạnh chất lượng sản phẩm thì các nhà kinh tế luôn quan tâm đến giá thành sản phẩm. Vì vậy, việc tính toán sơ bộ chi phí sản xuất cho một sản phẩm là rất quan trọng nhằm quyết định sản phẩm đó có được đưa ra thị trường hay không. Một sản phẩm trước khi được đem ra thị trường phải trải qua nhiều công đoạn khác nhau và chi phí cho mỗi công đoạn đó cũng khác nhau. Trong quá trình thực hiện, với quy mô thí nghiệm nên chỉ tiến hành tính toán sơ bộ chi phí nguyên liệu cho 1 chai (500ml) thành phẩm dựa trên giá nguyên liệu hiện nay trên thị trường với hiệu suất thu hồi là 80%.
Sơ bộ tính toán giá thành cho 500ml sản phẩm rượu vang ở bảng 3.9.
Bảng 3.9. Hoạch toán chi phí thành phẩm
Chi phí Số lượng Đơn giá Thành
tiền (đồng)
Ghi chú
Quả dừa 2 quả 15.000/quả 30.000 3.000
Đường saccharose 200g 15.000/kg 3.000
Nấm men 1 ống 250.000 10.000 5.000
Acid citric 1g 500
NaHSO3 50mg 500
Chai thủy tinh 500ml 1 chai 4.000/chai 4.000 Chi phí khác (điện, nước, nhân
công, khấu khao tài sản…)
1000
Tổng cộng 49.000 17.000
* Giá thành lấy theo giá trên thị trường, mua theo số lượng ít.
Từ bảng 3.10 cho thấy, để sản xuất 1 chai rượu vang thành phẩm (500ml) ở phòng thí nghiệm chi phí sơ bộ là 49.000 đồng. Tuy nhiên, nếu đưa vào sản xuất lớn giá thành mua nguyên vật liệu sẽ rẻ (mua sỉ, mua vào chính vụ và chỉ mua nước dừa) thì giá thành cho 1 chai sản phẩm sẽ là 17.000 đồng.
Giá thành vang Đà Lạt trên thị trường thấp nhất là 30.000 đồng/chai 750ml, như vậy 1 lít vang Đà Lạt trên thị trường sẽ có giá là 40.000 đồng.
Như vậy, nếu sản xuất rượu vang trái cây từ nước dừa, thì giá thành hoàn toàn có thể cạnh tranh được. Khi đưa vào sản xuất với số lượng lớn thì chi phí sẽ còn giảm xuống. Thiết bị không cần đầu tư nhiều, chi phí cho công nghệ rẻ tiền, dễ làm. Vì vậy, việc sản xuất rượu vang trái cây từ nước dừa sẽ mở hướng phát triển mới cho người nông dân, đồng thời cũng làm đa dạng hóa sản phẩm cho người tiêu dùng.
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 1. KẾT LUẬN
Từ các kết quả nghiên cứu ở trên cho thấy Luận văn đã hoàn thành tất cả các nội dung nghiên cứu và mục tiêu đã đặt ra. Thể hiện qua các kết luận rút ra từ kết quả nghiên cứu như sau:
1. Đánh giá hàm lượng một số thành phần hóa học chủ yếu của nước dừa 12 tháng tuổi Cocos nucifera thu mẫu ở Huyện Sông cầu tỉnh Phú Yên cho thấy hàm lượng chất khô hòa tan 4,10 ± 0,000Bx; pH 5,43 ± 0,06; hàm lượng đường khử 0,34 ± 0,05%; hàm lượng đường tổng 2,13 ± 0,06%; hàm lượng protein 0,77 ± 0,03%; hàm lượng tro 0,41 ± 0,05%; hàm lượng lipit 0,15 ± 0,04%.
2. Các điều kiện tối ưu cho quá trình bảo quản nước dừa nguyên liệu theo phương pháp cảm quan: bảo quản ở nhiệt độ 100C, pH 5 và thời gian bảo quản có thể kéo dài đến 18 ngày.
3. Các điều kiện xác định miền nghiên cứu của các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình lên men rượu vang trái cây từ nước dừa: nhiệt độ lên men là 280C ÷ 320C, tỷ lệ nấm men là 5 ÷ 7%, giá trị pH lên men 4,3 ÷ 4,7 với thời gian 5 ngày lên men chính và 5 ngày lên men phụ.
