CHƯƠNG 4.KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.4. Khả năng tổng hợp IAA của các dòng vi khuẩn
Hai mươi sáu dòng vi khuẩn được nuôi trong môi trường RMR lỏng không có bổ sung trypto phan và cú bổ sung tryptophan (100 àg/ml), theo dừi và đo hàm lượng
51,415d
87,773a
67,496b
56,822c
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
Ngày 5 Ngày 10 Ngày 15 Ngày 20
Hàm lƣợng lõn hũa tan (àg/ml)
Ngày sau khi chủng
IAA tạo ra bằng phương pháp Salkowski (Glickman và Dessaux, 1995). Kết quả cho thấy phần lớn các dòng vi khuẩn đều tổng hợp lượng IAA cao và khác biệt có ý nghĩa thống kê ở mức 1% giữa các dòng vi khuẩn. 24/26 dòng vi khuẩn có khả năng tổng hợp IAA trong môi trường RMR không có bổ sung tryptophan, trong đó 2 dòng không có khả năng tổng hợp IAA là SH22 và SH26 nhưng khi được nuôi trong môi trường RMR có bổ sung tryptophan, tất cả 26 dòng đều có khả năng tổng hợp IAA.
Trong môi trường RMR không có bổ sung tryptophan, 24 dòng có khả năng tổng hợp IAA với lượng IAA khỏ cao. SH9 tổng hợp được IAA cao nhất (13,333 àg/ml) ở ngày thứ 4 sau khi chủng. Lượng IAA tổng hợp của 11/24 dòng vi khuẩn tăng dần sau 4 ngày chủng và đạt hàm lượng cao nhất ở ngày 4, sau đó giảm dần đến ngày 8. Có 10/24 dòng vi khuẩn tổng hợp lượng IAA tăng dần đến ngày 6 và có lượng IAA cao nhất vào thời điểm 6 ngày sau khi chủng, sau đó lượng IAA giảm ở ngày 8. Tuy nhiên, có 3 dòng vi khuẩn SH2, SH3 và SH16 tạo ra lượng IAA nhiều nhất vào ngày thứ 2, rồi giảm dần theo thời gian. Từ kết quả trên thấy được 2 dòng SH8 và SH9 tổng hợp được lượng IAA cao và cao đồng đều nhau sau 2, 4 và 6 ngày sau khi chủng (Bảng 12).
Bảng 12: Khả năng tổng hợp IAA của các dòng vi khuẩn đƣợc nuôi trong môi trường RMR không có bổ sung tryptophan sau 2 ngày, 4 ngày, 6 ngày và 8 ngày chủng
STT Dòng
vi khuẩn
Hàm lƣợng IAA trung bỡnh (àg/ml)
Ngày 2 Ngày 4 Ngày 6 Ngày 8
1 SH1 7,697d 8,667e 11,492b 2,992f
2 SH2 6,324e 2,667j 2,563l 1,772ij
3 SH3 4,167g 2,833j 2,484l 1,285kl
4 SH4 5,955ef 8,583e 3,675j 3,398e
5 SH5 6,206ef 9,417d 7,683f 2,182h
6 SH6 3,429h 4,917h 9,984e 6,081b
7 SH7 1,321i 1,917k 10,897c 3,416e
8 SH8 10,383b 11,167b 10,579d 5,187c
9 SH9 12,570a 13,333a 11,849a 8,439a
10 SH10 9,811c 10,083c 11,730ab 2,066hi
11 SH11 6,221ef 7,417f 5,063g 1,504jk
12 SH12 0,272lm 3,333i 2,087m 1,447jk
13 SH13 0,465kl 2,417j 0,817pq 0,309n
14 SH14 0,000m 0,000n 0,540q 0,228n
15 SH15 5,816f 7,333f 3,992i 3,561de
16 SH16 7,292d 5,583g 3,437j 2,423gh
17 SH17 0,465kl 4,583h 2,722l 0,959lm
18 SH18 3,360h 5,833g 4,548h 3,886d
19 SH19 0,114lm 0,667m 0,738pq 0,309n
20 SH20 0,377klm 0,583m 1,135no 0,228n
21 SH21 0,728jk 1,167l 1,016op 0,797m
22 SH22 0,000m 0,000n 0,000r 0,000n
23 SH23 0,026m 0,667m 0,738pq 0,146n
24 SH24 0,114lm 1,417l 1,373n 1,203kl
25 SH25 0,991ij 1,583kl 3,119k 2,748fg
26 SH26 0,000m 0,000n 0,000r 0,000n
CV % = 4,883; LSD.01 = 0,188
Ghi chú: Các giá trị trung bình theo sau bởi các chữ cái giống nhau trong cùng một cột thì khác biệt không ý nghĩa ở 1% theo kiểm định LSD
Hình 7: Lƣợng IAA tổng hợp trung bình của các dòng vi khuẩn nuôi trong môi trường RMR không bổ sung tryptophan theo ngày sau khi chủng
Lượng IAA trung bình của các dòng vi khuẩn nuôi ở môi trường không bổ sung tryptophan theo ngày sau khi chủng khác biệt có ý nghĩa ở mức 1% theo kiểm định LSD. Lượng IAA tăng dần và đạt giá trị cao nhất ở ngày 4, giảm nhẹ ở ngày 6 và giảm mạnh ở ngày 8. Lượng IAA đạt cao nhất ở cả ngày 4 và ngày 6, khác biệt không có ý nghĩa thống kê với nhau, tiếp theo là ngày 2 và đạt thấp nhất ở ngày 8.
