3.1.3.1. Khả năng ức chế nấm R. solani của hai chủng xạ khuẩn
Khi nuôi cấy trên môi trường thạch A1, A2 cả hai chủng xạ khuẩn S. hygroscopicus 11405 và S. hygroscopicus CNLM đều có khả năng sinh kháng sinh thể hiện bằng khả năng ức chế phát triển của nấm R. solani. Trong đó, chủng S. hygroscopicus 11405 (vòng kháng nấm là 20,1 mm) thể hiện hoạt tính kháng nấm cao hơn chủng S. hygroscopicus CNLM (vòng kháng nấm là 18,2 mm) (Bảng 3.2). Khi nuôi cấy trong môi trường lỏng FM3, cả hai chủng
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn xạ khuẩn S. hygroscopicus 11405 và S. hygroscopicus CNLM đều có khả năng sinh kháng sinh kháng nấm, đường kính vòng kháng nấm lần lượt là 17,6 và 15,7 mm (Bảng 3.2).
Như vậy, trong cả hai điều kiện nuôi cấy trên đĩa Petri thạch và nuôi cấy chìm, chủng S. hygroscopicus 11405 đều có khả năng sinh kháng sinh kháng nấm cao hơn chủng S. hygroscopicus CNLM.
Bảng 3.2. Khả năng ức chế nấm R. solani của hai chủng S. hygroscopicus
11405 và S. hygroscopicus CNLM
Chủng xạ khuẩn Đường kính vòng kháng nấm (D-d) (mm)
Môi trường thạch Lên men chìm
S. hygroscopicus 11405 20,1 17,6
S. hygroscopicus CNLM 18,2 15,7
Ghi chú:
D: Đường kính vòng kháng khuẩn d: Đường kính thỏi thạch.
3.1.3.2. Xác định khả năng sinh val-A của hai chủng xạ khuẩn bằng sắc ký lỏng cao áp
Khi phân tích khả năng sinh tổng hợp val-A trong dịch lên men của hai chủng S. hygroscopicus 11405 và S. hygroscopicus CNLM bằng phân tích HPLC cho thấy: cả hai chủng xạ khuẩn đều có khả năng sinh val-A do thời gian lưu (retention time) của sản phẩm trong dịch lên men với val-A chuẩn có độ tương đồng là 3,5 phút. Điều đó chứng tỏ cả hai chủng xạ khuẩn trên đều có khả năng sinh val-A (Hình 3.3).
Khi tính toán nồng độ val-A trong dịch lên men căn cứ vào độ rộng của đỉnh peak cho thấy, chủng S. hygroscopicus 11405 và S. hygroscopicus
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn CNLM sinh val-A trong dịch lên men lần lượt là 7,75 mg/ml và 5,75 mg/ml (Hình 3.3).
(A)
(B)
(C)
Hình 3.3. Phổ sắc ký lỏng cao áp (HPLC) của val-A chuẩn (A) và val-A có trong dịch lên men của chủng S. hygroscopicus 11405 (B) và chủng S.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu http://www.lrc-tnu.edu.vn