4. Các điều kiện tối ưu cho quá trình lên men rượu vang trái cây từ nước dừa với: Hàm lượng chất khô 22%, thời gian lên men 10 ngày, tỉ lệ nấm men 6,5% so với dịch lên men, pH dịch lên men 4,6, nhiệt độ lên men 310C thu được rượu vang trái cây có độ cồn 9,67%.
5. Luận văn đã xây dựng qui trình sản xuất sản phẩm rượu vang trái cây từ nước dừa Cocos nucifera Phú Yên và sản phẩm rượu vang trái cây từ nước dừa sản xuất theo quy trình đạt tiêu chuẩn an toàn thực phẩm về hóa học và vi sinh vật, với chi phí nguyên vật liệu là 49.000 đồng /500ml sản phẩm.
2. ĐỀ XUẤT KIẾN NGHỊ
Từ các nghiên cứu ở trên cho phép đề xuất một số kiến nghị như sau:
1. Cần tiếp tục nghiên cứu khảo sát lên men trên một số chủng loại nấm men khác nhau hoặc có thể phối trộn các loại nấm men với nhau để tạo nên mùi, vị của sản phẩm tốt hơn và rượu vang đạt được nồng độ cồn cao hơn, sản phẩm được hoàn thiện hơn.
2. Cần khảo sát thêm về khả năng phối trộn giữa các loại nguyên liệu khác nhau, cũng như việc sử dụng các chủng nấm men phân lập từ nước dừa để tạo dòng sản phẩm mới.
3. Cần tiếp tục nghiên cứu quá trình lên men phụ.
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt:
1. Bùi Ái (2009), “Công nghệ lên men ứng dụng trong công nghệ thực phẩm”, Nhà xuất bản ĐHQG TP Hồ Chí Minh.
2. Trần Đức Ba, Đỗ Thanh Thủy, Nguyễn Minh Khoa, Nguyễn Minh Hùng, Trần Đình Thanh Trúc, Lê Thị Thùy Trang, Hồ Kang Trung Trinh (2000), “Lạnh đông rau quả xuất khẩu”, Nhà xuất bản Nông nghiệp TP Hồ Chí Minh.
3. Từ Hà Duyên Từ (2006), “Kỹ thuật phân tích cảm quan thực phẩm”, NXB Khoa Học và Kỹ Thuật.
4. Võ Văn Chi (1999), “Từ điển cây thuốc Việt Nam”, Nhà xuất bản Y học.
5. Đống Thị Anh Đào, Võ Thị Thanh Hà, Trương Thị Mỹ Linh (2007), “Nghiên cứu sản xuất nước dừa đóng hộp”, Tạp chí phát triển KH&CN, tập 10. 2.
6. Nguyễn Thế Dũng (2006), “Khảo sát công nghệ lên men từ một số dịch trái cây vùng nhiệt đới, Luận văn thạc sĩ”, Trường Đại học sư phạm Tp. Hồ Chí Minh.
7. Nguyễn Thanh Hằng, Nguyễn Đình Thưởng (2000), “công nghệ sản xuất và kiểm tra cồn etylic”, NXB Khoa Học và Kỹ Thuật.
8. Lê Văn Nhất Hoài (2004), “Nghiên cứu sản xuất rượu vang từ Dâu tằm,”
Luận văn thạc sĩ. Trường Đại học Bách khoa Tp.Hồ Chí Minh.
9. Huỳnh Ngọc Châu (2004), “Nghiên cứu sản xuất rượu vang từ chuối hộ. Luận văn thạc sĩ”, Trường Đại học Bách khoa Tp.Hồ Chí Minh.
10. Đỗ Vĩnh Long (2004), “Nghiên cứu sản xuất rượu vang từ mít”, Luận văn thạc sĩ. Trường Đại học Bách khoa Tp.Hồ Chí Minh.
11. Nguyễn Đức Lượng, Phan Thị Huyền, Nguyễn Ánh Tuyết (2003), “Thí nghiệm công nghệ sinh học tập 2, Thí nghiệm vi sinh vật học”, Nxb Đại học quốc gia Tp.HCM.
12. Phạm Trần Tố Như (2008), “Nghiên cứu sản xuất rượu vang từ bưởi”, Luận văn thạc sĩ. Trường Đại học Bách khoa Tp.Hồ Chí Minh.
13. Lương Đức Phẩm (2006), “Nấm men công nghiệp”, NXB KHKT Hà Nội.
14. Lê Xuân Phương (2001), “Vi sinh vật công nghiệp”, Nxb Xây dựng.
15. Nguyễn Văn Sĩ (2006), “Nghiên cứu sản xuất sản phẩm rượu vang dừa”, Luận văn Thạc sĩ. Trường ĐH Bách khoa Tp.Hồ Chí Minh.