Trong môi trường RMR có bổ sung tryptophan, tất cả các dòng vi khuẩn đều có khả năng tổng hợp IAA với lượng IAA khá cao. SH16 tổng hợp được IAA cao nhất (19,250 àg/ml) ở ngày thứ 4 sau khi chủng. Khuynh hướng chung của cỏc dũng vi khuẩn là tổng hợp IAA tăng dần sau 4 ngày chủng và đạt hàm lượng cao nhất ở ngày 4, sau đó giảm dần đến ngày 8. Một số dòng vi khuẩn (SH6, SH7, SH8, SH10, SH23, SH25 và SH26) tổng hợp lượng IAA tăng dần đến ngày 6 và có lượng IAA cao nhất vào thời điểm 6 ngày sau khi chủng, sau đó lượng IAA giảm ở ngày 8. Tuy nhiên, có 3 dòng vi khuẩn SH2, SH11 và SH15 tạo ra lượng IAA nhiều nhất vào ngày thứ 2, rồi giảm dần đến ngày 8. Từ kết quả trên thấy rằng 3 dòng SH9, SH10 và SH11 tổng hợp đươc lượng IAA cao và đồng đều trong 6 ngày đầu sau khi chủng (Bảng 13).
Khả năng sinh tổng hợp IAA của những dòng vi khuẩn phân lập được cao hơn rất nhiều so với những dòng vi khuẩn nội sinh phân lập ở cây Cúc Xuyên Chi trên môi trường RMR của Lương Thị Hồng Hiệp (2010) với lượng IAA cao nhất là 0,91 àg/ml và cao hơn các dòng vi khuẩn phân lập được từ rễ và thân cây lúa phân lập trên môi trường Nfb của Lăng Ngọc Dậu (2006) (15,61 àg/ml).
3,619b
4,468a 4,395a
2,176c
0 0,5 1 1,5 2 2,5 3 3,5 4 4,5 5
Ngày 2 Ngày 4 Ngày 6 Ngày 8
Hàm lƣợng IAA (àg/ml)
Ngày sau khi chủng
Bảng 13: Khả năng tổng hợp IAA của các dòng vi khuẩn đƣợc nuôi trong môi trường RMR có bổ sung tryptophan sau 2 ngày, 4 ngày, 6 ngày và 8 ngày chủng
STT Dòng
vi khuẩn
Hàm lƣợng IAA trung bỡnh (àg/ml)
Ngày 2 Ngày 4 Ngày 6 Ngày 8
1 SH1 8,272ef 17,417b 12,087b 4,699e
2 SH2 8,623e 5,417i 5,421g 4,620e
3 SH3 5,202j 5,583i 5,500g 3,642g
4 SH4 7,219g 10,750e 10,183e 4,130f
5 SH5 6,781h 13,083c 11,135d 4,211f
6 SH6 5,728i 6,333h 11,532c 3,724g
7 SH7 5,114j 5,417i 11,373cd 3,561g
8 SH8 10,728b 10,750e 11,056d 4,618e
9 SH9 12,833a 12,083d 12,325b 8,846b
10 SH10 13,096a 13,417c 14,944a 10,472a
11 SH11 9,325d 8,083f 7,802f 7,301c
12 SH12 2,482l 4,083j 1,452kl 0,878jkl
13 SH13 2,307l 3,000mn 1,611jk 0,797jkl
14 SH14 2,482l 3,167lm 2,087i 1,285i
15 SH15 9,851c 3,667jk 1,373klm 0,146n
16 SH16 8,096f 19,250a 5,659g 5,268d
17 SH17 2,307l 7,333g 3,440h 0,715h
18 SH18 5,640i 5,833i 1,849ij 1,691h
19 SH19 1,167n 1,583o 0,817n 0,797jkl
20 SH20 1,167n 2,583n 0,817n 0,146n
21 SH21 2,921k 3,500kl 1,135lmn 0,959ijk
22 SH22 0,640o 1,333o 0,817n 0,553lm