16. Trần Yên Thảo (2006), “Kỹ thuật bảo quản trái dừa tươi”, Viện nghiên cứu dầu và cây có dầu.
17. Nguyễn Minh Thủy, Nguyễn Thị Mỹ Tuyền, Nguyễn Phú Cường, Dương Kim Thanh, Lê Văn Boi, Lê Thanh Trường, Huỳnh Thị Chính, Phan Thanh Nhàn (2011), “Nghiên cứu ảnh hưởng của mật số nấm men, chất khô hòa tan và pH của dịch lên men đến chất lượng rượu vang thốt nốt”, Tạp chí khoa học 2011:19b , ĐH Cần Thơ(209-218).
Tiếng Anh:
18. Dimitri P. Bertsekas (2009), Convex Optimization Theory, Hardcover.
19. Eriksson D., Johansson E., Kettaneh-Wold N., Wikstrom C., Wold S. (2008), Design of Experiments - Principles and Applications, 91-973730-0-1, UMETRICS AB, ISBN.
20. Alexia, Prades, Manuel Dornier, Nafissatou Diop, Jean-Pierre Pain (2012),
“Coconut water uses, composition and properties: A Review”, Fruits. 67, pp. 87-107.
21. Attri B. L. (2009), “Effect of initial sugar concentration on phisyco-chemical characteristics and sensory quality of cashew apple wine”, Natural product radiance.
8(4), pp. 374-379.
22. Campos C.F., Souza P.E.A., Coelho J.V., Gloria M.B.A (1996), “Chemical composition, enzyme activity and effect of enzyme inactivation on flavor quality of green coconut water”, Philipp. J. Coconut Stud. 20, pp. 487–500.
23. Chen T, Li F, Chen BS (2009), “Cross-talks of sensory transcription networks in response to various environmental stresses”, Interdiscip Sci. 1(1), pp. 46–54.
24. Chowdhury M. G. F., Rahman M. M., Tariqul Islam A. F. M., Islam M. S (2009), “Processing and Preservation of Green Coconut Water”, J. innov.dev.strategy 2(3), pp. 01-05.
25. Da Fonseca A.M., Bizerra A.M.C., Da Souza J.S.N., Monte F.J.Q., De Oliveira M. de C.F., De Mattos M.C., Cordell G.A., Braz-Filho R., Lemos T.L.G (2009), “Constituents and antioxidant activity of two varieties of coconut water (Cocos nucifera L.)”, Rev. Bras. Farmacogn. 19, pp. 193–198.
26. Damar S, balaban MO, Sims CA (2009), “Continuous dense-phase CO2 processing of a coconut water beverage”, Int J Food Sci Technol. 44, pp. 666-673.
27. Del Rosario J.E., Bergonia H.A., Flavier M.E., Samonte J.L., Mendoza E.M.T (1984), “Chromatographicanalysis of carbohydrates in coconutwater”, Trans.
the Natl. Acad. Sci.Technol. 6, pp. 127–151.
28. Douglas M. Munnecke (1981), “Basic Principles of Ethanol Fermentation”, Biomass Conversion Processes for Energy and Fuels, New York.
29. Dupaigne P (1971), “Un jus de fruit peu ordinaire : l’eau de coco”, Fruits 26, pp. 625–627.
30. Fleet (1992), “G. Spoilage yeasts”, Crit. Rev. Biotechnol. 12, pp. 1-44.
31. Gabriel SE (2009), “Epidemiological studies in incidence, prevalence, mortality, and comorbidity of the rheumatic diseases”, Arthritis Res Ther. 11(3), p. 229.
32. Heard and Fleet (1993), “Yeasts growth during fermentation, Wine Microbiology and Biotechnology”, Harwood Academic, Chur, Switzerland, pp. 27-54.
33. Henry P (1957), “Recherches sur la croissance et ledéveloppement chez Elaeis guineensis Jacq.et chez Cocos nucifera L., Comparaisonsavec quelques autres palmiers”, Univ. Paris, Fac. Sci., Thèse, Orsay, France, p. 154.
34. Hunkova Z. (1977), “Toxic effects of fatty acids on yeast cells – dependence of inhibitory effects on fatty acid concentration”, Biotechnol Bioeng. 19, pp. 1623–1641.
35. Idise, Okiemute Emmanuel, “Studies on wine production from coconut (Cocos nucifera)”, Journal of Brewing and Distilling. 2(5), pp. 69-74.
36. Jackson (2004), “Changes in chemical composition of coconut (Cocos nucifera) water during maturation of the fruit”, J Sci Food Agric. 84, pp. 1049-1052.
37. Jean W. H. Yong, Liya Ge, Yan Fei Ng, Swee Ngin Tan (2009), “The Chemical Composition and Biological Properties of Coconut (Cocos nucifera L.) Water”, Molecules. 14, pp. 5144-5164.
38. Kurtzman. C.P, Fell. J.W (Eds.) (1998), “The Yeasts, A taxonomic study (4th ed)”, Elsevier Press, Amsterdam, p. 1055.
39. Lafon-Lafourcade. S, P. Riberau-Gayon (1984), “Inhibition of grape must by fatty acids produced by yeasts and their elimination by yeast ghosts”, Appl. Environ.
Microbiol. 47(6), pp. 1246-1249.
40. Lapitan O.B., Mabesa R.C (1983), “Chemical andsensory characteristics of Laguna and Goldencoconuts (Cocos nucifera L.)”, Philipp.Agric. 66, pp. 144–150.
41. Matsui K.N., Gut J.A.W., Oliveira P.V., Tadini C.C, (2008) (2008),
“Inactivation kinetics of polyphenol oxidase and peroxidase in green coconut water by microwave processing”, Journal of Food Engineering 88, pp. 169-176.
42. Moll. M (1992), “Bière et coolers”, Tec & Doc Lavoisier. Paris.
43. Murasaki-Aliberti N.D., Da Silva R.M.S., Gut J.A.W., Tadini C.C (2009),
“Thermal inactivation of polyphenoloxidase and peroxidase in green coconut (Cocos nucifera) water”, Int. J. Food Sci. Technol. 44, pp. 2662–2668.
44. Ogundiya M.O (1991), “Glucose content of nutwater in four varieties of coconut palm(Cocos nucifera)”, J. Sci. Food Agric. 56, pp. 399-402.
45. Pue A.G., Rivu W., Sundarrao C., Singh K. (1992), “Preliminary studies on changes in coconut water during maturation of the fruit”, Sci. NewGuin. 18, pp. 81–84.
46. Richter E.M., Jesus D.P. de, Muủoz R.A.A., Lago C.L.d., Angnes L. (2005), J. Braz. Chem. Soc. 16, pp. 1134–1139.
47. Ritika Joshi, Vinay Sharma, Arindam Kuila (2018), “Fermentation Technology: Current Status and Future Prospects”, Scrivener Publishing LLC.
48. Santoso U., Kubo K., Ota T., Tadokoro T., Maekawa A. (1996), “Nutrient composition of kopyor coconuts (Cocos nucifera L.)”, Food Chemistry. 57, pp. 299–304.
49. Satyabala K (2003), “Coconut In: Oil crops of the world. Robbela G”, Downey, R.K. and Asbri, A. (eds.) McGraw HILL Inc, pp. 494-504.
50. Sierra Z.N., Velasco J.R (1976), “Studies on thegrowth factor of coconut water – Isolation ofthe growth promoting activity”, Philipp. J.Coconut Stud. 1, pp. 11–18.
51. Sunil S. Joshi, Vishu J. Gaikwad, Sandip S. Patil, Ashiya Y Makandar (2013), “Comparative study of production of wine from milk and water of Cocos nucifera L.”, International Journal of Advanced Biotechnology and Research ISSN 0976-2612. 4(2), pp. 274-279.
52. Thampan P.K., Rethinam P. (2004), “Coconut products for health and medicine”, Indian Coconut J. 35, pp. 6–15.
53. Tulecke. W., Weinstein. L., Rutner. A., Laurencot. H. (1961), “The biochemical composition of coconut water (coconut milk) as related to its use in plant tissue culture”, Contrib. Boyce Thompson Inst. 21, pp. 115–128.
54. Unagul P., Assantachai C., Phadungruengluij S., Suphantharika M., Tanticharoen M., Verduyn C. (2007), “Coconut water as a medium additive for the production of docosahexaenoic acid (C22:6 n3) by Schizochytrium mangrovei Sk-02”, Bioresour. Technol. 98, pp. 281–287.
55. Uphade B.K., Shelke S.S., Thorat D.G. (2008), “Studies on some physico- chemical characteristics of coconut water near sugar and chemical factory”, Int. J.