23 SH23 0,465o 0,833p 0,976n 0,309mn
24 SH24 0,728o 1,583o 0,817n 0,634klm
25 SH25 1,693m 3,167lm 5,738g 1,041ij
26 SH26 0,640o 0,833p 1,056mn 1,041ij
CV % = 3,536; LSD.01 = 0,188
Ghi chú: Các giá trị trung bình theo sau bởi các chữ cái giống nhau trong cùng một cột thì khác biệt không ý nghĩa ở 1% theo kiểm định LSD
Hình 8: Lƣợng IAA tổng hợp trung bình của tất cả các dòng vi khuẩn nuôi ở môi trường RMR có bổ sung tryptophan theo ngày sau khi chủng
Lượng IAA trung bình của tất cả các dòng vi khuẩn nuôi ở môi trường RMR có bổ sung tryptophan theo ngày sau khi chủng khác biệt rất có ý nghĩa ở mức 1% theo kiểm định LSD. Lượng IAA tăng dần và đạt giá trị cao nhất ở ngày 4, giảm nhẹ ở ngày 6 và giảm mạnh ở ngày 8 giống với xu hướng tổng hợp IAA của những dòng vi khuẩn này khi được nuôi ở môi trường RMR không bổ sung tryptophan. Lượng IAA đạt cao nhất ở ngày 4, theo sau lần lượt là ngày 6 và ngày 2 và thấp nhất ở ngày 8 (Hình 8).
Hình 9: Lƣợng IAA tổng hợp trung bình của 26 dòng vi khuẩn phân lập được nuôi trong môi trường RMR không có bổ sung tryptophan
và có bổ sung tryptophan
24/26 dòng có khả năng tổng hợp IAA mà không cần sử dụng tiền chất tryptophan, còn 2 dòng SH22 và SH26 chỉ tổng hợp được IAA từ tiền chất tryptophan.
Phần lớn các vi khuẩn tổng hợp được lượng IAA cao hơn khi được nuôi trong môi
5,212c
6,542a
5,500b
2,964d
0 1 2 3 4 5 6 7
Ngày 2 Ngày 4 Ngày 6 Ngày 8
Hàm lƣợng IAA (àg/ml)
Ngày sau khi chủng
0 2 4 6 8 10 12 14
SH1 SH2 SH3 SH4 SH5 SH6 SH7 SH8 SH9 SH10 SH11 SH12 SH13 SH14 SH15 SH16 SH17 SH18 SH19 SH20 SH21 SH22 SH23 SH24 SH25 SH26
Hàm lƣợng IAA (àg/ml)
Dòng vi khuẩn
Không bổ sung tryptophan Có bổ sung tryptophan
trường có bổ sung tryptophan, ngoại trừ các dòng SH15, SH18 và SH24. Có 7/26 dòng vi khuẩn có khả năng tổng hợp IAA khá cao (SH1, SH5, SH6, SH8, SH9, SH10 và SH11) và 6 dòng SH19, SH20, SH22, SH23, SH24 và SH26 tổng hợp lượng IAA tương đối thấp (Hình 9).
Từ tất cả các kết quả trên, tuyển chọn được 8/26 dòng vi khuẩn nội sinh có đặc tính tốt, trong đó 4 dòng khả năng cố định đạm tốt đồng thời cũng có khả năng hòa tan lân khá cao và tổng hợp IAA khá tốt so với những dòng khác là SH9, SH15, SH16 và SH18và 4 dòng SH 4, SH6, SH7 và SH17 có khả năng hòa tan lân cao nhất trong tất cả các dòng vi khuẩn phân lập được.
CHƯƠNG 5. KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