Chem. Sci. 6, pp. 2052–2054.
56. Viegas, MF Rosa, I Sá-Correia, JM Novais (1989), “ Inhibition of yeast growth by octanoic and decanoic acids produced during ethanolic fermentation”, Applied and environmental microbiology. 55(1), pp. 21-28.
57. Water, Jean W. H. Yong, Liya Ge, Yan Fei Ng, Swee Ngin Tan (2009), “The Chemical Composition and Biological Properties of Coconut (Cocos nucifera L.)”, Molecules. 14, pp. 5144-5164.
58. Wijeratnam RSW, Jeyachandran V, Karunanithy K, Hewajulige IGN, Perera MGDS (2006), “Extending storage life of king coconut, Cocos nucifera. var. auranta.
4th Int Conf Managing quality in chains-The integrated view on fruits and vegetables quality”, Purvis AC, McGlasson WB, Kanlayanarat S (eds). Acta Hort (ISHS) 712, Bangkok, Thailand, pp. 407–412.
59. Yong J.W.H., Liya G., Fei N.Y., Ngin T.S (2009), “The chemical composition and biological properties of coconut (Cocos nucifera L.) water”, Molecules. 14(5144–5164).
Trang web:
60. http://hiephoiduabentre.com.vn/index.php?Module=Content&Action
61.http://hiephoiduabentre.com.vn/index.php?Module=Content&Action=view&i d=7228&Itemid=2
62. http://www.academia.edu/7439349/CONG_NGHỆ_BẢO_QUẢN_DỪA 63. http://www.bentre.gov.vn
64. United States Department of Agriculture (USDA), (2008). National Nutrient Database for Standard Reference. Nuts, coconut water [Online]. Available:
http://www.nal.usda.gov/fnic/foodcomp/cgi-bin/list_nut_edit.pl/, accessed on 9 December 2009.
65. http://www.baohaugiang.com.vn.
PHỤ LỤC
Phụ lục 1: Một số phương pháp phân tích sử dụng trong đề tài p1. Xác định hàm lượng đường khử có trong nước dừa
Cho lần lượt 25 ml dung dịch Fehling A và 25 ml dung dịch Fehling B vào bình nón dung tích 250 ml, lắc đều. Thêm chính xác 25 ml dung dịch mẫu thử, lắc đều, đun sôi 3 phút trên bếp điện tính từ lúc bắt đầu sôi. Lấy ra để lắng kết tủa.
Khi kết tủa đồng oxit đã lắng xuống, thì lọc gạn phần nước trên kết tủa trong bình nón vào phễu lọc, sử dụng bình hút lọc chân không. Cho nước đun sôi vào bình nón và tiếp tục lọc gạn cho đến khi nước trong bình nón hết kiềm tính. Trong khi lọc luôn giữ một lớp nước trên mặt kết tủa để tránh đồng oxit tiếp xúc với không khí.
Cho vào bình nón khoảng 20 ml dung dịch sắt (III) sulfat để hòa tan kết tủa đồng oxit. Dùng đũa thủy tinh khuấy nhẹ cho tan hết kết tủa. Thay bình hút lọc trên bằng một bình hút lọc mới, chuyển dung dịch trong bình nón sang phễu, hút lọc và tráng bình nón và phễu vài lần bằng nước sôi. Tất cả đều hút lọc xuống bình. Lấy bình hút lọc ra rồi đem chuẩn độ ngay bằng dung dịch kali permangnat cho tới khi dung dịch chuyển màu.
Xác định với mẫu trắng tương tự với mẫu thử, thay dung dịch mẫu thử bằng nước cất.
Hàm lượng đường khử tính theo glucoza, biểu thị bằng phần trăm khối lượng:
X = (m1 x V1 x 100)/(m2 x V2 x 1000) Với: m1 là khối lượng đường quy đổi theo bảng (mg)
m2 là khối lượng mẫu(g)
V1 là thể tích dung dịch mẫu thử (ml)
V2 là thể tích dung dịch mẫu thử lấy để xác định (ml)
p2. Xác định hàm lượng lipid trong nước dừa (bằng phương pháp Adam – Rose – Gottlieb)
Cho vào bình lắng gạn:
10ml nước dừa
Dung dịch cồn – amoniac 10ml Ete thường 10ml
Lúc đầu lắc nhẹ, sau lắc mạnh dần và cuối cùng lắc thật mạnh. Để yên trong 30 phút, hỗn hợp trong bình sẽ chia làm 2 lớp:
- Lớp dưới là lớp amoniac hoà tan protein và các thành phần khác của nước dừa - Lớp trên là ete hoà tan chât béo và có lẫn một sô chất khác.
Tách lấy lớp ete, bỏ lớp dung dịch amoniac. Cho thêm vào lớp ete 10ml dung dịch ete dầu hỏa, lắc thật mạnh rồi để yên 15 phút, các chất không phải là chất béo sẽ tách và lắng xuống dưới bình lắng gạn. Tách bỏ lớp phía dưới. Chuyển hết phần ete vào chén thuỷ tinh đã sấy khô, cân sẵn theo nguyên tắc cân kép. Rửa bình lắng gạn 2 lần, mỗi lần 5ml ete và dồn hết cả vào chén thuỷ tinh. Để bốc hơi hết ete trong nhiệt độ thường, sau đó cho vào tủ sấy ở nhiệt độ 1050C trong thời gian 30 phút. Lấy ra để nguội trong bình hút ẩm và cân bằng cân phân tích.
Tính kết quả
Hàm lượng lipid (X) theo phần trăm trong thực phẩm được tính theo công thức:
X(%) =
G x P P 1) 100 (
Trong dó:
P: trọng lượng của cốc và béo sau khi sấy, g P1: trọng lượng của cốc không, g
G: trọng lượng của mẫu, g
p3. Xác định hàm lượng Tro (theo TCVN 4070-2009)
Cân chính xác khoảng 5g mẫu thử vào chén nung đã nung đến khối lượng không đổi. Cho dung dịch H2SO4 1N từ từ từng giọt một để có thể thấm ướt toàn bộ mẫu thử.
Cô khô ở nồi cách thủy, sau đó đặt lên nồi cách cát đun cho đến khi mẫu thử cháy toàn bộ thành than đen. Sau đó cho vào lò nung ở nhiệt độ 550-6000C cho đến khi thành tro trắng. Để nguội trong bình hút ẩm và cân trên cân phân tích có độ chính xác 10-4g.
Thực hiện thao tác đến khối lượng không đổi.
Tính kết quả
Hàm lượng tro tổng số trong nước dừa được tính bằng công thức:
X = 1 *0,9*100 P
G G
(%)
Trong đó:
G: Khối lượng của chén nung (g).
G1: Khối lượng của chén và tro sulfat (g).
P: Khối lượng mẫu thử (g).
X: Hàm lượng tro tổng số (%).
p4. Cách đếm tế bào nấm men
Dùng buồng đếm Thoma: có 16 ô vuông lớn, trong mỗi ô vuông lớn có 16 ô vuông nhỏ. Kích thước của các hình như sau:
+ Chiều sâu của các ô: 1/10mm + Mỗi ô vuông nhỏ có cạnh: 1/20mm + Diện tích một ô vuông nhỏ: 1/400mm2 Tiến hành
- Hút 1ml mẫu rồi pha loãng sao cho khi quan sát ở mỗi ô vuông nhỏ có từ 5 đến 10 tế bào vi sinh vật
- Dùng pipet lấy rất nhanh 1 giọt mẫu để nhỏ lên buồng đếm, tránh không để tràn ra ngoài, rồi đậy lên buồng đếm 1 lá kính mỏng và di chuyển nhẹ nhàng khung đếm để dịch huyền phù tràn đầy các khung.
- Đặt buồng đếm lên kính hiển vi, sử dụng vật kính x 10 để tìm buồng đếm, sau đó chuyển qua vật kính x 40 để đếm.
- Điều chỉnh cường độ ánh sáng bằng cửa sập để có thể quan sát rõ ràng cả tế bào lẫn các đường kẽ. Để đảm bảo độ chính xác của kết quả nên đếm 1 ô trung tâm và 4 ô nằm ngoài bìa.
- Bắt đầu đếm tế bào sau khi nhỏ giọt dịch từ 3 đến 5 phút, phải đếm các tế bào nằm trên 2 đường kẻ kề nhau được chọn của từng ô.
Kết quả: Số tế bào trên 1ml mẫu phân tích (N) được tính như sau:
N (tế bào/ml) = A x 1000/ V x f = A x 4.106/f Trong đó: A: số tế bào trung bình có trong 1 ô vuông lớn.
V: thể tích một ô vuông nhỏ 1/4000 mm3 f: hệ số pha loãng mẫu.